公开(公告)号：CN1896274B

公开(公告)日：2011-05-25

申请号：CN200510096097.1

申请日：2005-09-29

Applicant: 西北农林科技大学生物工程研究所

Inventor： 张志平 ,  张涌 ,  刘俊平 ,  安志兴 ,  张君涛 ,  张立 ,  权富生 ,  郑月茂 ,  赛务加甫 ,  蔡欣

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种牛胚胎性别简易鉴定方法，其血液基因组鉴定率达100％，胚胎性别鉴定率为99.0％以上，操作简便、灵敏度高、鉴定快速、实用性强、使用设备简单，并可以在1h内鉴定出胚胎性别，形成的胚胎性别鉴定试剂盒完全可以应用于生产，且成本仅为同类产品的1/10。本发明根据牛特异性序列和雄性特异性序列，设计出6条特异性引物，能够识别6个特异位点，反应目的序列形成一个哑铃型结构单元，并以此为核心，短时间内扩增出大量大小不等的DNA片断。反应过程中，仅需要60～65℃恒温水浴即可；结果鉴定采用dNTPs沉淀法(反应管中部出现白色条带为阴性)。

公开(公告)号：CN100494389C

公开(公告)日：2009-06-03

申请号：CN200610042617.5

申请日：2006-04-03

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 刘凤军 ,  张涌 ,  郑月茂 ,  张玉玲 ,  安志兴 ,  赵晓娥

IPC: C12N15/87

Abstract: 本发明公开了一种用于细胞核移植/克隆电融合的针状微电极，该针状微电极包括两个电极，它们均由粗细不同的A、B、C段组成，A段长度为20～30mm，直径为1mm；B段长度为20mm～30mm，直径为0.4mm～1mm；C段长度为5mm～10mm，直径为100μm～180μm；其中一个电极的C段为圆台形前端，另一个电极的C段为圆锥形前端。将上述电极其安装在显微操作仪的两个显微操作针的位置，借助于显微操作仪的操作手柄进行操作，操作简便、精确度高、使用速度快、实用性强。在电融合时，把供体细胞注入卵周隙后的重组体置于两微电极间，以其中一电极拨动重组体使其细胞膜接触面与两电极连线垂直，整个电融合操作时间能够比传统的融合槽法节约20～50倍，成功率提高20%以上。

公开(公告)号：CN1834256A

公开(公告)日：2006-09-20

申请号：CN200610042617.5

申请日：2006-04-03

Applicant: 西北农林科技大学

Inventor： 刘凤军 ,  张涌 ,  郑月茂 ,  张玉玲 ,  安志兴 ,  赵晓娥

IPC: C12N15/87

Abstract: 本发明公开了一种用于细胞核移植/克隆电融合的针状微电极，该针状微电极包括两个电极，它们均由粗细不同的A、B、C段组成，A段长度为20～30mm，直径为1mm；B段长度为20mm～30mm，直径为0.4mm～1mm；C段长度为5mm～10mm，直径为100μm～180μm；其中一个电极的C段为圆台形前端，另一个电极的C段为圆锥形前端。将上述电极其安装在显微操作仪的两个显微操作针的位置，借助于显微操作仪的操作手柄进行操作，操作简便、精确度高、使用速度快、实用性强。在电融合时，把供体细胞注入卵周隙后的重组体置于两微电极间，以其中一电极拨动重组体使其细胞膜接触面与两电极连线垂直，整个电融合操作时间能够比传统的融合槽法节约20～50倍，成功率提高20％以上。

公开(公告)号：CN1896274A

公开(公告)日：2007-01-17

申请号：CN200510096097.1

申请日：2005-09-29

Applicant: 西北农林科技大学生物工程研究所

Inventor： 张志平 ,  张涌 ,  刘俊平 ,  安志兴 ,  张君涛 ,  张立 ,  权富生 ,  郑月茂 ,  赛务加甫 ,  蔡欣

IPC: C12Q1/68

Abstract: 本发明涉及一种牛胚胎性别简易鉴定方法，其血液基因组鉴定率达100％，胚胎性别鉴定率为99.0％以上，操作简便、灵敏度高、鉴定快速、实用性强、使用设备简单，并可以在1h内鉴定出胚胎性别，形成的胚胎性别鉴定试剂盒完全可以应用于生产，且成本仅为同类产品的1/10。本发明根据牛特异性序列和雄性特异性序列，设计出6条特异性引物，能够识别6个特异位点，反应目的序列形成一个哑铃型结构单元，并以此为核心，短时间内扩增出大量大小不等的DNA片断。反应过程中，仅需要60～65℃恒温水浴即可；结果鉴定采用dNTPs沉淀法(反应管中部出现白色条带为阴性)。