地加瑞克的制备方法
    2.
    发明公开

    公开(公告)号:CN107344960A

    公开(公告)日:2017-11-14

    申请号:CN201710518754.X

    申请日:2017-06-29

    CPC classification number: C07K7/23

    Abstract: 本发明提供了一种地加瑞克的制备方法。该方法包括:采用固相合成法,将包括Fmoc-4Nph-OH的原料依次按地加瑞克的氨基酸顺序进行第一缩合反应,得到第一中间产物;将第一中间产物中的氨基酸残基4Nph还原为4Aph,得到第二中间产物;使4Aph的侧链氨基与L-4,5-二氢乳清酸进行第二缩合反应,得到第三中间产物;及采用裂解剂对第三中间产物进行裂解,得到地加瑞克。原料Fmoc-4Nph-OH在碱性环境下较为稳定,因而采用上述原料不需要引入保护基团,这有效地避免了因保护基团的引入而产生副反应,从而能够提高地加瑞克产品的纯度。上述反应操作简单、反应速率快,有利于大幅降低工艺成本和合成难度。

    一种纯化分离西曲瑞克的方法

    公开(公告)号:CN107312073A

    公开(公告)日:2017-11-03

    申请号:CN201710468205.6

    申请日:2017-06-20

    CPC classification number: C07K7/23

    Abstract: 本发明公开一种纯化分离西曲瑞克的方法,包括如下步骤:将西曲瑞克粗品溶解于乙腈水溶液中,滤膜过滤,得粗品溶液待用;流动相A为磷酸二氢钠水溶液,流动相B为乙腈;用流动相A平衡反相色谱柱后,将粗品溶液载入到反相色谱柱中,采用梯度洗脱分离纯化;将纯度达99.5%以上目的肽溶液于水温不超过38℃下进行减压旋蒸浓缩;用醋酸水溶液平衡反相色谱柱后,将浓缩液上样至反相色谱柱中,用醋酸水溶液/乙腈体系进行转盐;转好醋酸盐且纯度99.5%以上目的肽溶液于水温不超过38℃下进行减压旋蒸浓缩,冷冻干燥,得到粉末状西曲瑞克。获得的西曲瑞克不仅纯度高,而且收率好,达到工业化生成的要求,具有良好的经济价值和广泛的应用前景。

    醋酸亮丙瑞林粗产品的纯化方法

    公开(公告)号:CN107163106A

    公开(公告)日:2017-09-15

    申请号:CN201710517360.2

    申请日:2017-06-29

    CPC classification number: C07K7/23

    Abstract: 本发明提供了一种醋酸亮丙瑞林粗产品的纯化方法。该纯化方法包括:第一洗脱,采用反相色谱柱对醋酸亮丙瑞林粗产品进行第一洗脱步骤,得到第一洗脱产物;第一洗脱步骤的洗脱条件包括:第一流动相为三氟乙酸水溶液,第二流动相为三氟乙酸乙腈溶液;及将第一洗脱产物依次经过转盐、脱盐过程,得到醋酸亮丙瑞林产品。选用三氟乙酸作为流动相不仅能够提高产品的纯度,还有利于减少色谱峰型拖尾,改善峰型。然后通过转盐和脱盐过程得到醋酸亮丙瑞林产品。在此基础上,本申请提供的纯化方法不引入新的反离子,且具有产品纯度高、品质可控、成本低及操作简便等优点。

    一种高效表达小鼠促性腺激素抑制激素基因的慢病毒载体及其应用

    公开(公告)号:CN107058391A

    公开(公告)日:2017-08-18

    申请号:CN201710311940.6

    申请日:2017-05-05

    CPC classification number: C12N15/86 C07K7/23 C12N2740/15043

    Abstract: 一种高效表达小鼠促性腺激素抑制激素(简称GnIH)基因的慢病毒载体,该慢病毒表达载体是将GnIH序列插入pLVX‑IRES‑ZsGreen1质粒中构成。本发明构建了含有GnIH基因的慢病毒过表达质粒,并对其进行了体外细胞水平的实验,结果表明GnIH慢病毒过表达质粒转入细胞后能高效地促进GnIH基因表达,GnIH mRNA的表达提高1200倍以上。GnIH过表达后能够显著抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖和降低雌激素分泌水平,并对颗粒细胞凋亡具有明显的促进作用。因而,本发明所构建的慢病毒表达载体可用于制备促进小鼠促性腺激素抑制激素表达的制剂。

    一种固相和液相结合合成亮丙瑞林的方法

    公开(公告)号:CN105622727A

    公开(公告)日:2016-06-01

    申请号:CN201610189423.1

    申请日:2016-03-30

    Inventor: 徐红岩 冯庆贺

    CPC classification number: C07K7/23

    Abstract: 本发明涉及亮丙瑞林的合成,尤其是涉及与一种固相和液相结合合成亮丙瑞林的方法。主要解决现有亮丙瑞林合成中存在色氨酸丝氨酸片段会有二级构像变化,影响分子活性导致HPLC色谱纯化产品收率较低的技术问题。本发明合成由以下步骤组成:1)由Fmoc-Pro-OH与取代度为0.4~0.6mmol的2-氯三苯甲基氯树脂反应生成Fmoc-Pro-树脂;2)依次偶联氨基酸形成固相多肽;3)切割,得到全保护多肽序列;4)全保护多肽与乙胺液相缩合,多肽羧基端封闭;脱侧链保护得到亮丙瑞林粗肽;5)采用高效逆流色谱萃取,之后冻干得亮丙瑞林纯肽。

    一种诱导母鸡定时排卵的方法

    公开(公告)号:CN104839085A

    公开(公告)日:2015-08-19

    申请号:CN201510239338.7

    申请日:2015-05-12

    CPC classification number: A01K67/02 C07K7/23

    Abstract: 本发明公开了一种诱导母鸡定时排卵的方法,属于生物技术领域。本发明所述方法的具体操作步骤如下:母鸡单笼饲养,自由采食饮水,给予16L:8D的光照制度;选择在当天进入光亮时4-5小时产蛋的母鸡;在选择的母鸡进入黑暗两小时的时候进行肌肉注射1/4×25μgLHRHA3;在注射后515±6.97854min母鸡进行排卵,实现诱导母鸡定时排卵。本发明使母鸡发生定时排卵;排卵后的母鸡可用于卵子移植;母鸡的排卵不再受时间限制;可以为禽类甚至是鸟类的辅助生殖技术提供技术支持和借鉴,加快转基因禽类和鸟类的发展。

    一种布舍瑞林的制备方法

    公开(公告)号:CN103936849A

    公开(公告)日:2014-07-23

    申请号:CN201410185283.1

    申请日:2014-05-05

    CPC classification number: C07K7/23

    Abstract: 本发明涉及一种布舍瑞林的制备方法,该方法包括采用固相合成法制备Fmoc-Pro-CTC树脂;使用偶联剂偶联保护氨基酸;布舍瑞林-CTC树脂裂解;乙胺化、氢化、脱保护与纯化等步骤。与现有技术的纯液相合成工艺相比,本发明合成方法操作简便、中间体不用纯化,后处理容易,总收率达到31%。本发明中常压催化氢化反应脱保护中用甲酸铵替代氢气,在常温条件下反应,操作简便安全;此外,本发明使用三氟乙酸作为切肽试剂,避免使用剧毒的氢氟酸,所用原料钯碳可以回收再利用,这些都有利于减小环境污染。本发明工艺具有成本低、操作简便,反应条件温和,环境污染小,易于实现产业化生产等优点。

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