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公开(公告)号：CN115572733A
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202210157130.0
申请日：2022-02-21
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种利用诱导型致死基因快速鉴定烟草单倍体的方法，包括：1）构建诱导型启动子启动致死基因的表达载体；2）利用表达载体转化烟草单倍体诱导系，得到致死基因单拷贝插入的纯合转基因单倍体诱导系；3）以致死基因单拷贝插入的纯合转基因单倍体诱导系作为父本，待诱导四倍体栽培烟草为母本，杂交收获F1代种子；4）将F1代种子在培养液中进行播种，待长出幼苗后加入化学诱导剂启动致死基因的表达，调查幼苗死亡情况，其中，未死亡的植株即为待诱导系植株的单倍体。相比于植株形态和种子形态鉴定方法，准确性更高；相比于染色体数目鉴定、解剖学鉴定和放射性鉴定方法，操作简单，成本低，可用于大规模单倍体筛选和鉴定工作。
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公开(公告)号：CN115572732A
公开(公告)日：2023-01-06
申请号：CN202210088198.8
申请日：2022-01-25
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种培育栽培烟草单倍体诱导系的方法，包括：用基因编辑系统编辑目的栽培烟草，获得NtDMP1基因、NtDMP2基因和NtDMP3基因同时编辑失活的纯合株系即为栽培烟草单倍体诱导系；所述NtDMP1基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述NtDMP2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，所述NtDMP3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明通过培育烟草单倍体诱导系可以短时间内获得纯系烟草，加快烟草新品种选育进程，有效解决目前栽培烟草常规育中存在的育种周期长，且工作量巨大的问题。
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公开(公告)号：CN107338323B
公开(公告)日：2020-09-29
申请号：CN201710802860.0
申请日：2017-09-08
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与烤烟品种TT7白粉病抗性紧密连锁的分子标记及其在辅助选择育种中的用途，属于农业生物技术范畴。以抗白粉病烟草TT7和感病烟草K326杂交构建F1、F2及BC群体，利用连锁定位在定位区段内开发分子标记S1、R1和S2、R2，与白粉病抗病表型共分离。使用这4对标记对后代进行PCR扩增，不同引物能扩增出相应大小的特异片段并可有效区分杂合基因型，属共显性分子标记，可追踪烟草TT7中的抗白粉病基因在后代中的遗传情况，明确后代的基因型，并可用于白粉病抗病后代筛选。
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公开(公告)号：CN110129479A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910455579.3
申请日：2019-05-29
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测烟草eIF4E-1基因单碱基插入突变的Bi-PASA标记引物及方法，所述引物序列如下：外引物P的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，外引物Q的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，内引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，内引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，上述引物序列中带下划线的碱基为引入的错配碱基，小写字母碱基为非互补富含G+C序列。采用本发明的四个引物，结合一次PCR和电泳，便可以准确地检测出eIF4E-1单碱基插入突变等位基因回交转育过程中回交和自交后代的基因型，提高分子标记辅助轮回选择效率，加快育种进程。
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公开(公告)号：CN116590424A
公开(公告)日：2023-08-15
申请号：CN202310243586.3
申请日：2023-03-14
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速检测人干扰素活性的方法，其特征在于：包含以下步骤：(1)植物源人干扰素的获得；(2)细胞培养及加药处理；(3)RNA提取；(4)RNA反转录cDNA；(5)Real‑Time PCR：利用qPCR试剂盒检测基因MX1、ISG15、IFITM3、APOBEC1的表达量变化。本申请中采用MX1、ISG15、IFITM3和APOBEC1基因基本涵盖了I型干扰素和II型干扰素相应刺激的代表性基因，用他们的表达情况基本可以反应干扰素的活性问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN115568416B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202210157127.9
申请日：2022-02-21
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种利用烟草白粉病抗性筛选烟草单倍体及评估诱导率的方法，包括：1）以携带烟草单倍体诱导基因的植株A作为父本，以携带烟草白粉病抗性基因的植株B作为母本，杂交收获F1代种子；2）在F1代种子播种后进行白粉病接种鉴定，感白粉病的植株即为四倍体烟草，抗白粉病的植株即为单倍体烟草；3）分别统计感白粉病和抗白粉病的植株数量，抗白粉病的植株数量占感白粉病和抗白粉病的植株总数的百分比，即为单倍体诱导系的诱导率。本发明方法中白粉病抗性由双隐性基因控制，相比于植株形态和种子形态鉴定方法，准确性更高；相比于染色体数目鉴定、解剖学鉴定和放射性鉴定方法，操作简单，成本低，可用于大规模单倍体筛选和诱导率评估。
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公开(公告)号：CN108251550B
公开(公告)日：2021-11-16
申请号：CN201711320346.X
申请日：2017-12-12
Applicant: 贵州省烟草科学研究院 , 浙江大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种HRM检测烟草镉转运基因NtHMA4突变的方法，其特征在于：包含以下步骤：(1)采用CTAB法提取烟草样品苗期叶片基因组DNA；(2)以所述基因组DNA为模板，利用引物对进行PCR扩增；(3)PCR扩增产物利用HRM检测仪器LightScanner96进行突变位点扫描；(4)根据HRM曲线结果，判断烟草待检样品的基因型；当待测样品的HRM曲线与野生型对照贵烟1号一致时，则为野生型材料；如果出现其他曲线类型，且HRM荧光曲线峰值ΔF≥0.05，则为疑似基因突变材料；(5)DNA测序验证HRM筛选结果；(6)NtHMA4材料的镉表型测定。
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公开(公告)号：CN109438563B
公开(公告)日：2021-08-31
申请号：CN201811341864.4
申请日：2018-11-12
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
Abstract: 本发明涉及基因工程领域，具体公开了一种烟草KUP7蛋白及其编码基因与应用。本发明首次提供了分离自烟草的KUP7基因，所述KUP7基因核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示，其编码的蛋白KUP7的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，经功能验证，本发明提供的KUP7基因转入钾吸收缺陷型酵母突变株R5421后，表达所述KUP7基因的重组酵母具有钾离子吸收，转运功能。说明本发明提供的KUP7基因具有促进钾离子吸收和转运的功能。
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公开(公告)号：CN113278725A
公开(公告)日：2021-08-20
申请号：CN202110664941.5
申请日：2021-06-16
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于检测烟草eIF4E1基因SNP突变位点的Bi‑PASA标记引物及检测方法，外引物P的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，外引物Q的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，内引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，内引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，上述引物序列中小写字母碱基为引入的错配碱基。采用本发明的四个引物，结合一次PCR和电泳，便可以准确地检测出eIF4E1基因SNP突变位点回交转育过程中回交和自交后代的基因型，提高分子标记辅助轮回选择效率，加快育种进程。
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公开(公告)号：CN107904323B
公开(公告)日：2021-02-09
申请号：CN201711322924.3
申请日：2017-12-12
Applicant: 贵州省烟草科学研究院 , 浙江大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种鉴定烟草低镉突变体杂交后代基因型的引物对，其特征在于：所述引物对的引物1为Seq ID No.1所示序列，引物2为Seq ID No.2所示序列，Seq ID No.1：5’GAAATAGAGGGTGATAGTTTCA 3’；Seq ID No.2：5’CATTTCAGCGTAATGCAGAATTA 3’。利用本发明所述的基因特异性引物结合HRM技术可高通量、快速对NtHMA4突变材料杂交后代的大量分离群体进行筛选，准确区分野生型、纯合突变型及杂合突变型材料，进而鉴定出含烟草NtHMA4突变基因的低镉烟草材料。
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