公开(公告)号：CN117683853A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202311681283.6

申请日：2023-12-08

Applicant: 苏州贝康医疗器械有限公司

Inventor： 赵丁丁 ,  陈淼 ,  魏相宇 ,  孙婷婷 ,  卢娜如 ,  张军 ,  冒燕 ,  孔令印 ,  梁波

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6883 ,  C12N15/11 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明公开了一种一体化文库构建的方法及其应用。所述方法包括：使用第一核酸内切酶和第二核酸内切酶对基因组DNA进行酶切得到酶切产物，将酶切产物与测序接头连接，得到连接产物，将筛选后的连接产物与多重PCR扩增得到的扩增子库混合，使用引物进行文库PCR反应，即得所述一体化核酸文库；所述第一核酸内切酶包括BfaI；所述第二核酸内切酶包括MboI；所述多重PCR扩增子库由一端含有BfaI酶切位点识别序列，另一端含有MboI酶切位点识别序列的DNA片段组成。本发明方法实现了在均匀覆盖全基因组CNV和SNP的同时，对漏检遗传病区域进行针对性的捕获富集，提供了一种更完善和准确的一体化高通量测序检测方法。

公开(公告)号：CN117683852A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202311681281.7

申请日：2023-12-08

Applicant: 苏州贝康医疗器械有限公司

Inventor： 赵丁丁 ,  陈淼 ,  王婧 ,  杨玥尧 ,  冒燕 ,  孔令印 ,  梁波

IPC: C12Q1/6806 ,  C12Q1/6883 ,  C12N15/11 ,  C40B50/06

Abstract: 本发明公开了一种一体化文库构建的方法及其应用。所述方法包括：将多重PCR扩增得到的扩增子库与基因组DNA混合得到混合产物，使用第一核酸内切酶和第二核酸内切酶对所述混合产物进行酶切得到酶切产物，将酶切产物与测序接头连接，得到连接产物，筛选连接产物，使用引物进行文库PCR反应，即得所述一体化核酸文库；所述多重PCR扩增子库由一端含有BfaI酶切位点识别序列，另一端含有MboI酶切位点识别序列的DNA片段组成；所述第一核酸内切酶包括BfaI；所述第二核酸内切酶包括MboI。本发明方法实现了在均匀覆盖全基因组CNV和SNP的同时，对漏检遗传病区域进行针对性的捕获富集，提供了一种更完善和准确的一体化高通量测序检测方法。