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公开(公告)号：CN109880840A
公开(公告)日：2019-06-14
申请号：CN201910203784.0
申请日：2019-03-18
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种重组蛋白大肠杆菌体内生物素化标记系统及方法，属于生物技术领域。该系统使用一种伴侣质粒，可通过阿拉伯糖诱导表达去除DNA结合区的大肠杆菌生物素连接酶催化结构域，与目的蛋白大肠杆菌表达载体及相应的工程菌株配合，可在获得重组目的蛋白的同时，对表达出的目的蛋白进行特异性、高效的生物素标记。同时，本发明在此系统的基础上，提供了一种可与乳糖操纵子系统的载体配合，适用于高密度自动诱导，可实现大规模重组蛋白的批量生物素化标记方法。本发明将极大提高蛋白质生物素化标记的效率和操作便利性，进而推动其在生物活性分子（DNA/RNA/蛋白质）标记、检测、纯化以及固定化等众多过程的应用。
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公开(公告)号：CN111087454B
公开(公告)日：2021-07-27
申请号：CN202010121694.X
申请日：2020-02-26
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种热休克转录因子1显性负效应突变体dn‑Hsf1及其应用，属于生物技术领域。通过同源比对人类和黄曲霉（Aspergillus flavus）中的热休克转录因子1 HSF1蛋白，将黄曲霉Hsf1蛋白C末端的第576位至第788位共213个氨基酸残基删除，获得黄曲霉中热休克转录因子1显性负效应突变体dn‑Hsf1蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，编码核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。该显性负效应突变体dn‑Hsf1能抑制正常Hsf1在真菌体内发挥功能，从而抑制真菌的生长，应用于防控真菌的污染方面。
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公开(公告)号：CN110607312B
公开(公告)日：2020-10-13
申请号：CN201910898125.3
申请日：2019-09-23
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉致病基因hsp90，并提供了一种黄曲霉致病基因hsp90在制备、筛选抑制黄曲霉致病性潜在药物方法上的应用。更加具体地，该方法包含，在黄曲霉的培养体系中添加待筛选的候选物，并检测黄曲霉体内的hsp90基因的转录水平或Hsp90蛋白的表达水平，并与不添加候选物的对照组进行比较，如果测试组中hsp90基因的转录水平或Hsp90蛋白的表达水平在统计学上低于对照组，就表明该候选物是抑制黄曲霉的致病性的潜在药物。
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公开(公告)号：CN110607312A
公开(公告)日：2019-12-24
申请号：CN201910898125.3
申请日：2019-09-23
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉致病基因hsp90，并提供了一种黄曲霉致病基因hsp90在制备、筛选抑制黄曲霉致病性潜在药物方法上的应用。更加具体地，该方法包含，在黄曲霉的培养体系中添加待筛选的候选物，并检测黄曲霉体内的hsp90基因的转录水平或Hsp90蛋白的表达水平，并与不添加候选物的对照组进行比较，如果测试组中hsp90基因的转录水平或Hsp90蛋白的表达水平在统计学上低于对照组，就表明该候选物是抑制黄曲霉的致病性的潜在药物。
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公开(公告)号：CN109182368A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201811251416.5
申请日：2018-10-25
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的以黄曲霉菌丝为受体的遗传转化方法，属于微生物学领域。该方法包括以下步骤：双元载体pAg1-H3酶切去除潮霉素抗性基因片段，与含有来源于米曲霉的吡啶硫胺抗性基因ptrA的目的片段连接，构建成pAg1-Pt双元载体；双元载体pAg1-Pt质粒转化农杆菌，获得农杆菌阳性转化子，制备菌液；制备黄曲霉菌丝均质液；将制备所得菌液与制备所得的菌丝均质液混合后共培养，进行黄曲霉的遗传转化；选择性培养，筛选黄曲霉转化子并鉴定阳性克隆。本发明以黄曲霉菌丝体作为转化受体，不受黄曲霉菌株产孢能力的限制，转化效率高且稳定，对不同遗传背景和营养缺陷型的黄曲霉菌株均适用。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107389945B
公开(公告)日：2019-02-22
申请号：CN201710647254.6
申请日：2017-08-01
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法，该体系由SUMO化反应溶液体系组成，其中包含了原核表达的黄曲霉SUMO化酶系中的修饰分子AfSumO，SUMO E1活化酶AfAosA‑AfUbaB，SUMO E2结合酶AfUbcI，SUMO E3连接酶以及待检测的蛋白或药物。利用该体系一方面可以快速鉴定/筛选影响黄曲霉SUMO化修饰过程的药物分子或小分子化合物；同时利用该体系在体外方便快速的检测某种蛋白是否能被黄曲霉的SUMO化体系修饰，进而鉴定/筛选潜在的SUMO化靶标蛋白。
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公开(公告)号：CN107389945A
公开(公告)日：2017-11-24
申请号：CN201710647254.6
申请日：2017-08-01
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明涉及基于体外反应体系筛选黄曲霉SUMO化靶蛋白的方法，该体系由SUMO化反应溶液体系组成，其中包含了原核表达的黄曲霉SUMO化酶系中的修饰分子AfSumO，SUMO E1活化酶AfAosA-AfUbaB，SUMO E2结合酶AfUbcI，SUMO E3连接酶以及待检测的蛋白或药物。利用该体系一方面可以快速鉴定/筛选影响黄曲霉SUMO化修饰过程的药物分子或小分子化合物；同时利用该体系在体外方便快速的检测某种蛋白是否能被黄曲霉的SUMO化体系修饰，进而鉴定/筛选潜在的SUMO化靶标蛋白。
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公开(公告)号：CN105907771A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610467379.6
申请日：2016-06-24
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种黄曲霉致病基因AfsumO及在筛选防治黄曲霉污染药物的应用。本发明还公开了一种筛选抑制黄曲霉致病性或筛选防治黄曲霉污染的药物的方法。更加具体地，该方法包含，在黄曲霉的培养体系中添加待筛选的候选物，并用针对AfSumO蛋白或蛋白片段的抗体检测黄曲霉体内的AfSumO蛋白的表达水平和SUMO化修饰水平，并与不添加候选物的对照组进行比较，如果测试组中AfSumO蛋白的表达水平和SUMO化修饰水平在统计学上低于对照组，就表明该候选物是抑制黄曲霉的致病性的潜在药物。
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公开(公告)号：CN109182368B
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN201811251416.5
申请日：2018-10-25
Applicant: 福建农林大学
Abstract: 本发明公开了一种农杆菌介导的以黄曲霉菌丝为受体的遗传转化方法，属于微生物学领域。该方法包括以下步骤：双元载体pAg1‑H3酶切去除潮霉素抗性基因片段，与含有来源于米曲霉的吡啶硫胺抗性基因ptrA的目的片段连接，构建成pAg1‑Pt双元载体；双元载体pAg1‑Pt质粒转化农杆菌，获得农杆菌阳性转化子，制备菌液；制备黄曲霉菌丝均质液；将制备所得菌液与制备所得的菌丝均质液混合后共培养，进行黄曲霉的遗传转化；选择性培养，筛选黄曲霉转化子并鉴定阳性克隆。本发明以黄曲霉菌丝体作为转化受体，不受黄曲霉菌株产孢能力的限制，转化效率高且稳定，对不同遗传背景和营养缺陷型的黄曲霉菌株均适用。
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公开(公告)号：CN110172465B
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN201910420619.0
申请日：2019-05-20
Applicant: 福建农林大学
IPC: C12N15/31 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , G01N33/68 , C12R1/67
Abstract: 本发明提供了一种黄曲霉致病基因wprA的应用，为用于制备、筛选抑制黄曲霉致病性的潜在药物。更加具体地，该方法包含，在黄曲霉的培养体系中添加待筛选的候选物，并检测黄曲霉体内的wprA基因的转录水平或WprA蛋白的表达水平，并与不添加候选物的对照组进行比较，如果测试组中wprA基因的转录水平或WprA蛋白的表达水平在统计学上低于对照组，就表明该候选物是抑制黄曲霉的致病性的潜在药物。
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