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公开(公告)号:CN116570590A
公开(公告)日:2023-08-11
申请号:CN202310557362.X
申请日:2023-05-17
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: A61K31/437 , A61P15/14 , A61P31/04 , A61P37/02
Abstract: 本发明公开了一种HDAC6抑制剂在奶牛乳房炎中的应用。该抑制剂通过靶向抑制HDAC6活性从而显著改善金黄色葡萄球菌诱导的牛乳腺上皮细胞炎性因子大量分泌,以及减轻牛乳腺上皮细胞焦亡。此外,在金黄色葡萄球菌性乳房炎模型中,HDAC6抑制剂也能够减少炎性因子分泌和炎性细胞浸润,减轻乳腺上皮细胞焦亡,从而减轻感染引起的组织炎性损伤。本发明为治疗或预防细菌感染引起的奶牛乳房炎提供了新思路。
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公开(公告)号:CN108373997B
公开(公告)日:2020-10-27
申请号:CN201810129782.7
申请日:2018-02-08
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N5/10 , C12N15/867 , C12N9/22 , C12N7/00
Abstract: 本发明提供一种pMKRN1基因敲除的猪体细胞及其制备方法和应用,采用基因敲除技术,获得突变的PK‑15细胞,利用此突变的PK‑15细胞可快速复制并获得高滴度的PCV2病毒,进而为PCV2致病机制研究和PCV2灭活疫苗和减毒疫苗制备提供高效的病毒扩增细胞。
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公开(公告)号:CN111471799A
公开(公告)日:2020-07-31
申请号:CN202010416762.5
申请日:2020-05-15
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明属于动物病毒检测技术领域,涉及一种针对猪蓝耳病病毒、猪瘟病毒、猪圆环病毒2型、猪伪狂犬病病毒和猪细小病毒的多重超敏纳米荧光检测试剂盒。本发明可同时对上述五种病毒进行筛查与鉴别,灵敏度为20copies/mL,实现了上述五种病原感染早期动物样品的规模化筛查与鉴别。本发明具有高通量、灵敏度高、特异性强、免除病原核酸提取和反转录等优点,可提高感染早期病原的检出率,有效防控这五类疾病的传播,对保障养猪业的健康发展具有重要意义。
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公开(公告)号:CN111454969A
公开(公告)日:2020-07-28
申请号:CN201910825513.9
申请日:2019-09-02
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明提供了一种带有His和Flag双标签的猪细小病毒(PPV)全长感染性克隆的制备方法,包括如下步骤:1)以PPV DNA为模板,分别使用序列如SEQ ID NO.1~2、SEQ ID NO.3~4所示引物扩增,再将所得扩增产物为模板,以序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.4所示引物进行融合PCR扩增,得F3片段;2)将pKQLL-T质粒经Stu I和SnaB I产生平末端切口的限制性内切酶线性化质粒,再将F3片段与其连接,得重组质粒;3)使用限制性内切酶BamH I和Xba I双酶切重组质粒,回收带有His和Flag双标签的PP PPV全长片段;4)将带有His和Flag双标签的PPV全长片段转染动物细胞,即可。本发明的方法能够成功产生高滴度的PPV,可用于抗猪细小病毒药物的筛选,具有良好的应用前景。
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公开(公告)号:CN108148816B
公开(公告)日:2020-06-05
申请号:CN201810049195.7
申请日:2018-01-18
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明提供一种不受泛素化蛋白酶体降解的突变PCV2病毒及其制备方法和应用,对猪圆环病毒2型(PCV2,GenBank No.EU366323)毒株Cap的三个位点(164K、179K、191K)突变,使得突变的PCV2不能被MKRN1介导的泛素化降解,并且可通过感染性克隆进行高速复制,毒价高于野生型的PCV2毒价。通过感染性克隆获得的突变病毒可以更好的研究PCV2的致病机制,并为PCV2暴发提供潜在的控制措施。
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公开(公告)号:CN106399262A
公开(公告)日:2017-02-15
申请号:CN201610316381.3
申请日:2016-05-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/86 , C12N2710/10043 , C12N2750/10022 , C12N2830/42 , C12N2830/48 , C12N2830/60
Abstract: 本发明涉及一种优化的猪圆环病毒2型重组腺病毒的构建方法,将人巨细胞病毒第一内含子(Intron A)和土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)克隆到腺病毒穿梭载体中,完成重组腺病毒的构建。本发明的优点体现在:提高Cap表达量,从而降低腺病毒使用剂量和腺病毒自身蛋白免疫反应,提高猪圆环病毒2型重组腺病毒的制备效率。
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公开(公告)号:CN105838684A
公开(公告)日:2016-08-10
申请号:CN201610164590.0
申请日:2016-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N7/02 , C12N15/861 , C12Q1/70
CPC classification number: C12N7/00 , C07K14/005 , C07K14/535 , C07K14/70578 , C12N15/86 , C12N2710/10043 , C12N2710/10051 , C12N2750/10022 , C12Q1/06
Abstract: 本发明涉及一种猪CD40L/GMCSF/PCV2 Cap重组腺病毒的构建、扩增及纯化方法,步骤如下:S1依次将CD40L、GM?CSF和Cap连接到载体pUC57,命名为pUC?CD40L?Cap?GMCSF;S2将CD40L、Cap和GM?CSF连到pShuttle?CMV,转化DH5a,挑菌、摇菌、提质粒,命名为PS?CD40L?Cap?GMCSF;S3将构建好的PS?CD40L?Cap?GMCSF线性化后与骨架质粒pAdEasy?1电转BJ5183,挑菌、摇菌、提质粒,单酶切鉴定;S4鉴定正确后使用试剂盒提取质粒,转染HEK293A细胞,当细胞病变出现时,收细胞,离心后将沉淀重悬于高压灭菌PBS;S5反复冻融后,离心取上清,此病毒即为重组腺病毒;S6将得到的重组腺病毒进行扩增;S7纯化重组腺病毒。本发明首次将猪肿瘤坏死因子相关激活蛋白基因和猪粒细胞?巨噬细胞集落刺激因子基因同时加入到腺病毒载体中提高表达PCV2 Cap重组腺病毒免疫原性。
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公开(公告)号:CN117025640A
公开(公告)日:2023-11-10
申请号:CN202310375118.1
申请日:2023-04-10
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/35 , C12N15/867 , C12N7/01 , C12N5/10 , C12R1/93
Abstract: 本发明一种稳定表达犬细小病毒衣壳蛋白VP1与VP2的细胞系及其制备方法。本发明通过将表达VP1与VP2蛋白的基因分别与特定的非编码区序列连接,构建的重组载体转染细胞,得到的细胞系能同时稳定高效表达CPV‑2的VP1与VP2,并将VP1与VP2蛋白自组装形成CPV‑2病毒样颗粒(VLP),该病毒样颗粒具有与天然病毒粒子更为一致的病毒空间结构及免疫原性,提高了免疫保护作用,也为研究VP1在病毒生命周期及致病性中发挥的作用提供了有效工具。
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公开(公告)号:CN116463437A
公开(公告)日:2023-07-21
申请号:CN202310350583.X
申请日:2023-04-03
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/682 , C12Q1/6851 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明公开了一种鉴别羊种布鲁氏菌Rev.1疫苗株与感染株16M的纳米荧光检测试剂盒。该试剂盒采用功能化磁珠富集病原核酸和功能化纳米金放大目的核酸信号,并结合Taqman探针法荧光定量PCR技术检测放大信号,实现对布鲁氏菌感染株16M和Rev.1疫苗株进行纳米‑荧光超敏感鉴别诊断,检测限可达到20copies/mL,单个样本的检测可在2h以内完成,且特异性、重复性较好,与血清学检测等方法的符合率达100%,解决了布鲁氏菌病防控过程中感染株16M和Rev.1疫苗株的鉴别诊断的难题,对于保障公共卫生安全、减少养殖业的经济损失意义重大。
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公开(公告)号:CN112574963B
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202011629741.8
申请日:2020-12-30
Applicant: 西北农林科技大学
Abstract: 本发明公开了一种NPM1结合区域突变的PCV2病毒及其制备方法和应用。将野生型PCV2毒株衣壳蛋白的两个位点147R及148H突变,使得突变PCV2通过感染性克隆进行病毒拯救,获得复制能力低于野生型PCV2的突变毒株。本发明的突变的PCV2病毒可以用于研究PCV2复制机制和减毒活疫苗,从而为PCV2的防控提供新思路。
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