公开(公告)号：CN105732820A

公开(公告)日：2016-07-06

申请号：CN201610153001.9

申请日：2016-03-17

申请人： 通化东宝药业股份有限公司

发明人： 冷春生 ,  李一奎 ,  魏宏壮 ,  常晓慧

IPC分类号： C07K19/00 ,  C07K1/14 ,  C07K1/113

CPC分类号： C07K14/62 ,  C07K2319/00

摘要： 本发明涉及一种重组人胰岛素原融合蛋白的复性方法，属于蛋白纯化领域，包括以下步骤：1)破碎表达重组人胰岛素原融合蛋白的大肠杆菌菌体，收集包涵体；2)洗涤包涵体，然后使包涵体溶解、融合蛋白变性；3)蛋白复性步骤；本方法不需预先的蛋白纯化步骤，直接进行蛋白复性，最后收获高浓度的具有天然结构的重组胰岛素原融合蛋白，克服现有技术中，蛋白复性后蛋白浓度低，易发生蛋白聚集沉淀的缺陷，复性率提高至80％?90％，提高生产效率，适于工业化生产。

公开(公告)号：CN105732820B

公开(公告)日：2017-08-25

申请号：CN201610153001.9

申请日：2016-03-17

申请人： 通化东宝药业股份有限公司

发明人： 冷春生 ,  李一奎 ,  魏宏壮 ,  常晓慧

IPC分类号： C07K19/00 ,  C07K1/14 ,  C07K1/113

摘要： 本发明涉及一种重组人胰岛素原融合蛋白的复性方法，属于蛋白纯化领域，包括以下步骤：1)破碎表达重组人胰岛素原融合蛋白的大肠杆菌菌体，收集包涵体；2)洗涤包涵体，然后使包涵体溶解、融合蛋白变性；3)蛋白复性步骤；本方法不需预先的蛋白纯化步骤，直接进行蛋白复性，最后收获高浓度的具有天然结构的重组胰岛素原融合蛋白，克服现有技术中，蛋白复性后蛋白浓度低，易发生蛋白聚集沉淀的缺陷，复性率提高至80％‑90％，提高生产效率，适于工业化生产。