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公开(公告)号：CN115852022B
公开(公告)日：2024-08-13
申请号：CN202211156238.4
申请日：2021-09-16
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11 , G16B30/20 , G16B30/10 , G16B20/20 , G06Q30/018 , G06K19/06 , G06K17/00
Abstract: 本发明公开了基于全基因组重测序和KASP技术开发的烟草核心SNP标记及其应用。本发明基于150份烟草全基因组重测序数据，利用前期探索的数据分析方法，挖掘获得了超过百万个SNP位点，对这些位点进一步分析，利用KASP技术平台，鉴定筛选出240个SNP标记及配套KASP引物，覆盖了烟草24条染色体/连锁群，并进一步从中确定了48个核心SNP。本发明为烟草生物学研究提供了一套可信、便于后期利用的SNP标记，这套SNP标记和检测引物，可用于烟草SNP检测试剂盒开发、烟草品种DNA指纹图谱构建、烟草种质资源和遗传群体基因分型，烟草定向改良品种背景回复率检测、烟草品种纯度/真伪度检测、烟草分子标记辅助选择育种等。
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公开(公告)号：CN110387383B
公开(公告)日：2022-12-06
申请号：CN201910695031.6
申请日：2019-07-30
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，尤其涉及一种调控NtCBT基因在烟草组织中表达的方法及其应用。本发明从栽培烟草K326基因组DNA中克隆获得NtCBT基因启动子，并在栽培烟草中验证NtCBT基因启动子三种类型的片段缺失后驱动GUS基因的表达模式；根据启动子顺式作用元件分析以及片段缺失实验，聚焦启动子中控制腺毛特异表达的核心区域。本发明研究发现启动子‑198bp～‑192bp片段(CAGTTA)的缺失能够使NtCBT基因由腺毛特异表达变为组成性表达，为解析烟草类西柏烷代谢途径的分子调控机制、腺毛特异启动子精准调控关键酶基因的表达提供新策略，为培育高类西柏烷烟草种质奠定研究基础。
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公开(公告)号：CN115261446A
公开(公告)日：2022-11-01
申请号：CN202210980928.5
申请日：2022-08-16
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C12Q1/6895
Abstract: 本申请公开了抽核缓冲液、缓冲液组合、制备方法和应用，用于抽提烟草幼嫩组织单细胞核测序样本，以便对其进行snRNA‑seq测序。该抽核缓冲液包含：0.5～1.5M DTT，0.3～0.75％Triton×‑100，0.5～1.5tablet/50mL蛋白酶抑制剂，0.3～0.6U/μL RNA酶抑制剂，0.05～0.15mM精胺和0.3～0.7mM亚精胺的PBS溶液，pH值为6.5～7.5。通过本申请的抽核缓冲液、缓冲液组合及采用该缓冲液组合制备而成的烟草单细胞核样品具有背景纯度高、结团率低，保持细胞核形态完整和细胞核RNA质量满足snRNA‑seq测序的优点。
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公开(公告)号：CN113234726B
公开(公告)日：2022-07-22
申请号：CN202110686140.9
申请日：2021-06-21
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/12 , A01H6/82
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，尤其涉及一种烟草腺毛特异性启动子pNtTCP9a及其应用。启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。pNtTCP9a长度为1408bp，能够驱动目的基因在烟草腺毛中特异地表达，从而避免外源基因在烟草其他组织中持续表达带来的不利影响。本发明可用于烟草腺毛高效生产次生代谢产物，或为高香气烟草品种选育提供新的调控序列。
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公开(公告)号：CN111548399B
公开(公告)日：2022-02-08
申请号：CN202010411589.X
申请日：2020-05-15
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明属于生物技术领域，尤其涉及一种调控烟草西柏三烯二醇积累的MYB转录因子、编码基因及应用。本发明通过实时荧光定量PCR技术检测NtMYB306a的表达特性，NtMYB306a在烟草各个组织中均有表达，尤其在烟草腺毛中优势表达。在栽培烟草中过表达NtMYB306a基因，结果发现，烟草类西柏烷代谢途径中的二个关键酶基因CBT、CYP71D16表达量明显增加，NtMYB306a基因过表达株系西柏三烯二醇含量显著高于对照组，这表明NtMYB306a参与烟草类西柏烷代谢的生物合成调控，同时积累西柏三烯二醇。本发明为阐述烟草类西柏烷生物合成的分子调控机制及种质改良提供了理论依据及应用基础。
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公开(公告)号：CN113234726A
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN202110686140.9
申请日：2021-06-21
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/12 , A01H6/82
Abstract: 本发明属于植物基因工程技术领域，尤其涉及一种烟草腺毛特异性启动子pNtTCP9a及其应用。启动子的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。pNtTCP9a长度为1408bp，能够驱动目的基因在烟草腺毛中特异地表达，从而避免外源基因在烟草其他组织中持续表达带来的不利影响。本发明可用于烟草腺毛高效生产次生代谢产物，或为高香气烟草品种选育提供新的调控序列。
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公开(公告)号：CN110129479A
公开(公告)日：2019-08-16
申请号：CN201910455579.3
申请日：2019-05-29
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测烟草eIF4E-1基因单碱基插入突变的Bi-PASA标记引物及方法，所述引物序列如下：外引物P的核苷酸序列如SEQ ID No.1所示，外引物Q的核苷酸序列如SEQ ID No.2所示，内引物A的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示，内引物B的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示，上述引物序列中带下划线的碱基为引入的错配碱基，小写字母碱基为非互补富含G+C序列。采用本发明的四个引物，结合一次PCR和电泳，便可以准确地检测出eIF4E-1单碱基插入突变等位基因回交转育过程中回交和自交后代的基因型，提高分子标记辅助轮回选择效率，加快育种进程。
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公开(公告)号：CN109354612A
公开(公告)日：2019-02-19
申请号：CN201811339759.7
申请日：2018-11-12
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/82
Abstract: 本发明涉及烟草AKT2/3基因及应用。所述烟草AKT2/3基因及其编码蛋白质的序列分别如SEQ ID NO:1和2所示。本发明首次从烟草中克隆得到AKT2/3基因并通过酵母功能互补实验验证了该基因的生物学功能，烟草AKT2/3基因具有促进钾离子吸收和转运的功能。
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公开(公告)号：CN104711286A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201410394649.6
申请日：2014-08-12
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
Abstract: 本发明公开了一种生产低糖高烟碱烟叶的烤烟种质培育方法，包括下列步骤：（1）人工合成烟草钾离子转运体HAK1基因序列；（2）构建CaMV 35S驱动HAK1的植物表达载体pBI-HAK1；（3）转化土壤农杆菌和烟草外植体；（4）转基因株系的分化、移栽。本发明既降低了烤后烟叶的糖含量，同时也增加了烟碱含量，有利于生产低糖高烟碱的烟叶原料。
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公开(公告)号：CN114672489B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202210505270.2
申请日：2022-05-10
Applicant: 贵州省烟草科学研究院
Abstract: 本申请公开了烟草腺毛启动子pNtGGPPS2a及其应用。该启动子具有如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，或与SEQ ID NO.1限定的DNA序列具有90％以上同源性、且具有相同的启动子活性的序列。所述启动子驱动目的基因在烟草叶片腺毛组织特异表达，而不会在叶片非腺毛组织中表达，避免了叶片中大量产生次生代谢物而对植株生长发育造成影响。本申请为利用烟草腺毛高效生产次生代谢物或为高香气烟草品种选育提供新的调控序列。
