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公开(公告)号:CN118515718A
公开(公告)日:2024-08-20
申请号:CN202410689452.9
申请日:2024-05-30
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明涉及D‑手性肌醇技术领域,尤其涉及一种联产葡萄糖醛酸和D‑手性肌醇的工艺方法,包括以下内容:将含有D‑手性肌醇和葡萄糖醛酸的转化液,经过二次过滤,收集的滤液先过阳离子树脂柱,然后再过大孔脱色树脂柱,再将流出液经过二次浓缩,收集的浓缩液加入质量浓度不低于80%的乙醇,加热搅拌,过滤,分别收集滤液和滤饼,收集的滤饼中加入质量浓度不低于95%的乙醇,加热搅拌,过滤,分别收集滤液和滤饼,滤饼经过干燥即为D‑手性肌醇;将两次收集的滤液经过浓缩、干燥,得到葡萄糖醛酸。上述工艺方法,通过加入乙醇加热搅拌溶解,可以将D‑手性肌醇和葡萄糖醛酸进行有效分离,大大提高了分离效率和收率,操作简单方便。
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公开(公告)号:CN118146108A
公开(公告)日:2024-06-07
申请号:CN202410337272.4
申请日:2024-03-23
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
IPC: C07C227/40 , C07C227/42 , C07C229/22
Abstract: 本发明公开了一种利用5‑氨基乙酰丙酸发酵液制备5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐的方法,涉及5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐制备技术领域,5‑氨基乙酰丙酸发酵液经过滤后加入二壬基萘磺酸、磷酸三丁酯与乙酸乙酯的混合溶媒进行萃取,然后加入盐酸溶液进行反萃取,收集的水相纳滤浓缩后进行脱色和真空浓缩,然后养晶后加入乙醇进行降温结晶,最后得到5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐晶体成品。二壬基萘磺酸、磷酸三丁酯与乙酸乙酯的混合溶媒对5‑氨基乙酰丙酸的萃取收率达到96%以上,萃取效率高,产品的收率和质量高。
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公开(公告)号:CN118126921A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202410375427.3
申请日:2024-03-29
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明公开了一种肌醇氧化酶重组大肠杆菌的诱导及制备葡萄糖醛酸的方法,涉及微生物发酵技术领域,肌醇氧化酶重组大肠杆菌先在LB固体培养基上涂布,然后接种于LB液体于培养基,最后在发酵罐内诱导发酵,得到诱导液,诱导液对底物进行转化,可以得到葡萄糖醛酸,通过加入醋酸和三氯乙醛,肌醇的转化率最高可达到98.7%,大大缩短了转化时间。
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公开(公告)号:CN116731948A
公开(公告)日:2023-09-12
申请号:CN202310900124.4
申请日:2023-07-21
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明属于微生物育种技术领域,公开了肌肉肌醇脱氢酶和肌醇单酮异构酶重组菌选育方法,通过利用选择培养基进行定向筛选,选择培养基配方为酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠10g/L、琼脂粉20g/L、肌肉肌醇5g/L、IPTG 0.1mM,其余为去离子水,pH值自然;然后将筛选到的菌株在低温环境下进行高密度发酵培养,发酵温度30℃,培养至菌液OD600值为25~35,得到可稳定遗传的高产量菌株。本发明能够提高肌肉肌醇脱氢酶和肌醇单酮异构酶酶含量,从而提高转化率,提高D‑手性肌醇的产量,减少了生产成本。
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公开(公告)号:CN116590211A
公开(公告)日:2023-08-15
申请号:CN202310783407.5
申请日:2023-06-29
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明属于微生物育种技术领域,公开了一种肌醇氧化酶重组大肠杆菌选育及转化方法,将肌醇氧化酶重组大肠杆菌在配方为酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠10g/L、琼脂粉20g/L、肌醇5g/L、阿拉伯糖0.1g/100mL的选择培养基上37℃恒温培养18小时,然后选择颜色均匀单一、菌落凸起、表面圆润光滑、菌落直径为2~3mm的菌落,接种于平板培养基上37℃恒温培养18小时,再挑相同菌落形态的菌进行保存和LB液体培养,培养至菌液为OD600值为1.7时加入L‑阿拉伯糖,30℃,220rpm振荡培养12小时,然后离心、收集湿菌体进行转化,转化体系中加入0.1%的甲苯。本发明能定向得到稳定表达肌醇氧化酶的重组大肠杆菌菌体,并通过改变转化条件,提高葡萄糖醛酸的转化率。
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公开(公告)号:CN119198954A
公开(公告)日:2024-12-27
申请号:CN202411367770.X
申请日:2024-09-29
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明属于微生物技术领域,公开了利用含肌醇和谷胱甘肽培养基筛选手性肌醇生产菌的方法,分别将含有肌醇脱氢酶的重组大肠杆菌和含有肌醇单酮异构酶的重组大肠杆菌用灭菌水进行梯度稀释,接种到组份为酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠10g/L、琼脂粉20g/L、肌醇2g/L、谷胱甘肽1g/L,其余为去离子水的选择培养基上培养,并挑选颜色均匀单一、菌落凸起的菌落经过摇瓶和发酵培养后,将得到的菌以含有肌醇脱氢酶的重组大肠杆菌和含有肌醇单酮异构酶的重组大肠杆菌重量比1:2混合后,重悬,加入底物转化,然后检测转化率,从中筛选高转化率菌株。本发明方法简单,能高效率的筛选出高手性肌醇转化率的重组大肠杆菌,得到菌株转化率高、稳定性强。
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公开(公告)号:CN118685470A
公开(公告)日:2024-09-24
申请号:CN202411001849.0
申请日:2024-07-25
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明属于微生物发酵技术领域,公开了一种吡咯喹啉醌促进甘氨酸转化为5‑氨基乙酰丙酸的方法,该方法是在利用含5‑氨基乙酰丙酸合成酶的谷氨酸棒状杆菌发酵生产5‑氨基乙酰丙酸时,在发酵初期先添加百分之一发酵液体积的0.1mol/L的PQQ溶液,然后在加入诱导剂和甘氨酸后的零小时、18小时、36小时和54小时分别加入不同量的PQQ溶液进行发酵生产。本发明有效提高了甘氨酸转化为5‑ALA的转化率,可以将5‑ALA的产量最高可提高10%以上,同时缩短了发酵周期,降低了生产成本,具有显著的经济效益和技术进步。
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公开(公告)号:CN118221540A
公开(公告)日:2024-06-21
申请号:CN202410326963.4
申请日:2024-03-21
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
IPC: C07C227/40 , C07C227/42 , C07C229/22
Abstract: 本发明公开了一种5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐的提取及结晶方法,涉及5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐晶体制备技术领域,5‑氨基乙酰丙酸发酵液经过滤、脱色、浓缩后加入晶种养晶,然后采用梯度降温并分阶段添加乙醇,大大降低了爆晶现象发生的可能性,得到结晶体均匀,纯度高,易过滤,后续处理简单,得到5‑氨基乙酰丙酸盐酸盐晶体液相色谱检测含量>99%,90%以上的晶体粒径在20‑30目,产品质量好。
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公开(公告)号:CN119120597A
公开(公告)日:2024-12-13
申请号:CN202411524992.8
申请日:2024-10-30
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明属于微生物技术领域,公开了一种利用α‑酮戊二酸优化菌体并发酵生产肌醇的方法,将含有肌醇单磷酸酶的菌体用无菌水进行梯度稀释,然后接种到含有α‑酮戊二酸的选择培养基上培养,挑选均匀单一、菌落凸起、菌落直径为2~3mm的菌落转移到平板培养基上,再经过摇瓶和发酵培养,发酵培养液中含有α‑酮戊二酸,并通过添加阿拉伯糖和碳酸钠来调控发酵条件,最后使用HPLC检测肌醇含量来进行筛选。本发明方法简单,筛选高产菌株的效率高,得到的菌株稳定性强,发酵生产的肌醇产量高。
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公开(公告)号:CN118813739A
公开(公告)日:2024-10-22
申请号:CN202411197787.5
申请日:2024-08-29
Applicant: 诸城市浩天药业有限公司
Abstract: 本发明公开了一种尿苷二磷酸的制备方法,涉及尿苷二磷酸生产技术领域,通过在选择培养基中加入1%的尿苷和0.5%的尿苷一磷酸,筛选出能够提高尿苷二磷酸转化率的高质量菌体,菌体发酵培养后进行破碎并与尿苷一磷酸、ATP、Mg2+、poly‑p转化,得到含UDP的转化液,最后依次通过陶瓷膜、超滤膜过滤,再过阳离子树脂柱和氯型阴离子交换树脂进行脱盐和纯化,最后用纳滤膜浓缩和醇沉法得到高纯度的UDP。提高了UDP的转化率,简化了纯化流程,降低了生产成本,为UDP的大规模生产和应用提供了有力支持。
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