负载碱性抗肿瘤药物的高分子纳米粒子

    公开(公告)号:CN102697735A

    公开(公告)日:2012-10-03

    申请号:CN201210204331.8

    申请日:2012-06-18

    Abstract: 本发明涉及负载碱性抗肿瘤药物的高分子纳米粒子。本发明构成纳米粒子的高分子材料具有生物可相容性及生物可降解性,高分子材料负载碱性抗肿瘤药物;所述高分子材料包括脂质体、聚乳酸、聚乳酸-羟基乙酸共聚物、聚己内酯、壳聚糖、白蛋白、环糊精;所述碱性抗肿瘤药物是为pKa>7.4的小分子抗肿瘤药物,包括阿霉素、表阿霉素、紫杉醇、多西紫杉醇、长春花碱、长春新碱、拓扑替康、生物碱类中药单体。本发明解决了过去难以逆转pH依赖性生理性耐药的缺陷。本发明不引入附加药物,对生物体内环境的影响小,通过高分子纳米粒子逆转pH依赖性生理性耐药,不仅有效,而且由于对生物体的内环境不造成影响,因此,使用安全,副作用小,应用范围广。

    从胸、腹水中提取游离mRNA的方法

    公开(公告)号:CN1952176B

    公开(公告)日:2010-10-13

    申请号:CN200610096455.3

    申请日:2006-09-27

    Abstract: 本发明涉及一种从胸、腹水中提取游离mRNA的方法。本发明将胸或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中,离心,吸取上清,再离心,再吸取上清,上清加入到Trizol LS溶液中,室温震荡,加入氯仿,剧烈震荡后室温下放置,离心,吸取水相层至新管,加入异丙醇,沉淀RNA,离心,75%乙醇洗涤后晾干,加入无RNA酶水,溶解RNA,以其为模板,常规技术反转录为cDNA保存。解决了过去无法从胸、腹水中抽提RNA的缺陷,可以对肿瘤及其他疾病进行早期诊治。操作方便,重复性强。

    抗肿瘤纳米热敏靶向药物载体的制备方法

    公开(公告)号:CN1329081C

    公开(公告)日:2007-08-01

    申请号:CN200510040571.9

    申请日:2005-06-17

    Abstract: 本发明涉及一种结合化疗热疗应用的抗肿瘤纳米热敏靶向药物载体的制备方法。本发明以N-异丙基丙烯酰胺(NIPAAm)和丙烯酰胺(Aam)为单体聚合,形成共聚物poly(NIPAAm-co-Aam),制得亲水片段,再将共聚物poly(NIPAAm-co-Aam)与D,L-丙交酯通过开环聚合反应后得poly(NIPAAm-co-Aam)共聚物与聚D,L-丙交酯的嵌段共聚物,制得嵌段共聚物,再将嵌段共聚物溶于DMAc中,在水中自发形成胶束结构,制得药物载体。本发明制备的药物靶向载体可在人体内长期循环不被清除,只在热疗肿瘤组织处才释放化疗药物,解决了现有化疗热疗联合应用治疗肿瘤时化疗药物在肿瘤组织分布不高的缺陷,减少了化疗药物对人体正常组织细胞的损害。

    从胸、腹水中提取游离mRNA的方法

    公开(公告)号:CN1952176A

    公开(公告)日:2007-04-25

    申请号:CN200610096455.3

    申请日:2006-09-27

    Abstract: 本发明涉及一种从胸、腹水中提取游离mRNA的方法。本发明将胸或腹水注入有枸橼酸钠溶液的无RNA酶抗凝管中,离心,吸取上清,再离心,再吸取上清,上清加入到Trizol LS溶液中,室温震荡,加入氯仿,剧烈震荡后室温下放置,离心,吸取水相层至新管,加入异丙醇,沉淀RNA,离心,75%乙醇洗涤后晾干,加入无RNA酶水,溶解RNA,以其为模板,常规技术反转录为cDNA保存。解决了过去无法从胸、腹水中抽提RNA的缺陷,可以对肿瘤及其他疾病进行早期诊治。操作方便,重复性强。

    结合化疗热疗应用的抗肿瘤纳米热敏靶向药物载体

    公开(公告)号:CN1720996A

    公开(公告)日:2006-01-18

    申请号:CN200510040570.4

    申请日:2005-06-17

    Abstract: 本发明涉及一种结合化疗热疗应用的抗肿瘤纳米热敏靶向药物载体。本发明的纳米热敏靶向药物载体采用嵌段共聚物胶束,是两亲性嵌段共聚物,疏水片段形成内核,亲水片段形成外壳,外壳围绕内核,亲水片段物质是热敏多聚物,低临界溶解温度在37°-42°,构成疏水片段的物质是聚乳酸。本发明解决了现有化疗热疗联合应用治疗肿瘤时,化疗药物肿瘤组织分布低的缺陷,避免了化疗药物对人体正常组织细胞的损害;解决了现有技术中化学键结合带来的化疗药物活性改变的缺陷,也解决了非化学键结合带来的LCST低于人体正常温度而导致化疗药物载体在人体内不能起到热靶向作用的难题。

    一种从土鳖虫提取抗肿瘤有效部位的方法

    公开(公告)号:CN1709382A

    公开(公告)日:2005-12-21

    申请号:CN200510040664.1

    申请日:2005-06-23

    Abstract: 本发明涉及一种从中药土鳖虫中分离、提取抗肿瘤的有效部位脂肪酸的方法。本发明采用将土鳖虫经有机溶剂提取得粗脂肪酸,再经柱层析法分离得有效部位脂肪酸,主要包括7-十八碳烯酸、十六烷酸、9-十六碳烯酸、十八酸。本发明采用简单的方法分离、提取到土鳖虫中真正具有抗肿瘤作用和疗效的脂肪酸成分,并经实验证实单味中药土鳖虫有机溶剂提物具有广谱杀瘤作用,可用于治疗多种恶性肿瘤。解决了过去无法确定土鳖虫中哪一具体成分具有抗肿瘤功效以及无法提取有效部位的缺陷。本发明方法简单、易操作,成本低。

    自体胸水上清培养TIL细胞的方法

    公开(公告)号:CN1560234A

    公开(公告)日:2005-01-05

    申请号:CN200410014095.9

    申请日:2004-02-18

    Inventor: 刘宝瑞 邹征云

    Abstract: 本发明涉及一种利用自体胸水上清进行TIL细胞的培养方法。本发明采用将收集的癌性胸水离心后保存上清,用作培养基,将下层细胞中的白膜层细胞至该上清培养基中培养,得悬浮的TIL细胞,再至孵箱内培养,1天后加入OKT3、IL-2、PHA等,1、2天再加入IL-2进行培养。本发明的实验数据表明该方法是可行的,与现有方法相比,某些方面相同,某些方面更优。而本发明却避免了现有方法使用人AB血清可能导致的乙肝、爱滋病等传染,体外培养时间过长所增加的污染机率,以及培养时间过长增加病人负担,延长治疗时间和成本增加等缺陷。

    高穿透性纳米抗体融合蛋白制备及其在抗肿瘤中的应用

    公开(公告)号:CN104892766A

    公开(公告)日:2015-09-09

    申请号:CN201410083161.1

    申请日:2014-03-06

    Abstract: 本发明涉及高穿透性纳米抗体融合蛋白制备及其在抗肿瘤中的应用。本发明高穿透性纳米抗体融合蛋白由靶向人EGFR纳米抗体和肿瘤穿透肽iRGD经由连接肽linker,即GGGGSGGGGSGGGGS连接组成。本发明克服了过去存在的融合蛋白只对一小部分肿瘤有作用以及在肿瘤局部无法获得良好的穿透性的缺陷。本发明将编码抗人EGFR抗原的单域抗体和肿瘤穿透肽iRGD的核苷酸序列连接起来,得到编码ant?i-EGFR-iRGD的融合基因片段,并将其插入原核表达质粒载体,涉及了能够表达融合蛋白的宿主细胞,该融合蛋白能在大肠杆菌中高效表达,及在抗肿瘤中的应用,使药物积聚于肿瘤局部,同时融合蛋白通过NRP-1途径,使药物在肿瘤局部获得良好的穿透性,使其更多地进入肿瘤细胞而发挥作用。

    微量游离mRNA提取和富集方法

    公开(公告)号:CN102676500A

    公开(公告)日:2012-09-19

    申请号:CN201210083189.6

    申请日:2012-03-26

    Inventor: 刘宝瑞 沈洁 魏嘉

    Abstract: 本发明涉及微量游离mRNA提取和富集方法。本发明是对含微量游离mRNA的液体离心取上清,加入到Trizol LS溶液中震荡,加入氯仿,剧烈震荡,离心,吸取水相层加入70%乙醇,混匀,转移到RNA pure link mini kit收集管中离心,使用wash buffer1和2洗涤滤网和滤网上的RNA,离心,干燥滤网和RNA,加无RNA酶水溶解RNA,离心,加DNA酶,终止DNA酶反应,离心,获得最终富集并纯化的RNA。本发明解决了血浆游离mRNA的检测存在检出率很低,标本量需求大,重复性差等缺陷。本发明从少量液体中抽提和富集微量(<1ug)游离mRNA的方法,实时定量荧光PCR扩增证实相关目的基因的表达,并且显著提高了微量游离mRNA的检出率,操作方便,灵敏度高,特异性强,可重复性强。

    从连翘中分离抗肿瘤的三萜类化合物的提取方法及应用

    公开(公告)号:CN101230081B

    公开(公告)日:2010-08-04

    申请号:CN200810019176.6

    申请日:2008-01-15

    Abstract: 本发明涉及从常用中药连翘中分离出三萜类化合物的提取方法及应用。本发明步骤是将干燥的连翘果实粉碎并放入95%乙醇中浸泡,乙醇挥干后得浸膏,将浸膏用乙酸乙酯萃取后,硅胶拌样,进行硅胶柱层析,用石油醚、乙酸乙酯混合溶液分次洗脱,点板合并,静置后析出结晶,经重结晶,得三萜类化合物五环三萜类化合物安博立酸和四环三萜类化合物达玛烷化合物即达玛-24-烯-3β-乙酰氧基-20s-醇。本发明克服了连翘只在抗菌、抗病毒、抗炎、解热、保肝等方面的应用局限,提供了安博立酸新的提取方法且提取效率高,并将提取的安博立酸、达玛-24-烯-3 β-乙酰氧基-20s-醇应用于抗肿瘤,毒副作用小,可制成粉剂、针剂、口服胶囊。

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