-
公开(公告)号：CN118109650A
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202410440586.7
申请日：2024-04-12
Applicant: 西北农林科技大学 , 浙江洪晟生物科技股份有限公司
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种基于RPA‑CRISPR/Cas12a检测猪A型塞内卡病毒的试剂盒及核酸检测模板的制备方法，通过样品预处理将采集自猪的生物检材制成用于SVA核酸检测的模板提取液，随后根据建立的免核酸提取SVA检测体系，通过RPA方法进行扩增，利用Cas12a和crRNA组装的复合物识别并结合RPA扩增的特异产物上的特定位点序列以激活Cas12a的附属切割活性，从而对ssDNA探针进行切割，最后在紫外灯下肉眼观察显色结果判定猪感染SVA的情况。本发明对SVA的检测操作简单，并且具有较高的灵敏度和特异性，为现场筛查提供了快速检测试剂。
-
公开(公告)号：CN112899400B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110177477.7
申请日：2021-02-07
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒双重RPA检测试剂盒，包括由SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.6所示核苷酸序列组成的口蹄疫病毒RPA检测引物组，以及由SEQ.ID.NO.8和SEQ.ID.NO.11所示核苷酸序列组成的水泡性口炎病毒RPA检测引物组。所述试剂盒基于重组酶聚合酶扩增法，以利用RNA反转录形成的cDNA为模板并在优化的反应温度和时间下进行扩增反应，利用核酸凝胶电泳获得检测结果。本发明可用于同时对口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒进行检测，操作简单，并且具有较高的灵敏度和特异性，为病原体的现场筛查提供了快速检测试剂。
-
公开(公告)号：CN112853000B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202110156326.3
申请日：2021-02-04
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒和牛轮状病毒的三重RPA检测试剂盒，包括分别由SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.5、SEQ.ID.NO.8和SEQ.ID.NO.13以及SEQ.ID.NO.15和SEQ.ID.NO.18所示核苷酸序列组成的牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒以及牛轮状病毒的RPA检测引物组。所述试剂盒基于重组酶聚合酶扩增法，以利用RNA反转录形成的cDNA为模板进行扩增反应，利用核酸凝胶电泳获得检测结果。本发明可用于同时对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒和牛轮状病毒进行检测，操作简单，并且具有较高的灵敏度和特异性，为牛腹泻病毒的现场筛查提供了快速检测试剂。
-
公开(公告)号：CN112593013B
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202011602492.3
申请日：2020-12-29
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛副流感病毒和牛呼吸道合胞体病毒双重RPA检测试剂盒，包括由SEQ.ID.NO.2和SEQ.ID.NO.5所示核苷酸序列组成的牛副流感病毒RPA检测引物组，以及由SEQ.ID.NO.8和SEQ.ID.NO.10所示核苷酸序列组成的牛呼吸道合胞体病毒RPA检测引物组。所述试剂盒基于重组酶聚合酶扩增法，以利用RNA反转录形成的cDNA为模板并在优化的反应温度和时间下进行扩增反应，利用核酸凝胶电泳获得检测结果。本发明可用于同时对牛副流感病毒和牛呼吸道合胞体病毒进行检测，操作简单，并且具有较高的灵敏度和特异性，为牛病原体的现场筛查提供了快速检测试剂。
-
公开(公告)号：CN105861746A
公开(公告)日：2016-08-17
申请号：CN201610231624.3
申请日：2016-04-14
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: C12Q1/701 , C12Q1/686 , C12Q2563/137
Abstract: 本发明专利提供了一种从粪便中快速高效地富集病毒，通过特异性DNA标签偶联的金纳米颗粒放大信号，再用PCR快速检测PEDV早期感染的方法。本方法以位于PEDV全基因组中ORF1a基因为靶序列，设计特异性核酸探针，从中筛选和优化出具有高度特异性，富集病毒能力强、易于扩增和检测的2段探针，利用此2段探针分别功能化的磁性微粒和纳米金微粒，建立基于纳米微粒的PEDV特异性的PCR检测技术；同时，本技术方法实现了粪便样品裂解液与功能化磁性微粒直接进行杂交反应的技术突破，完全省略了样品核酸的纯化步骤，不仅提高了特异性和敏感性，同时进一步简化了检测步骤，缩短了检测时间。本发明提供的方法不仅省时、省力、成本低，而且可以准确提示动物病毒感染水平。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104862417A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510254430.0
申请日：2015-05-18
Applicant: 西北农林科技大学
CPC classification number: Y02A50/451 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q2563/137 , C12Q2563/143
Abstract: 本发明公开了一种基于DNA标签-PCR快速检测TGEV早期感染的方法，该方法通过特异性核酸偶联的磁性微粒从血清中快速高效地富集病毒，并在此基础上进一步通过特异性DNA标签偶联的金纳米颗粒将核酸样本信号放大，使核酸样本达到PCR检测所需的核酸模板浓度，具有省时、省力、成本低等特点；此外，本发明的检测方法因不需要经过提取RNA再反转录为cDNA，所以操作简便，成本低，易于产业化和大规模应用。
-
公开(公告)号：CN112853000A
公开(公告)日：2021-05-28
申请号：CN202110156326.3
申请日：2021-02-04
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒和牛轮状病毒的三重RPA检测试剂盒，包括分别由SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.5、SEQ.ID.NO.8和SEQ.ID.NO.13以及SEQ.ID.NO.15和SEQ.ID.NO.18所示核苷酸序列组成的牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒以及牛轮状病毒的RPA检测引物组。所述试剂盒基于重组酶聚合酶扩增法，以利用RNA反转录形成的cDNA为模板进行扩增反应，利用核酸凝胶电泳获得检测结果。本发明可用于同时对牛病毒性腹泻病毒、牛冠状病毒和牛轮状病毒进行检测，操作简单，并且具有较高的灵敏度和特异性，为牛腹泻病毒的现场筛查提供了快速检测试剂。
-
公开(公告)号：CN106399262A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610316381.3
申请日：2016-05-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/86 , C12N2710/10043 , C12N2750/10022 , C12N2830/42 , C12N2830/48 , C12N2830/60
Abstract: 本发明涉及一种优化的猪圆环病毒2型重组腺病毒的构建方法，将人巨细胞病毒第一内含子(Intron A)和土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)克隆到腺病毒穿梭载体中，完成重组腺病毒的构建。本发明的优点体现在：提高Cap表达量，从而降低腺病毒使用剂量和腺病毒自身蛋白免疫反应，提高猪圆环病毒2型重组腺病毒的制备效率。
-
公开(公告)号：CN105838684A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610164590.0
申请日：2016-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N7/02 , C12N15/861 , C12Q1/70
CPC classification number: C12N7/00 , C07K14/005 , C07K14/535 , C07K14/70578 , C12N15/86 , C12N2710/10043 , C12N2710/10051 , C12N2750/10022 , C12Q1/06
Abstract: 本发明涉及一种猪CD40L/GMCSF/PCV2 Cap重组腺病毒的构建、扩增及纯化方法，步骤如下：S1依次将CD40L、GM?CSF和Cap连接到载体pUC57，命名为pUC?CD40L?Cap?GMCSF；S2将CD40L、Cap和GM?CSF连到pShuttle?CMV，转化DH5a，挑菌、摇菌、提质粒，命名为PS?CD40L?Cap?GMCSF；S3将构建好的PS?CD40L?Cap?GMCSF线性化后与骨架质粒pAdEasy?1电转BJ5183，挑菌、摇菌、提质粒，单酶切鉴定；S4鉴定正确后使用试剂盒提取质粒，转染HEK293A细胞，当细胞病变出现时，收细胞，离心后将沉淀重悬于高压灭菌PBS；S5反复冻融后，离心取上清，此病毒即为重组腺病毒；S6将得到的重组腺病毒进行扩增；S7纯化重组腺病毒。本发明首次将猪肿瘤坏死因子相关激活蛋白基因和猪粒细胞?巨噬细胞集落刺激因子基因同时加入到腺病毒载体中提高表达PCV2 Cap重组腺病毒免疫原性。
-
公开(公告)号：CN112899400A
公开(公告)日：2021-06-04
申请号：CN202110177477.7
申请日：2021-02-07
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11 , C12R1/93
Abstract: 本发明公开了一种口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒双重RPA检测试剂盒，包括由SEQ.ID.NO.1和SEQ.ID.NO.6所示核苷酸序列组成的口蹄疫病毒RPA检测引物组，以及由SEQ.ID.NO.8和SEQ.ID.NO.11所示核苷酸序列组成的水泡性口炎病毒RPA检测引物组。所述试剂盒基于重组酶聚合酶扩增法，以利用RNA反转录形成的cDNA为模板并在优化的反应温度和时间下进行扩增反应，利用核酸凝胶电泳获得检测结果。本发明可用于同时对口蹄疫病毒和水泡性口炎病毒进行检测，操作简单，并且具有较高的灵敏度和特异性，为病原体的现场筛查提供了快速检测试剂。
-
-
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
12
records
(took 0.03 seconds)
