一种批量提取水稻胚乳DNA的方法

    公开(公告)号:CN103436524B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201310238655.8

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明涉及生物技术领域,公开了一种批量提取水稻胚乳DNA的方法。该方法包括如下步骤:S1.从水稻种子中切取胚乳;S2.将胚乳投入PCR板(T1板)孔中;S3.T1板每孔加入碱液,放入PCR仪中进行加热;S4.取出T1板,每孔投入钨合金珠及1×DNA抽提液;S5.将T1板重新置于PCR仪中进行加热;S6.取出T1板,振动;S7.将T1板放入离心机进行离心;S8.取出T1板,将上清液转移至另一PCR板(T3板)中,T3板每孔中预先加入双蒸水;S9.将T3板置于冰箱中保存。该方法快速、操作简单,可实现水稻胚乳DNA的批量提取。

    一种利用DNA熔解温度分析水稻稻瘟病抗性基因的功能标记

    公开(公告)号:CN103333886B

    公开(公告)日:2016-03-09

    申请号:CN201310238656.2

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明为一种利用DNA熔解温度分析水稻稻瘟病抗性基因的功能标记开发,属生物技术领域。本发明针对传统的水稻Pik基因测序的检测方法,提出一种利用DNA熔解温度分析水稻Pik基因的功能标记。本发明根据水稻等位基因Pik与pik在编码区第2173碱基的C/T变异(Pita为T,pita为C),设计功能标记Pik-C/T。利用该标记进行两轮PCR扩增,第一轮PCR以基因组DNA为模板,利用Pik-C/T-out引物扩增;第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板,利用Pik-C/T-in引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度,通过熔解温度高低区分Pik和pik序列差异,从而判别水稻材料的稻瘟病抗性。

    一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记

    公开(公告)号:CN103333887B

    公开(公告)日:2015-09-30

    申请号:CN201310238711.8

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明为一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记开发,属生物技术领域。本发明针对传统的水稻Pita基因凝胶电泳的检测方法,提出一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记。本发明根据水稻等位基因Pita与pita在编码区第918氨基酸的G/T变异(Pita为G,pita为T),设计功能标记Pita-G/T。利用该标记进行两轮PCR扩增,第一轮PCR以基因组DNA为模板,利用Pita-G/T-out引物扩增;第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板,利用Pita-G/T-in引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度,通过熔解温度高低区分Pita和pita序列差异,从而判别水稻材料的稻瘟病抗性。

    一种水稻空间诱变后代的种植及收获方法

    公开(公告)号:CN103329769B

    公开(公告)日:2014-07-30

    申请号:CN201310230125.9

    申请日:2013-06-09

    Abstract: 本发明公开了一种水稻空间诱变后代的种植及收获方法,属农业技术领域。本发明针对传统的物理和化学诱变技术先收获诱变1代植株全部种子,然后从中随机选择形成诱变2代群体,导致工作量大、随机性强,且大量突变基因被遗弃的问题,提出一种水稻空间诱变后代种植及收获方法。本发明将经过空间诱变后的全部干种子浸种催芽后播种,利用密植控制分蘖,成熟期只收获稻穗特定部位种子形成诱变2代群体,提高诱变后代处理效率。与目前诱变后代处理技术相比,本发明减少了工作量、在一定程度上避免了部分突变基因型的遗弃,提高了诱变育种选择效率。

    一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记

    公开(公告)号:CN103333887A

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201310238711.8

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明为一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记开发,属生物技术领域。本发明针对传统的水稻Pita基因凝胶电泳的检测方法,提出一种利用DNA熔解温度分析水稻Pita基因的功能标记。本发明根据水稻等位基因Pita与pita在编码区第918氨基酸的G/T变异(Pita为G,pita为T),设计功能标记Pita-G/T。利用该标记进行两轮PCR扩增,第一轮PCR以基因组DNA为模板,利用Pita-G/T-out引物扩增;第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板,利用Pita-G/T-in引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度,通过熔解温度高低区分Pita和pita序列差异,从而判别水稻材料的稻瘟病抗性。

    一种稻米糊化温度调控基因的分子标记和应用

    公开(公告)号:CN104789558A

    公开(公告)日:2015-07-22

    申请号:CN201510126950.3

    申请日:2015-03-23

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体公开了一种稻米糊化温度调控基因的分子标记和应用;所述分子标记由一对外引物SSIIa-O-F、SSIIa-O-R和一对内引物SSIIa-F-GC、SSIIa-R-TT组成,引物序列如SEQ ID NO:1~4所示;该标记扩增片段适中、特异性强;利用该标记仅仅通过简单的PCR,可对稻米糊化温度调控基因SSIIa进行基因分型,区分具有不同糊化温度的水稻品种,利用该标记可提高检测SSIIa基因型的效率,实现对水稻稻米糊化温度的分子标记辅助选择,提高育种效率,满足大规模分子育种的需求。

    一种利用DNA熔解温度分析水稻稻瘟病抗性基因的功能标记

    公开(公告)号:CN103333886A

    公开(公告)日:2013-10-02

    申请号:CN201310238656.2

    申请日:2013-06-17

    Abstract: 本发明为一种利用DNA熔解温度分析水稻稻瘟病抗性基因的功能标记开发,属生物技术领域。本发明针对传统的水稻Pik基因测序的检测方法,提出一种利用DNA熔解温度分析水稻Pik基因的功能标记。本发明根据水稻等位基因Pik与pik在编码区第2173碱基的C/T变异(Pita为T,pita为C),设计功能标记Pik-C/T。利用该标记进行两轮PCR扩增,第一轮PCR以基因组DNA为模板,利用Pik-C/T-out引物扩增;第二轮PCR以稀释的第一轮PCR扩增产物为模板,利用Pik-C/T-in引物扩增。利用仪器检测第二轮PCR扩增产物DNA熔解温度,通过熔解温度高低区分Pik和pik序列差异,从而判别水稻材料的稻瘟病抗性。

    鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记

    公开(公告)号:CN105154531A

    公开(公告)日:2015-12-16

    申请号:CN201510449502.7

    申请日:2015-07-28

    CPC classification number: C12Q1/6895 C12Q2600/13

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体涉及一种鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记。所述的鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记,与野生型位点检测相关的标记Cas-tgw6-1的核苷酸序列SEQ ID No.1所示。用于鉴定上述水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记的引物为:上游引物TGW6-F:5′-CAACCAAACCAAAGCCTGC-3′;下游引物TGW6-R:5′-CAACTCGCATCAATCCCATG-3′;所述的鉴别水稻千粒重基因TGW6野生型和突变体的分子标记或引物可以应用于水稻种质资源鉴定或育种辅助选育中。

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