一种改进的诱导牛肌内脂肪细胞成脂分化的方法

    公开(公告)号:CN109679898A

    公开(公告)日:2019-04-26

    申请号:CN201811547560.3

    申请日:2018-12-18

    IPC分类号: C12N5/077

    CPC分类号: C12N5/0653 C12N2501/33

    摘要: 本发明涉及一种改进的诱导牛肌内脂肪细胞成脂分化的方法,该方法将牛肌内脂肪细胞培养于含有10%胎牛血清的DMEM/F12培养基中,在牛肌内脂肪细胞汇合达到100%的2天后,加入诱导分化剂处理2天,所述的诱导分化剂的组成为:3-异丁基-1-甲基黄嘌呤:0.5mM,地塞米松:1μM,胰岛素:10μg/ml,Rosiglitazone:2μmol/L。采用该方法可以明显提高其成脂分化能力,缩短诱导试验所需时间,为今后开展脂肪细胞诱导分化试验提供了了新的方法。

    一种细胞培养用血清替代物

    公开(公告)号:CN107988138A

    公开(公告)日:2018-05-04

    申请号:CN201711322582.5

    申请日:2017-12-12

    发明人: 刘才明

    IPC分类号: C12N5/00

    摘要: 本发明公开了一种细胞培养用血清替代物,包括如下原料:二氯化锰、亚硒酸钠、钼酸铵、柠檬酸铁、酒石酸胆碱、维生素D2、微生素K2、维生素K3、腺嘌呤、盐酸鸟嘌呤、尿嘧啶、亚油酸、胆固醇、胰岛素、氢化可的松、地塞米松、酵母水解物、乳蛋白水解物、酪蛋白水解物、麦芽蛋白胨。本发明的血清替代物,添加到常用的基础培养基里就能培养细胞,可以完全代理血清使用;不含有IgG,大大简化了单抗生产抗体纯化工艺;细胞培养明显延长而细胞不凋零;有利于蛋白和抗体的生产;可成本大幅度降低,可以降低生产成本。

    一种小鼠滑膜细胞的分离及培养方法

    公开(公告)号:CN107475179A

    公开(公告)日:2017-12-15

    申请号:CN201610415862.X

    申请日:2016-06-07

    IPC分类号: C12N5/071

    摘要: 本发明提供了一种小鼠细胞的分离及培养方法,包括以下步骤:(1)组织处理器械消毒;(2)选取1~2月的雄性BALB/c小鼠,断颈处死,用手术剪分离关节囊的滑膜层和纤维层,然后取出滑膜层组织,将组织放入预冷无菌含双抗的PBS液中洗涤数次除去血渍和脂肪组织;(3)剪碎组织,并用预热的II型胶原酶和胰蛋白酶分别消化;(4)终止消化,离心,弃上清;(5)人工贴壁法接种到包被后的培养瓶;(6)孵育1~2h后,置于37℃、5%CO2环境中培养;(7)细胞形态学观察;(8)细胞传代培养;(9)细胞鉴定。本发明提供的种小鼠滑膜细胞的分离及培养方法,操作简单,所得细胞数量多,成活率高,是一种理想的小鼠滑膜细胞原代分离与培养方法,为实验提供可靠的细胞资源。

    一种CHO细胞无血清培养基

    公开(公告)号:CN107460160A

    公开(公告)日:2017-12-12

    申请号:CN201710727130.9

    申请日:2017-08-23

    IPC分类号: C12N5/071 C12N9/48

    摘要: 本发明公开一种CHO细胞无血清培养基,包含基础培养基和添加物,所述基础培养基为CHO-S-SFM Ⅱ;所述添加物为谷氨酰胺、蛋氨酸、脯氨酸、色氨酸以及胰岛素中的任意一种或者其全部混合物,所述添加物按培养基的总体积计,用量分别是谷氨酰胺1mg/ml,蛋氨酸1mg/ml,脯氨酸1mg/ml,色氨酸1mg/ml,胰岛素10mg/L。本发明通过筛选CHO细胞无血清培养基所需要的主要营养成分及添加物,获得一种支持重组CHO细胞高密度培养和高效表达t-PA的无血清培养基,从而解决t-PA表达量较低,成本大的问题。