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公开(公告)号:CN104127870B
公开(公告)日:2017-01-04
申请号:CN201410397235.9
申请日:2014-08-13
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了一种鸭甲型肝炎病毒冻干制剂,其制备方法是将含有鸭甲型肝炎病毒的材料与冻干稀释液混合后,无菌匀浆,冷冻干燥,即得;其中,含有鸭甲型肝炎病毒的材料为经尿囊腔接种鸭甲型肝炎病毒24小时后死亡的8-10日龄鸡胚吸取尿囊液后的整个胚体或因鸭甲型肝炎病毒致死鸭的肝脏组织;冻干稀释液为磷酸盐缓冲液或生理盐水;该方法操作简单、成本低廉,不需要添加冻干保护剂,制得的鸭甲型肝炎病毒冻干制剂可以在10℃~-80℃保存,病毒效价无明显变化,保存条件要求低,保存时间长。
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公开(公告)号:CN105256074A
公开(公告)日:2016-01-20
申请号:CN201510796329.8
申请日:2015-11-17
申请人: 四川农业大学
CPC分类号: C12Q1/6851 , C12Q2531/113 , C12Q2537/143 , C12Q2545/113 , C12Q2561/101
摘要: 本发明公开了一种双重TaqMan荧光定量RT-PCR检测鸭甲肝病毒的试剂盒及方法,所述试剂盒中应用的引物对和探针包括检测1型鸭甲肝病毒VP0基因和3型鸭甲肝病毒VP3基因的引物对和探针。对样品RNA进行RT-PCR扩增后通过FQ-PCR仪自带软件自动分析读取结果,判断样品是否含1型和3型鸭甲肝病毒:若出现Ct
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公开(公告)号:CN104931493A
公开(公告)日:2015-09-23
申请号:CN201510333169.3
申请日:2015-06-16
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明公开了一种鸭疫里默氏杆菌OmpH截段重组蛋白的试剂盒及其应用,属于生物工程领域。本发明所述ELISA试剂盒由固相支持物、抗体捕获剂、酶标二抗、底物、封闭液组成,所述抗体捕获剂为OmpH截段重组蛋白,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示;检测方法包括:固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色、检测并判定几步骤;本试剂盒特异性、敏感性及稳定性好;本检测方法操作简单。
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公开(公告)号:CN103554233A
公开(公告)日:2014-02-05
申请号:CN201310557397.X
申请日:2013-11-11
申请人: 四川农业大学
IPC分类号: C07K14/03 , C12N15/38 , C12N15/70 , C12N1/21 , C07K16/08 , G01N33/569 , G01N33/68 , C12R1/19
CPC分类号: C07K14/005 , C07K16/085 , C12N2710/16022 , G01N33/56994 , G01N2333/03 , G01N2469/20
摘要: 本发明公开了氨基酸序列如SEQ ID No.1所示的鸭瘟病毒(DPV)UL13截段重组蛋白、其编码基因、重组表达载体、工程菌以及利用工程菌制备该截段重组蛋白的方法,操作简便、成本低,适于工业化大规模生产,能够实现产品的标准化,利于不同实验室之间的结果比较;所得截段重组蛋白具有免疫反应活性,能够与DPV抗体特异性结合,可以作为检测DPV抗体的检测抗原,检测准确度高、特异性强、无交叉反应、无散毒危险;本发明还以DPV UL13截段重组蛋白为抗原免疫动物成功获得了多克隆抗体,该多克隆抗体可以作为检测DPV的检测抗体,具有检测特异性强、无交叉反应等优点。
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公开(公告)号:CN102360013B
公开(公告)日:2014-01-01
申请号:CN201110105302.1
申请日:2011-04-26
申请人: 四川农业大学
摘要: 本发明涉及动物医学领域,特别涉及用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒,所述ELISA试剂盒由固相支持物、抗体捕获剂、酶标二抗、底物、封闭液组成,所述抗体捕获剂为重组鸭瘟病毒UL16蛋白,其核苷酸序列如SEQIDNO:3所示;所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法具体步骤为:固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色及检测和判定;本试剂盒特异性和敏感性高,该方法对批内或批间重复试验显示变异系数均小于10%,能检出经1:5120倍稀释的DPV弱毒疫苗免疫鸭的阳性血清。
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公开(公告)号:CN102360008B
公开(公告)日:2013-09-25
申请号:CN201110177133.2
申请日:2011-06-28
申请人: 四川农业大学实验动物工程技术中心
IPC分类号: G01N33/535 , G01N33/569 , C07K14/03
摘要: 本发明涉及生物工程领域,特别涉及检测鸭瘟病毒抗体的试剂盒及检测方法,所述ELISA试剂盒由固相支持物、抗体捕获剂、酶标二抗、底物、封闭液组成,所述抗体捕获剂为鸭瘟病毒gG截段重组蛋白,其氨基酸序列如SEQIDNO:1所示;检测方法包括:固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色、检测并判定几步骤;本试剂盒特异性、敏感性及稳定性好;本检测方法操作简单。
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公开(公告)号:CN102004150B
公开(公告)日:2013-09-25
申请号:CN201010299560.3
申请日:2010-09-30
申请人: 四川农业大学实验动物工程技术中心
IPC分类号: G01N33/569 , C12N15/38 , C12N15/70 , C07K14/03
摘要: 本发明涉及动物医学领域,特别涉及用于检测鸭瘟病毒抗体的方法,具体包括固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色及检测并判定等步骤,本方法是基于纯化的重组UL51蛋白建立的间接ELISA法,其特异性好,对鸭病毒性肝炎病毒(DHV)、鸭疫里默氏菌(RA)、鸭大肠杆菌(E.coli)的阳性血清进行检测,结果均为阴性;该方法的批内或批间重复试验显示变异系数均小于10%,能检出经1∶3200倍稀释的DPV疫苗免疫鸭阳性血清。
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公开(公告)号:CN102250224B
公开(公告)日:2013-06-05
申请号:CN201110177128.1
申请日:2011-06-28
申请人: 四川农业大学实验动物工程技术中心
摘要: 本发明涉及生物工程领域,特别涉及鸭瘟病毒gG截段重组蛋白及其制备方法,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示;然后利用基因工程技术,将其核苷酸序列进行克隆的基础上,将其与原核表达载体pET-32a(+)连接,成功转化大肠杆菌BL21(DE3)表达系统进行诱导、表达的基因工程产品;该蛋白的表达形式是gGM/His融合蛋白,表达的融合蛋白分子量为50kDa,将产品设计为融合表达一是考虑便于纯化,二是能增加表达蛋白的免疫原性;经原核表达系统表达后的产品经Westernblot进行鉴定后表面具有与天然蛋白相似的免疫反应活性。
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公开(公告)号:CN101967458B
公开(公告)日:2011-12-14
申请号:CN201010502308.8
申请日:2010-10-11
申请人: 四川农业大学实验动物工程技术中心
摘要: 本发明公开了一种生产鸭疫里氏杆菌疫苗用菌液的方法,包括一级种子的繁殖与鉴定、二级种子的繁殖、发酵;所述的一级种子的繁殖与鉴定为:将冻干基础菌种接入含10%犊牛血清的营养肉汤,37℃培养24小时;然后划线接种在含10%犊牛血清营养琼脂平板上,在含5~10%CO2或者烛缸的环境中,经37℃、24~48小时培养后选典型菌落接种含10%犊牛血清营养琼脂斜面若干支,置37℃、5-10%CO2或者烛缸环境下培养24小时,作为一级种子;所述的二级种子繁殖为:取一级种子接种于含10%犊牛血清的营养肉汤,置37℃培养24小时,取样作纯粹检验合格后,置2~8℃保存,使用期不得超过5日;所述的发酵,发酵所用的培养基为:含1%裂解全血的N-J合成培养基;发酵的菌种接种量为:按培养基量的2%接种二级种子液;发酵方式为:培养罐液体发酵培养;培养条件为:37℃连续培养24小时。
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公开(公告)号:CN102183658A
公开(公告)日:2011-09-14
申请号:CN201110047062.4
申请日:2011-02-28
申请人: 四川农业大学实验动物工程技术中心
IPC分类号: G01N33/68 , G01N33/531
摘要: 本发明涉及动物医学领域,特别涉及用于检测鸭瘟病毒抗体的方法,具体包括固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色及检测并判定等步骤,本方法是基于纯化的重组UL55蛋白建立的间接ELISA法,其特异性好,对鸭病毒性肝炎病毒(DHV)、鸭疫里默氏菌(RA)、鸭大肠杆菌(E.coli)、鸭源沙门氏菌(Salmonella)、鸭肿头性出血症病毒和鸭源流感病毒的阳性血清进行检测,结果均为阴性;该方法的对酶标板内或板间重复试验显示变异系数均小于10%,能检出经1∶6400倍稀释的DPV弱毒疫苗免疫鸭的阳性血清。
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