公开(公告)号：CN110982912A

公开(公告)日：2020-04-10

申请号：CN202010097319.6

申请日：2020-02-18

Applicant: 吉林大学

Inventor： 房希碧 ,  李晓慧 ,  赵志辉 ,  杨润军 ,  于海滨 ,  姜平 ,  夏立新 ,  张修齐 ,  何维 ,  张福成

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明公开了一种利用RRAD基因遗传标记检测牛胴体肉质性状的方法，尤其涉及一种通过RRAD基因3’非翻译区（3’UTR）序列的SNPs作为牛肉质和胴体性状分子标记的检测方法，通过对牛的基因组DNA混池或个体DNA为模板进行PCR扩增，采用DNA测序的方法检测，公开了1个SNP1位点，并基于对每个个体的SNP1进行了基因分型与牛胴体和肉质性状的关联分析结果，提供了一种能够在DNA水平上早期筛查和预测牛胴体和肉质性状的分子标记，应用于牛的分子育种及早期选育；本发明利用RRAD基因的SNP1即3’UTR 198 G>A，作为检测肉牛胴体和肉质性状遗传标记的方法，为遗传育种研究和生产饲养早期选育优质牛个体及改善牛肉质和胴体性状奠定基础。

公开(公告)号：CN104745716B

公开(公告)日：2017-03-01

申请号：CN201510195275.X

申请日：2015-04-23

Applicant: 吉林大学

Inventor： 龙小娟 ,  芦春艳 ,  赵志辉 ,  杨润军

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种牛AGPAT6基因单核苷酸多态性的检测方法，其方法为：第一步、用牛的全血进行全基因组DNA提取；第二步、以提取的全基因组DNA为模板，分别以引物对A、B为引物，PCR扩增牛AGPAT6基因；第三步、用PCR混合产物测序，找出SNP位点；第四步、用限制性内切酶对PCR产物进行酶切；第五步、将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳，然后根据电泳条带判定其多态性。有益效果：本发明利用PCR-RFLP技术对牛AGPAT6基因第1外显子的303bp处的T>C单核苷酸多态性和第12外显子的299bp处的G>A单核苷酸多态性进行检测。提供了一种低成本、简单、精准、便于推广应用的在DNA水平上筛查和检测与牛肉质性状和胴体性状密切相关的遗传标记，可用于牛的辅助选择和分子育种。

公开(公告)号：CN101864428B

公开(公告)日：2012-10-03

申请号：CN201010102855.7

申请日：2010-01-29

Applicant: 吉林大学

Inventor： 张永宏 ,  赵志辉 ,  高妍 ,  张嘉保 ,  孙博兴 ,  姜昊 ,  闫守庆 ,  杨润军 ,  牛淑玲 ,  邢沈阳

IPC: C12N15/15 ,  C12N15/12 ,  C12N15/10 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明属于动物基因工程技术领域，研究两个影响肉质性状的候选基因即钙蛋白酶抑制蛋白(CAST)基因和肥胖(OB)基因在松辽黑猪标记辅助选择中的应用。在CAST基因内含子6存在一个A→G的碱基突变，导致了Hinf I限制性酶切位点的改变，产生多态性片段；OB基因第3469位碱基处存在一个T→C的碱基突变，导致限制性片段长度多态性的产生。将两个候选基因两个突变位点作为一个分子标记，通过聚合PCR-RFLP的方法，用限制性内切酶Hinf I检测两个突变位点，并将检测结果与松辽黑猪的肉质性状进行关联分析，以期为松辽黑猪的选种、早期选育、杂种优势的利用等提供基础参数，为松辽黑猪改良育种和新品系的培育提供理论依据和实验基础。本发明的特点在于建立CAST基因和OB基因聚合PCR，同时建立两个候选基因同一个限制性内切酶Hinf I聚合酶切方法，为松辽黑猪的标记辅助选择提供实验依据。

公开(公告)号：CN109468390B

公开(公告)日：2021-09-14

申请号：CN201811616457.X

申请日：2018-12-28

Applicant: 吉林大学

Inventor： 杨润军 ,  王梦岩 ,  赵志辉 ,  房希碧 ,  余湘

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种DLK1基因标记检测西门塔尔牛胴体脂肪覆盖率的方法，以中国西门塔尔牛DLK1基因的DNA序列为模板，设计一对引物，进行严格的PCR反应体系进行样品的PCR扩增和电泳，通过测序筛查并找到2个SNP位点；群体中筛查DLK1‑478 C/T位点的限制性内切酶为Msp I，该酶限定的切割碱基为CCGG;筛查DLK1‑609 T/G位点的限制性内切酶为Ase I；中国西门塔尔牛群体中携带DLK1‑478 C/T位点T等位基因和TT突变基因型个体具有较高的脂肪覆盖率和较好的大理石花纹；及携带DLK1‑609 T/G位点的G等位基因和GG突变基因型个体具有较高的脂肪覆盖率。本发明DLK1基因两个突变位点可以作为预示中国西门塔尔牛脂肪覆盖率和大理石花纹性状遗传标记，用于肉用牛早期标记辅助选择。

公开(公告)号：CN104630341B

公开(公告)日：2017-12-05

申请号：CN201410678809.X

申请日：2014-11-24

Applicant: 吉林大学

Inventor： 杨润军 ,  赵志辉 ,  许黄涛 ,  谭宇鹏 ,  房希碧 ,  芦春艳

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开了一种中国西门塔尔牛FGF‑1基因作胴体肉品质的遗传标记，该方法以中国西门塔尔牛基因组DNA或包含中国西门塔尔牛FGF‑1基因的DNA序列为模板，利用PCR引物对P1、P 2和P3，扩增中国西门塔尔牛FGF‑1基因功能区域片段，通过测序筛查，限制性内切酶Xsp‑Ⅰ、Hae‑III和Rsa‑I进行酶切、电泳分析，从而确定中国西门塔尔牛FGF‑1基因第2内含子第8528位、第13970位和第72251位的SNPs（A>T、A>T和A>C）。筛查获得的SNPs中SNP1位点的T等位基因和TT基因型、SNP2位点的C等位基因和CC基因型及SNP3位点的T等位基因和TT基因型可作为显著提高中国西门塔尔牛胴体组成性状和肉品质性状的有效分子遗传标记，以用于肉牛胴体组成和肉质形状早期标记辅助选择分子育种。

公开(公告)号：CN104611349B

公开(公告)日：2017-10-03

申请号：CN201410678775.4

申请日：2014-11-24

Applicant: 吉林大学

Inventor： 杨润军 ,  赵志辉 ,  梁晶婕 ,  房希碧 ,  龙小娟 ,  肖航 ,  姜平

IPC: C12N15/54 ,  C12Q1/68

Abstract: 本发明公开了一种影响中国西门塔尔牛脂肪沉积的FDFT1基因关键位点，涉及中国西门塔尔牛脂肪沉积性状相关FDFT1基因单核苷酸多态性的检测方法，该方法以中国西门塔尔牛基因组DNA或包含中国西门塔尔牛FDFT1基因的DNA序列为模板，利用PCR引物对P1和P2，扩增中国西门塔尔牛FDFT1基因功能区域片段，通过测序筛查，限制性内切酶Hae‑III和Hpa‑II进行酶切、电泳分析，从而确定中国西门塔尔牛FDFT1基因第4内含子第130位的SNP1（T>C）和第8外显子第500位的SNP2（C>T）。筛查获得的SNPs中SNP1位点的T等位基因和TT基因型及SNP2位点的C等位基因和CC基因型可作为显著提高中国西门塔尔牛脂肪沉积和肌间脂肪酸含量性状的有效分子遗传标记，以用于肉牛肉质性状早期标记辅助选择分子育种。

公开(公告)号：CN105567863A

公开(公告)日：2016-05-11

申请号：CN201610152992.9

申请日：2016-03-17

Applicant: 吉林大学

Inventor： 赵志辉 ,  姜平 ,  芦春艳 ,  杨润军 ,  房希碧 ,  龙小娟 ,  肖航

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6888 ,  C12Q2600/124 ,  C12Q2600/156

Abstract: 本发明公开了一种利用PRSS2基因作为乳蛋白含量分子标记的检测方法，具体为：第一步；采取牛的血液进行全基因组DNA的提取，利用琼脂糖凝胶电泳的方法，检查DNA的质量；第二步：以全基因组DNA为模板，以引物A为引物进行PCR扩增牛PRSS2基因片段；第三步：用全基因组DNA进行混池PCR，找到多态性的位点，第四步：对单个样品进行测序，根据测序结果进行多态性关联分析；有益效果：发现了5个SNP位点与牛的乳品质中乳蛋白性状的相关性。提供了一种简单，快速的在DNA水平上筛查和检测与牛乳品质性状密切相关的遗传标记，可应用于牛的分子育种。解决了SSCP、PCR—PFLP技术的繁琐性，提高了准确性和精确度。

公开(公告)号：CN105063232A

公开(公告)日：2015-11-18

申请号：CN201510593430.3

申请日：2015-09-17

Applicant: 吉林大学

Inventor： 芦春艳 ,  赵志辉 ,  杨润军 ,  姜平 ,  房希碧 ,  龙小娟 ,  肖航

IPC: C12Q1/68

CPC classification number: C12Q1/6851 ,  C12Q2531/113 ,  C12Q2527/107

Abstract: 本发明公开了一种牛乳脂代谢相关基因C4BPA定量PCR检测方法，其方法为：第一步、设计特异性的定量引物；第二步、乳腺组织RNA的提取；第三步、将乳腺组织RNA反转录为cDNA；第四步、进行荧光定量PCR反应。有益效果：提供了一种简单、快速、低成本、精确度高、便于在基因组水平上筛查和检测C4BPA基因与奶牛乳脂代谢的相关性的定量PCR方法。为进一步研究该基因及探讨可能影响奶牛乳脂的基因提供了依据及可靠的研究方法。本发明筛查获得C4BPA基因与奶牛乳脂代谢相关，可用于奶牛的育种工作，以便满足不同人群对牛奶中乳脂含量的要求。

公开(公告)号：CN104789651A

公开(公告)日：2015-07-22

申请号：CN201510026343.X

申请日：2015-01-20

Applicant: 吉林大学 ,  吉林农业大学

Inventor： 李玉梅 ,  闫守庆 ,  姚纪元 ,  白春燕 ,  赵志辉

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6879

Abstract: 本发明公开了一种鉴定乌苏里貉性别的PCR引物，所述PCR引物的核苷酸序列如核苷酸序列表中的序列1和序列2所示。本发明还提供了一种利用乌苏里貉性别鉴定用PCR引物鉴定乌苏里貉性别的方法，该方法为：以待测乌苏里貉的总DNA为模板，利用乌苏里貉性别鉴定用PCR引物进行PCR扩增，然后结合PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳技术确定乌苏里貉个体的性别。本发明应用于乌苏里貉的性别鉴定，既快速简便，又结果准确。

公开(公告)号：CN104059963B

公开(公告)日：2015-07-08

申请号：CN201310621249.X

申请日：2013-11-29

Applicant: 吉林大学

Inventor： 杨润军 ,  赵志辉 ,  于海滨 ,  孙博兴 ,  芦春艳 ,  张永宏 ,  沈冰蕾

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明公开一种中国西门塔尔牛胴体和肉质性状遗传标记的检测方法，利用DNA池测序和PCR-RFLP技术筛查和检测中国西门塔尔牛GPAM基因功能突变的方法。通过关联分析寻找与中国西门塔尔牛胴体组成和肉质性状相关的SNPs作为分子遗传标记，应用于肉牛早期选择和分子聚合育种，进一步加快中国西门塔尔牛肉用性能的选育和提高。