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公开(公告)号：CN114657251B
公开(公告)日：2024-03-08
申请号：CN202210418007.X
申请日：2022-04-20
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院 , 北京肝病研究所
IPC分类号： C12Q1/6886 , C12N15/113 , C12N15/10
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公开(公告)号：CN103320525B
公开(公告)日：2017-12-26
申请号：CN201310157376.9
申请日：2013-05-01
申请人： 北京市肝病研究所 , 首都医科大学附属北京佑安医院
摘要： 本发明公开了一种HBV表型耐药检测试剂盒，该试剂盒包括可以置换HBV1.0片段的重组入门载体pcDNA6.2‑HBV1.1‑sapI载体，其碱基序列如SEQ ID No.4所示，和带有分泌性碱性磷酸酶的双表达载体pcDNA5AP‑attR载体，其碱基序列如SEQ ID No.6所示。本发明提供的耐药检测试剂盒主要包括一套基于GatewayTM重组的表达载体系统，该重组系统避免了限制性内切酶位点对克隆地限制，可以快速、正确地将目的片段引入表达载体，并且可利用培养基上清进行化学发光定量检测，不仅灵敏度高而且可以根据标准碱性磷酸酶的对照进行定量和校准，操作简便，稳定。
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公开(公告)号：CN102181528A
公开(公告)日：2011-09-14
申请号：CN201110064338.X
申请日：2011-03-17
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12Q1/68
摘要： 一种实时定量PCR体外检测单碱基损伤修复试剂盒，所述试剂盒的组成如下：10X检测缓冲液、5X低盐细胞裂解液、2X细胞核蛋白或线粒体蛋白提取液、20X检测底物、2XqPCR损伤修复缓冲液，所述修复缓冲液包括taq酶、dNTP、探针和引物。本发明由于扩增内参和损伤碱基qPCR模板的引物相同，因此可由内参的量算出损伤碱基修复的量。由于互补模板仅有14个碱基与引物2互补，因此在qPCR过程中不能与引物2产生退火，保证了损伤修复检测的特异性。互补模板的3′末端为双脱氧寡核苷酸，防止了自身的延伸。检测损伤模板的探针和检测内参模板的探针标有不同的荧光基团，因此可在同一个qPCR体系中检测来实现损伤模板修复的绝对定量。
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公开(公告)号：CN102071213A
公开(公告)日：2011-05-25
申请号：CN201010107709.3
申请日：2010-02-03
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12N15/79
摘要： 本发明公开了一种分泌型碱性磷酸酶示踪TA克隆真核表达载体，其是在真核表达启动子(CMV)下游和BGH多聚腺嘌呤转录终止子的上游插入碱性磷酸酶示踪TA克隆位点。本发明所述载体可利用培养基上清进行检测；可利用化学发光仪器进行检测，不仅灵敏度高而且可以根据标准碱性磷酸酶的对照进行定量；发明人把目的基因插入位点改造成TA克隆载体位点，因此可以把PCR产物直接插入到报告基因载体，既节省了时间又节省了科研成本。
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公开(公告)号：CN112147058B
公开(公告)日：2023-04-07
申请号：CN201910559220.0
申请日：2019-06-26
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
摘要： 本发明对现有外泌体提取方法进行了改进，公开了一种从血浆中提取外泌体的方法，该外泌体提取方法操作简单、效率高、得到的外泌体得率高，纯度高，最重要的是可以保持外泌体完整的结构和生物功能。外泌体提取后，本发明选择识别效果最佳的肝细胞标志性蛋白ALB和外泌体标志性蛋白CD63搭配进行提取物标记，然后利用外泌体的Amnis量化成像分析流式细胞仪，利用最佳的检测参数可以对通过流动室中的每个细胞进行成像，实现了对细胞图像进行多参数量化分析，获得全新的细胞形态统计学数据，精确而灵敏地识别出了血浆中肝细胞来源的外泌体。本发明得到的肝细胞来源的外泌体表达谱可作为肝再生评估的的工具，具有巨大的发展潜力。
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公开(公告)号：CN114959107A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202110200314.6
申请日：2021-02-23
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12N15/113 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了基于RAA‑CRISPR‑Cas13a技术检测乙型肝炎病毒DNA的试剂盒。本发明提供了用于检测乙型肝炎病毒DNA的成套引物组，由RAA引物对和crRNA组成；所述RAA引物对根据SEQ ID No.1所示核苷酸序列设计；所述crRNA包括锚定序列和向导序列，所述锚定序列能够与Cas蛋白结合，所述向导序列与所述RAA引物对的扩增产物序列相匹配。本发明采用RAA技术与CRISPR‑Cas13a技术结合方法，通过设计、构建、筛选，最终提供一段用于HBV DNA检测的RAA引物序列及靶向该序列的特异性crRNA，本发明方法简便、快速、具有极高的灵敏度和特异性。灵敏度达到10拷贝/μL。
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公开(公告)号：CN116987185B
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202310595986.0
申请日：2023-05-25
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C07K16/18 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种检测角蛋白18的检测抗体6B4，由保藏号为CCTCCNO：C202344的杂交瘤细胞株6B4产生。本发明利用合成的M30抗原短肽成功制备得到了针对CK18片段检测用的检测抗体和捕获抗体。本发明所提供的角蛋白18单克隆抗体特异性强、灵敏度高，亲和力强。在上述基础上，本发明进一步得到了检测特异性好，结合能力强的配对检测抗体及捕获抗体。本发明使用超敏检测技术和单克隆抗体的结合实现了对慢性肝病肝损伤的检测和预测本发明改进了检测试
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公开(公告)号：CN113493855B
公开(公告)日：2023-12-26
申请号：CN202010195047.3
申请日：2020-03-19
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
摘要： 本发明公开了一种基于RAA‑CRISPR‑cas13a检测HBV cccDNA的试剂盒。本发明提供了一种核酸分子组合物，由引物F1、引物R1和特异crRNA组成；引物F1为序列表的序列1所示的单链DNA分子；引物R1为序列表的序列2所示的单链DNA分子；特异crRNA为序列表的序列3所示的单链RNA分子。本发明将跨缺口引物、RAA扩增和基于CRISPR‑Cas13a系统的可视化检测结合在一起用于HBV cccDNA检测，扩增速度快、稳定性高、特异性强、灵敏度高、通量高、成本低，能实现对乙肝的早期检测和药物疗效的有效监测，为乙肝的个体化治疗奠定坚实的基础。
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公开(公告)号：CN116987185A
公开(公告)日：2023-11-03
申请号：CN202310595986.0
申请日：2023-05-25
申请人： 首都医科大学附属北京佑安医院
IPC分类号： C07K16/18 , C12N5/20 , G01N33/577 , G01N33/68
摘要： 本发明公开了一种检测角蛋白18的检测抗体6B4，由保藏号为CCTCCNO：C202344的杂交瘤细胞株6B4产生。本发明利用合成的M30抗原短肽成功制备得到了针对CK18片段检测用的检测抗体和捕获抗体。本发明所提供的角蛋白18单克隆抗体特异性强、灵敏度高，亲和力强。在上述基础上，本发明进一步得到了检测特异性好，结合能力强的配对检测抗体及捕获抗体。本发明使用超敏检测技术和单克隆抗体的结合实现了对慢性肝病肝损伤的检测和预测本发明改进了检测试剂盒的稀释液配方，改进后的稀释液可以有效增强检测特异性。
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