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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107446895B
公开(公告)日：2020-05-12
申请号：CN201710607801.8
申请日：2017-07-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供一种分泌型猪圆环病毒2型重组腺病毒及其构建方法。所述重组腺病毒是利用重组腺病毒质粒进行腺病毒包装而得到的，所述重组腺病毒质粒由分泌型猪圆环病毒2型重组腺病毒穿梭载体与腺病毒骨架载体同源重组形成。重组腺病毒穿梭载体插入有目的基因片段，包括Intron A、共表达分泌型CD40L、PCV2Cap和GMCSF，以及WPRE。通过提高蛋白表达量，以及使CD40L、Cap和GMCSF可以共表达并分泌到细胞外，更好更快地被抗原呈递细胞识别。该重组腺病毒结合两种不同作用机制，可增强腺病毒载体疫苗免疫原性。
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公开(公告)号：CN106399262A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201610316381.3
申请日：2016-05-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861
CPC classification number: C07K14/005 , C12N15/86 , C12N2710/10043 , C12N2750/10022 , C12N2830/42 , C12N2830/48 , C12N2830/60
Abstract: 本发明涉及一种优化的猪圆环病毒2型重组腺病毒的构建方法，将人巨细胞病毒第一内含子(Intron A)和土拨鼠肝炎病毒转录后调控元件(WPRE)克隆到腺病毒穿梭载体中，完成重组腺病毒的构建。本发明的优点体现在：提高Cap表达量，从而降低腺病毒使用剂量和腺病毒自身蛋白免疫反应，提高猪圆环病毒2型重组腺病毒的制备效率。
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公开(公告)号：CN105838684A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610164590.0
申请日：2016-03-22
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N7/02 , C12N15/861 , C12Q1/70
CPC classification number: C12N7/00 , C07K14/005 , C07K14/535 , C07K14/70578 , C12N15/86 , C12N2710/10043 , C12N2710/10051 , C12N2750/10022 , C12Q1/06
Abstract: 本发明涉及一种猪CD40L/GMCSF/PCV2 Cap重组腺病毒的构建、扩增及纯化方法，步骤如下：S1依次将CD40L、GM?CSF和Cap连接到载体pUC57，命名为pUC?CD40L?Cap?GMCSF；S2将CD40L、Cap和GM?CSF连到pShuttle?CMV，转化DH5a，挑菌、摇菌、提质粒，命名为PS?CD40L?Cap?GMCSF；S3将构建好的PS?CD40L?Cap?GMCSF线性化后与骨架质粒pAdEasy?1电转BJ5183，挑菌、摇菌、提质粒，单酶切鉴定；S4鉴定正确后使用试剂盒提取质粒，转染HEK293A细胞，当细胞病变出现时，收细胞，离心后将沉淀重悬于高压灭菌PBS；S5反复冻融后，离心取上清，此病毒即为重组腺病毒；S6将得到的重组腺病毒进行扩增；S7纯化重组腺病毒。本发明首次将猪肿瘤坏死因子相关激活蛋白基因和猪粒细胞?巨噬细胞集落刺激因子基因同时加入到腺病毒载体中提高表达PCV2 Cap重组腺病毒免疫原性。
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公开(公告)号：CN107574182A
公开(公告)日：2018-01-12
申请号：CN201710949086.6
申请日：2017-10-12
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N15/861 , C12N15/66 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供一种跨膜型猪圆环病毒2型重组腺病毒及其构建方法。所述重组腺病毒是利用重组腺病毒质粒进行腺病毒包装而得到的，所述重组腺病毒质粒由上述跨膜型猪圆环病毒2型重组腺病毒穿梭载体与腺病毒骨架载体同源重组形成。重组腺病毒穿梭载体插入有目的基因片段包括Intron A、共表达分泌型CD40L、跨膜型PCV2 Cap和分泌型GMC SF以及WPRE。通过提高蛋白表达量，以及使CD40L、Cap和GMCSF可以共表达，CD40L和GMCSF分泌到细胞外，Cap镶嵌到细胞膜上，更好更快地被抗原呈递细胞识别。该重组腺病毒结合两种不同作用机制，可增强腺病毒载体疫苗免疫原性。
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公开(公告)号：CN107446895A
公开(公告)日：2017-12-08
申请号：CN201710607801.8
申请日：2017-07-24
Applicant: 西北农林科技大学
IPC: C12N7/01 , C12N15/861 , A61K39/12 , A61P31/20
Abstract: 本发明提供一种分泌型猪圆环病毒2型重组腺病毒及其构建方法。所述重组腺病毒是利用重组腺病毒质粒进行腺病毒包装而得到的，所述重组腺病毒质粒由分泌型猪圆环病毒2型重组腺病毒穿梭载体与腺病毒骨架载体同源重组形成。重组腺病毒穿梭载体插入有目的基因片段，包括Intron A、共表达分泌型CD40L、PCV2Cap和GMCSF，以及WPRE。通过提高蛋白表达量，以及使CD40L、Cap和GMCSF可以共表达并分泌到细胞外，更好更快地被抗原呈递细胞识别。该重组腺病毒结合两种不同作用机制，可增强腺病毒载体疫苗免疫原性。
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