本发明涉及动物医学领域，特别涉及用于检测鸭瘟病毒抗体的ELISA试剂盒，所述ELISA试剂盒由固相支持物、抗体捕获剂、酶标二抗、底物、封闭液组成，所述抗体捕获剂为重组鸭瘟病毒UL16蛋白，其核苷酸序列如SEQIDNO：3所示；所述的ELISA试剂盒检测鸭瘟病毒抗体的方法具体步骤为：固相抗原的制备、一抗结合、二抗结合、显色及检测和判定；本试剂盒特异性和敏感性高，该方法对批内或批间重复试验显示变异系数均小于10%，能检出经1:5120倍稀释的DPV弱毒疫苗免疫鸭的阳性血清。