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公开(公告)号：CN110283835B
公开(公告)日：2022-10-14
申请号：CN201910551575.5
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑T1142A‑C4334A及构建方法，所述的突变基因ISA‑T1142A‑C4334A以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组第1142位核苷酸由T突变为A，从而使病毒VP0蛋白的第164位氨基酸由亲本株的酪氨酸突变为天冬酰胺；第4334位核苷酸由C突变为A，从而使病毒2C蛋白的第71位氨基酸由亲本株的亮氨酸突变为异亮氨酸。3型鸭甲肝病毒突变基因ISA‑T1142A‑C4334A突变株是一株理想的疫苗候选株；还可用于3型鸭甲肝病毒致弱分子机理等基础研究中，应用前景广阔。
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公开(公告)号：CN112521461B
公开(公告)日：2022-07-01
申请号：CN202011495681.5
申请日：2020-12-17
申请人： 杭州贤至生物科技有限公司
IPC分类号： C07K14/10 , C12N15/41 , C12N15/85 , C12N5/10 , G01N33/569
摘要： 本发明涉及生物技术领域，公开了一种甲型肝炎病毒重组蛋白的制备及其快速检测方法。本发明挑选了甲型肝炎病毒抗原两段优势表位，通过一段柔性片段(四个甘氨酸)作为连接短肽序列，将两段优势表位经重复串联后，组成一个重组蛋白。并采用CHO细胞偏爱密码子将该重组抗原氨基酸序列转换为对应的核苷酸序列，化学合成该核苷酸序列并构建重组表达载体，从而提高该重组抗原在CHO细胞中的表达量。另外，采用并基于该重组蛋白建立了高特异性和高灵敏度的胶体金诊断平台。
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公开(公告)号：CN107602674A
公开(公告)日：2018-01-19
申请号：CN201710646912.X
申请日：2017-08-01
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明涉及一种可溶性I型鸭肝炎病毒3C蛋白的制备方法及其应用，具体制备方法如下：将SEQ ID NO.3所示第3～574位核苷酸连接于pET-32(a)+载体的多克隆酶切位点处，然后以大肠杆菌BL21为宿主菌，在Amp抗性的LB培养基中活化后，在IPTG终浓度为0.2～1.4mmol/L、温度为16～37℃条件下诱导表达2～12小时，表达获得可溶性I型鸭肝炎病毒3C蛋白，本发明的方法蛋白为可溶性表达，获得的蛋白是天然的，不需要使用变性剂进行变性、复性获得有活性的蛋白，可用于3C蛋白酶活性检测，还可以用于3C蛋白酶抑制剂筛选，对I型鸭肝炎病毒的抗病毒药物研发和筛选具有重要意义。
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公开(公告)号：CN105330728A
公开(公告)日：2016-02-17
申请号：CN201510738101.3
申请日：2015-11-02
申请人： 四川农业大学
IPC分类号： C07K14/10 , C12N15/41 , C12N15/70 , G01N33/569 , A61K39/125 , A61P31/14
CPC分类号： C07K14/005 , A61K39/00 , C12N2770/32422 , C12N2770/32434 , G01N33/56983 , G01N2469/20
摘要： 本发明公开了一种鸭肝炎病毒多聚蛋白抗原密集区域DHAV-MAg基因重组蛋白及其制备方法和用途，属于生物医药领域。一种DHAV-MAg基因重组蛋白的制备方法，包括如下步骤：a)DHAV-MAg的DNA片段克隆及表达载体的构建；b)DHAV-MAg基因重组蛋白的表达；c)DHAV-MAg基因重组蛋白的纯化；本发明还以DHAV-MAg基因重组蛋白为抗原免疫动物成功获得了多克隆抗体。对DHAV-MAg基因重组蛋白及多克隆抗体在检测及免疫保护中的作用进行初步研究，为鸭病毒性肝炎的检测和防治提供一种新的途径。
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公开(公告)号：CN104357462A
公开(公告)日：2015-02-18
申请号：CN201410649817.1
申请日：2014-11-14
申请人： 山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心
摘要： 本发明公开了一种鸭甲肝病毒VP1蛋白抗原域的重组蛋白的制备方法及其应用，制备方法包括下列步骤：（1）鸭甲肝病毒VP1蛋白抗原域的特异性引物设计与合成；（2）RT-PCR扩增和重组表达质粒的构建；（3）重组质粒的诱导表达及表达产物的鉴定；（4）表达产物的纯化和Westernblot活性检测。本发明制备的重组蛋白具备良好的抗原性，可以用于检测鸭甲肝病毒，也可以用来制备鸭甲肝病毒抗体上的应用。
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公开(公告)号：CN101353374A
公开(公告)日：2009-01-28
申请号：CN200810141799.0
申请日：2008-09-08
申请人： 深圳市菲鹏生物股份有限公司
IPC分类号： C07K14/10 , C12N15/51 , C12N15/70 , C12N1/21 , A61K39/125 , G01N33/53 , A61P31/14 , C12R1/19
CPC分类号： Y02A50/54
摘要： 本发明涉及一种重组甲型肝炎病毒抗原，此抗原采用甲型肝炎病毒基因，利用基因工程重组技术，在大肠杆菌系统中表达出甲型肝炎病毒蛋白，表达的蛋白自组装形成甲型肝炎病毒的五聚体或空衣壳抗原，五聚体或空衣壳抗原可以作为甲型肝炎病毒疫苗之用，具有生产周期短、产量高、成本低的优点。本发明的甲型肝炎病毒重组抗原，还可以用于甲型肝炎病毒抗体的检测。
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公开(公告)号：CN100374552C
公开(公告)日：2008-03-12
申请号：CN02827636.1
申请日：2002-12-10
申请人： 巴克斯特健康护理股份有限公司
CPC分类号： C12N7/00 , A61K39/12 , A61K39/29 , A61K2039/5252 , C12N2770/32434 , C12N2770/32451 , Y02A50/464
摘要： 本发明提供在与微载体结合的VERO细胞中大规模生产甲型肝炎病毒(HAV)的方法。本发明也提供从HAV感染的VERO细胞的细胞培养物的上清液中分离HAV的方法。
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公开(公告)号：CN110295197B
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN201910603170.1
申请日：2019-07-05
IPC分类号： C12N15/866 , C07K14/10 , A61K39/12 , A61P31/14
摘要： 本发明提供了一种重组表达载体、制备得到的III型鸭甲型肝炎病毒样颗粒、制备方法及应用，包含III型鸭甲型肝炎病毒结构蛋白前体基因P1和蛋白水解酶基因3C；所述结构蛋白前体基因P1的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述蛋白水解酶基因3C的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。经过密码子优化的基因在昆虫细胞中表达水平明显提高，可获得具有较好空间构型的蛋白，在胞内自发组装成病毒样颗粒(VLPs)，够获得高纯度、形态均一、性状稳定的病毒颗粒。
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公开(公告)号：CN111454337A
公开(公告)日：2020-07-28
申请号：CN202010142423.2
申请日：2020-03-04
申请人： 山东农业大学
摘要： 本发明公开了一种1型和3型鸭甲肝病毒共有的中和性模拟抗原表位及其应用，属于基因工程表位疫苗技术领域。本发明对1型和3型鸭甲肝病毒的抗原表位进行了深入研究，得到了一组1型和3型鸭甲肝病毒共有的中和性模拟抗原表位。利用本发明的中和性模拟抗原表位可以制备对1型和3型鸭甲肝病毒进行预防和治疗的疫苗。实验发现，以本发明的中和性模拟抗原表位为基础制备的表位疫苗免疫雏鸭后，可提供80％以上的保护率，有效保护雏鸭免受1型鸭甲肝病毒和3型鸭甲肝病毒感染。该表位疫苗减少了普通疫苗的毒副作用，提高了安全性，增强了免疫针对性，也有助于更好地认识鸭甲肝病毒在进入机体后感染和免疫的机制。
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公开(公告)号：CN110283835A
公开(公告)日：2019-09-27
申请号：CN201910551575.5
申请日：2019-06-24
申请人： 四川农业大学
摘要： 本发明公开了一种3型鸭甲肝病毒突变基因ISA-T1142A-C4334A及构建方法，所述的突变基因ISA-T1142A-C4334A以3型鸭甲肝病毒强毒株基因组第1142位核苷酸由T突变为A，从而使病毒VP0蛋白的第164位氨基酸由亲本株的酪氨酸突变为天冬酰胺；第4334位核苷酸由C突变为A，从而使病毒2C蛋白的第71位氨基酸由亲本株的亮氨酸突变为异亮氨酸。3型鸭甲肝病毒突变基因ISA-T1142A-C4334A突变株是一株理想的疫苗候选株；还可用于3型鸭甲肝病毒致弱分子机理等基础研究中，应用前景广阔。
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