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公开(公告)号：CN118497204B
公开(公告)日：2024-12-03
申请号：CN202410946361.9
申请日：2024-07-16
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种质粒CRISPR‑pCas9n及基因编辑的方法与应用。本发明基于由质粒pCas9n和质粒pTarget组成的CRISPR‑pCas9n基因编辑系统，采用定点突变的方法，将所述质粒pCas9中Cas9n的活性位点Asp10或His840突变为Ala。本发明提供的方法用于细菌的单/双或三基因的定向敲除时，均表现出较好的敲除率，远高于传统的同源重组的方法和CRISPR‑Cas9基因编辑系统，且不受目的基因的长度限制。
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公开(公告)号：CN118497204A
公开(公告)日：2024-08-16
申请号：CN202410946361.9
申请日：2024-07-16
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种质粒CRISPR‑pCas9n及基因编辑的方法与应用。本发明基于由质粒pCas9n和质粒pTarget组成的CRISPR‑pCas9n基因编辑系统，采用定点突变的方法，将所述质粒pCas9中Cas9n的活性位点Asp10或His840突变为Ala。本发明提供的方法用于细菌的单/双或三基因的定向敲除时，均表现出较好的敲除率，远高于传统的同源重组的方法和CRISPR‑Cas9基因编辑系统，且不受目的基因的长度限制。
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公开(公告)号：CN117362083B
公开(公告)日：2024-03-01
申请号：CN202311670034.7
申请日：2023-12-07
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明属于农业固废资源化利用技术领域，公开了一种农业有机固废好氧堆肥保氮促腐方法。本发明以农作物秸秆和畜禽粪便为原料，添加含有次生矿物的土壤，通过控制发酵条件，获得氮素损失少、腐熟程度高的农用有机肥。所述土壤的加入，具有提升有机肥的离子交换能力、改善微生物生长环境、促进微生物对营养物质的吸收和提高好氧堆肥微生物代谢活性等优点，解决了好氧堆肥过程中腐熟程度不佳和堆肥产品质量差的问题。本发明提供的好氧堆肥工艺，总氮含量提高3.3%~48.05%，N2O释放量减少3.45%~15.73%，腐殖质含量增加14.4%~25.9%，收效显著。
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公开(公告)号：CN117089532A
公开(公告)日：2023-11-21
申请号：CN202311274640.7
申请日：2023-09-28
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种漆酶基因的异源表达及其表达产物。本发明将编码漆酶的基因与载体质粒连接，形成重组载体质粒，将重组载体质粒转染至宿主菌进行异源表达，获得漆酶。编码所述漆酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示，漆酶的氨基酸序列如SEQ ID NO:2所示。本发明所述漆酶的最适反应pH值为1.0，最适反应温度为50℃；对底物2，2‑联氮‑二（3‑乙基‑苯并噻唑‑6‑磺酸）二铵盐的最大反应速率为0.05mM min‑1；Km值为0.36mM。
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公开(公告)号：CN117362083A
公开(公告)日：2024-01-09
申请号：CN202311670034.7
申请日：2023-12-07
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明属于农业固废资源化利用技术领域，公开了一种农业有机固废好氧堆肥保氮促腐方法。本发明以农作物秸秆和畜禽粪便为原料，添加含有次生矿物的土壤，通过控制发酵条件，获得氮素损失少、腐熟程度高的农用有机肥。所述土壤的加入，具有提升有机肥的离子交换能力、改善微生物生长环境、促进微生物对营养物质的吸收和提高好氧堆肥微生物代谢活性等优点，解决了好氧堆肥过程中腐熟程度不佳和堆肥产品质量差的问题。本发明提供的好氧堆肥工艺，总氮含量提高3.3%~48.05%，N2O释放量减少3.45%~15.73%，腐殖质含量增加14.4%~25.9%，收效显著。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN117025651B
公开(公告)日：2023-12-19
申请号：CN202311287810.5
申请日：2023-10-08
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
IPC: C12N15/74 , C12N15/113 , C12N15/53 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种欧文氏菌中漆酶基因敲除的方法。本发明构建了由质粒pCas、带有靶向目的基因的sgRNA和待敲除片段上下游同源臂的重组质粒pTarget组成的CRISPR‑Cas9基因编辑系统，提供了在IPTG的诱导下利用该基因敲除系统构建基因敲除突变菌株的方法，定向敲除QL‑Z3菌株的漆酶ELAC_205基因。本发明提供的由CRISPR‑Cas9基因编辑系统介导的基因敲除方法，其敲除率达到了82.22%，远高于传统的同源重组的方法。
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公开(公告)号：CN117025651A
公开(公告)日：2023-11-10
申请号：CN202311287810.5
申请日：2023-10-08
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
IPC: C12N15/74 , C12N15/113 , C12N15/53 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种欧文氏菌中漆酶基因敲除的方法。本发明构建了由质粒pCas、带有靶向目的基因的sgRNA和待敲除片段上下游同源臂的重组质粒pTarget组成的CRISPR‑Cas9基因编辑系统，提供了在IPTG的诱导下利用该基因敲除系统构建基因敲除突变菌株的方法，定向敲除QL‑Z3菌株的漆酶ELAC_205基因。本发明提供的由CRISPR‑Cas9基因编辑系统介导的基因敲除方法，其敲除率达到了82.22%，远高于传统的同源重组的方法。
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公开(公告)号：CN116555356A
公开(公告)日：2023-08-08
申请号：CN202310384973.9
申请日：2023-04-12
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明提供了一种利用乳酸菌促进厌氧消化产氢烷的方法，所述方法包括：按照一定比例将乳酸菌和水混合，放入摇床，控制摇床温度和转速在一定范围内，直至乳酸菌液的OD600值大于1.0，得到活化乳酸菌液；按照一定比例给消化底物接种活化乳酸菌液，控制消化温度，进行厌氧消化。较传统方法而言，本发明方法不仅可以促进氢气与甲烷生产效率，还极大地降低了成本、提高了有机废物利用率。
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公开(公告)号：CN116254209B
公开(公告)日：2023-07-25
申请号：CN202310542732.2
申请日：2023-05-15
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明公开了一种提高木质素降解菌降解性能的方法，菌株Erwinia sp.QL‑Z3对木质素的降解率从优化前的14.23%优化至25.01%；在培养基初始pH值为8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L的条件下，LiP酶活力可优化至371.00U/L，是优化前的3.53倍；在培养基初始pH值为9.5，氮源为NH4NO3，木质素浓度为2.5g/L，MnP、Lac酶活力分别可优化至839.50U/L、219.00U/L，是优化前的3.18、2.84倍，优化结果显著。
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公开(公告)号：CN116254209A
公开(公告)日：2023-06-13
申请号：CN202310542732.2
申请日：2023-05-15
Applicant: 西北农林科技大学深圳研究院
Abstract: 本发明公开了一种提高木质素降解菌降解性能的方法，菌株Erwinia sp.QL‑Z3对木质素的降解率从优化前的14.23%优化至25.01%；在培养基初始pH值为8，氮源为NH4NO3，木质素的添加量为3g/L的条件下，LiP酶活力可优化至371.00U/L，是优化前的3.53倍；在培养基初始pH值为9.5，氮源为NH4NO3，木质素浓度为2.5g/L，MnP、Lac酶活力分别可优化至839.50U/L、219.00U/L，是优化前的3.18、2.84倍，优化结果显著。
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