公开(公告)号：CN100519577C

公开(公告)日：2009-07-29

申请号：CN200610163285.6

申请日：2006-12-20

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 李泽鸿 ,  张国利 ,  岳玉环 ,  朱平 ,  陈萍 ,  张林波 ,  赵福广 ,  吴广谋 ,  郑艳军 ,  张玲

IPC: C07K14/195 ,  C07K19/00 ,  C12N15/31 ,  C12N15/62 ,  C12N15/09 ,  A61K38/16 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了重组白喉毒素及其制备方法和应用，白喉毒素DAB389与α-促黑素细胞激素两者之间添加了以(Gly4Ser)2组成的连接肽，为了重组毒素纯化的方便，添加上前缀体，扩增出前缀体+DAB389(Gly4Ser)2-αMSH基因片段，构建pET28a/前缀体+DAB389(Gly4Ser)2-αMSH表达质粒，转化到大肠杆菌中表达，经IPTG诱导，获得含有前缀体+DAB389(Gly4Ser)2-αMSH的表达蛋白，再经过纯化、Xa因子酶切、分离获得DAB389(Gly4Ser)2-αMSH的融合蛋白，本发明通过实验证明：重组白喉毒毒素具有纯化方便，减少成本，收率高，提高重组毒素活性的优点；同时对恶性黑色素瘤具有特异性攻击和杀伤的特性，而对正常细胞无伤害，达到有效治疗恶性黑色素瘤疾病的目的。

公开(公告)号：CN101003568A

公开(公告)日：2007-07-25

申请号：CN200610163285.6

申请日：2006-12-20

Applicant: 吉林农业大学

Inventor： 李泽鸿 ,  张国利 ,  岳玉环 ,  朱平 ,  陈萍 ,  张林波 ,  赵福广 ,  吴广谋 ,  郑艳军 ,  张玲

IPC: C07K14/195 ,  C07K19/00 ,  C12N15/31 ,  C12N15/62 ,  C12N15/09 ,  A61K38/16 ,  A61P35/00

Abstract: 本发明公开了重组白喉毒素及其制备方法和应用，白喉毒素DAB389与α－促黑素细胞激素两者之间添加了以(Gly4Ser)2组成的连接肽，为了重组毒素纯化的方便，添加上前缀体，扩增出前缀体+DAB389(Gly4Ser)2－αMSH基因片段，构建pET28a/前缀体+DAB389(Gly4Ser)2－αMSH表达质粒，转化到大肠杆菌中表达，经IPTG诱导，获得含有前缀体+DAB389(Gly4Ser)2－αMSH的表达蛋白，再经过纯化、Xa因子酶切、分离获得DAB389(Gly4Ser)2－αMSH的融合蛋白，本发明通过实验证明：重组白喉毒毒素具有纯化方便，减少成本，收率高，提高重组毒素活性的优点；同时对恶性黑色素瘤具有特异性攻击和杀伤的特性，而对正常细胞无伤害，达到有效治疗恶性黑色素瘤疾病的目的。