公开(公告)号：CN110229220A

公开(公告)日：2019-09-13

申请号：CN201910531405.0

申请日：2019-06-19

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 李迅 ,  王亮亮 ,  王月皎 ,  李文谦 ,  王飞 ,  张瑜

IPC: C07K14/39 ,  C12N15/31 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21

Abstract: 本发明提供了一种基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统及其构建方法和应用，属于分子生物学、食品以及基因工程技术领域。本发明所述系统包括锚定蛋白和多蛋白展示底架蛋白，所述锚定蛋白为酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p；所述多蛋白展示底架蛋白为梭菌纤维小体的人工迷你脚手架蛋白MixA2。本发明提供的基于纤维小体的毕赤酵母表面共展示系统能实现在细胞表面的多蛋白共展示；利用重组菌制备与对接模块(dockerin)融合表达的外源蛋白，不需要经过纯化，能直接通过重组蛋白上的对接模块(dockerin)和MixA2上的粘连模块(Cohesin)特异性结合，使多个蛋白展示在细胞表面，有效节约重组蛋白的制备成本。

公开(公告)号：CN105062909A

公开(公告)日：2015-11-18

申请号：CN201510600813.9

申请日：2015-09-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 王飞 ,  李文谦 ,  丁怀海 ,  时号 ,  李迅 ,  张瑜

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12P7/64 ,  C12R1/84

CPC classification number: Y02E50/13

Abstract: 本发明公开了一种双脂肪酶细胞表面共展示工程菌及其构建方法和应用，该工程菌，为以酿酒酵母细胞壁蛋白Sed1p作为锚定蛋白，以米根霉脂肪酶和南极假丝酵母脂肪酶B为双脂肪酶靶蛋白，共同展示在毕赤酵母细胞表面，构建出的双脂肪酶细胞表面共展示重组酵母工程菌。本发明将米根霉脂肪酶与南极假丝酵母脂肪酶B共展示于毕赤酵母细胞壁表面，制备了米根霉脂肪酶与南极假丝酵母脂肪酶B细胞表面共展示型全细胞催化剂，该表面共展示型全细胞催化剂最高酶活为686U/g-细胞干重，分别是单独展示米根霉脂肪酶或南极假丝酵母脂肪酶B的酶活力的3倍和2倍，催化油脂转酯化反应甲酯得率达96%。