公开(公告)号：CN119265318A

公开(公告)日：2025-01-07

申请号：CN202411663702.8

申请日：2024-11-20

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  傅云熙 ,  赖雨 ,  聂红毅 ,  王若虹 ,  周诗文

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6869 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种鉴别西方蜜蜂蜂群王浆高产性状的插入缺失标记NC_037647.1_8674876及其应用。从待测西方蜜蜂蜂群中随机收集成年蜜蜂工蜂个体，提取基因组DNA作为模板，利用NC_037647.1_8674876的引物进行PCR扩增反应，获得PCR反应产物；对获得的PCR反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，将出现目的条带的PCR反应液进行测序；依据测序结果进行NC_037647.1_8674876位点基因分型，所述基因型为纯合插入型II、纯合缺失型DD或杂合型ID，其中I等位基因表现为14bp插入，D等位基因表现为14bp缺失；计算待测西方蜜蜂蜂群NC_037647.1_8674876位点的等位基因频率，确定待测西方蜜蜂蜂群是否为蜂王浆高产蜂群。本发明能够准确、快速、科学地鉴别西方蜜蜂蜂群蜂王浆高产性状，可以大大缩短蜂王浆高产蜜蜂的选育周期，加快其育种速度。

公开(公告)号：CN112410441B

公开(公告)日：2024-07-30

申请号：CN202110041863.3

申请日：2021-01-13

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  黄安 ,  张曌楠 ,  李志国 ,  聂红毅 ,  黄景南

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明涉及一种利用SNP标记KZ288479.1_95621鉴别蜂群抗囊状幼虫病性状的方法，包括中华蜜蜂幼虫个体取样、蜜蜂幼虫样本DNA提取、合成引物、PCR检测和鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状，根据从该蜂群中随机收集的工蜂幼虫个体在SNP标记KZ288479.1_95621出现C基因的频率PC和T基因的频率PT之间是否存在显著差异，鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状。本发明从分子水平，提供了使用中华蜜蜂工蜂幼虫抗囊状幼虫病相关的SNP（KZ288479.1_95621）标记，科学、准确、快速地鉴别中华蜜蜂蜂群抗囊状幼虫病性能，可以大大缩短抗囊状幼虫病中华蜜蜂的选育周期，加快蜜蜂育种速度。

公开(公告)号：CN112430675A

公开(公告)日：2021-03-02

申请号：CN202110041660.4

申请日：2021-01-13

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  黄安 ,  张曌楠 ,  李志国 ,  聂红毅 ,  黄景南

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本发明涉及一种利用SNP标记KZ288474.1_322717鉴别蜂群抗囊状幼虫病性状的方法，包括蜜蜂幼虫个体取样、蜜蜂幼虫样本DNA提取、合成引物、PCR检测和鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状，根据从该蜂群中随机收集的工蜂幼虫个体在SNP标记KZ288474.1_322717出现G基因的频率PG和C基因的频率PC之间是否存在显著差异，鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状。本发明从分子水平，提供了使用中华蜜蜂工蜂幼虫抗囊状幼虫病相关的SNP（KZ288474.1_322717）标记，科学、准确、快速地鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性能，可以大大缩短抗囊状幼虫病中华蜜蜂的选育周期，加快蜜蜂育种速度。

公开(公告)号：CN119287035A

公开(公告)日：2025-01-10

申请号：CN202411664467.6

申请日：2024-11-20

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 聂红毅 ,  傅云熙 ,  赖雨 ,  苏松坤 ,  周诗文 ,  王若虹

IPC: C12Q1/6888 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种鉴别西方蜜蜂蜂群蜂王浆高产性状的SNP标记及其应用。所述SNP标记选自NC_037641.1_10806386、NC_037641.1_10806436。从待测西方蜜蜂蜂群中随机收集成年蜜蜂工蜂个体，提取基因组DNA作为模板进行PCR扩增反应，获得PCR反应产物；对获得的PCR反应产物进行琼脂糖凝胶电泳检测，将出现目的条带的PCR反应液进行测序；对测序结果进行分析，计算待测西方蜜蜂蜂群NC_037641.1_10806386位点或NC_037641.1_10806436位点的基因频率，确定待测西方蜜蜂蜂群是否为蜂王浆高产蜂群。本发明从分子生物学水平提供了与西方蜜蜂蜂王浆高产性状相关的两个SNP标记，且两个SNP标记包含于同一对特异性引物扩增出的目的片段，能够科学、准确、快速地鉴别西方蜜蜂蜂群蜂王浆高产性状，可以大大缩短蜂王浆高产蜜蜂的选育周期，加快其育种速度。

公开(公告)号：CN107937572A

公开(公告)日：2018-04-20

申请号：CN201810043350.4

申请日：2018-01-17

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  许叔鹏 ,  聂红毅 ,  罗婷 ,  张明莲

IPC: C12Q1/6888

CPC classification number: C12Q1/6888 ,  C12Q2600/156

Abstract: 本发明涉及一种意大利蜜蜂抗白垩病相关SNP位点C2587245T的检测方法，包括从要待测意大利蜂群中收集幼虫样本、幼虫DNA的提取、标记引物的合成、以提取的每个个体DNA为模版并用标记引物进行PCR、PCR产物测序、获得CC型纯合DNA标样、合成鉴别引物、用标样和其他待测模板以鉴别引物进行PCR，并通过电泳来快速对未知样本基因型分型，以CC纯合DNA模板的条带为基准，亮度不及基准条带的模板为CT杂合型，无条带的模板即为TT纯合型；方法简单，可以降低检测成本，缩短检测时间，将增强利用SNP标记鉴别蜂群抗白垩病性状的方法的实用性。

公开(公告)号：CN119709750A

公开(公告)日：2025-03-28

申请号：CN202411951303.1

申请日：2024-12-27

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  吕洋 ,  欧阳文瑶 ,  苗刘畅 ,  李志国 ,  聂红毅

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/89 ,  C12N15/60 ,  G01N33/573 ,  C12Q1/6851 ,  C12Q1/6888 ,  C12N15/11 ,  A01K67/0275

Abstract: 本发明涉及miR‑281‑x在调控蜜蜂脑部章鱼胺水平、蜜蜂清理行为中的应用。miR‑281‑x定位于1号染色体，含有22个核苷酸，序列为AAGAGAGCUAUCCAUCGACAGU。miR‑281‑x通过靶向Tdc2基因（LOC410948,tyrosine decarboxylase 2）的3’UTR区域，调节蜜蜂脑部章鱼胺的水平，影响蜜蜂对狄斯瓦螨的清理强度。通过过表达或抑制miR‑281‑x的表达水平，可以影响蜜蜂脑部章鱼胺水平，从而降低或提高蜜蜂蜂群中强清理蜜蜂（MS）的比例，有望应用在蜜蜂抗螨育种中减少狄斯瓦螨寄生率达到动态平衡。

公开(公告)号：CN110763165A

公开(公告)日：2020-02-07

申请号：CN201911027754.5

申请日：2019-10-26

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 聂红毅 ,  高艳 ,  苏松坤 ,  朱雅楠

IPC: G01B11/28 ,  G01N21/84

Abstract: 本发明涉及一种测量蜜蜂咽下腺单个腺泡面积的方法，包括以下步骤：步骤S1：将工蜂头部两侧完整的一对咽下腺，放入PBS缓冲溶液中清洗1~2次；步骤S2：取步骤S1中处理后的咽下腺放入载玻片上，移液器滴入1~2滴考马斯亮蓝染液覆盖咽下腺，染色时间1~2分钟；步骤S3：将步骤S2中染色后的样品放入PBS缓冲液中清洗1~2分钟；步骤S4：将步骤S3中的样品放在干净的载破片上用手术剪刀将咽下腺剪成均匀小段，滴一滴PBS缓冲液充分覆盖样品；步骤S5：获取包括蜜蜂咽下腺单个腺泡的图像；步骤S6：采用像素法计算腺泡面积，用以评估咽下腺分泌蜂王浆的活性。本发明使不具备高精尖设备的普通实验室即可完成腺泡面积的测定，节约成本。

公开(公告)号：CN110157744A

公开(公告)日：2019-08-23

申请号：CN201910510389.7

申请日：2019-06-13

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  聂红毅 ,  耿海洋 ,  张猛

IPC: C12N15/89 ,  C12N15/90 ,  A01K67/033

Abstract: 本发明涉及一种蜜蜂CRISPR-Cas9基因编辑方法，首先将Cas9蛋白与靶基因gRNA混合成终浓度均为500ng/ul的混合溶液。然后对被产下不超过1.5小时的受精卵进行注射，每颗受精卵的注射体积为1.2nl，蜂卵的显微注射在1小时内完成。接着将完成注射的蜂卵置于恒温恒湿培养箱中培养至孵化成小幼虫，蜂卵的培养条件为温度34.5℃，相对湿度为85%。最后对小幼虫进行移虫育王，得到嵌合体蜂王。本发明以蜜蜂眼色基因white为靶基因，得到有明显表型的嵌合体蜂王，另外，注射后对孵化的小幼虫进行测序，结果表明本发明有90.9%的基因编辑效率。从而建立了在意大利蜜蜂领域中敲除靶基因的基因编辑方法。

公开(公告)号：CN112430675B

公开(公告)日：2022-07-15

申请号：CN202110041660.4

申请日：2021-01-13

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  黄安 ,  张曌楠 ,  李志国 ,  聂红毅 ,  黄景南

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6858

Abstract: 本发明涉及一种利用SNP标记KZ288474.1_322717鉴别蜂群抗囊状幼虫病性状的方法，包括蜜蜂幼虫个体取样、蜜蜂幼虫样本DNA提取、合成引物、PCR检测和鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状，根据从该蜂群中随机收集的工蜂幼虫个体在SNP标记KZ288474.1_322717出现G基因的频率PG和C基因的频率PC之间是否存在显著差异，鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状。本发明从分子水平，提供了使用中华蜜蜂工蜂幼虫抗囊状幼虫病相关的SNP（KZ288474.1_322717）标记，科学、准确、快速地鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性能，可以大大缩短抗囊状幼虫病中华蜜蜂的选育周期，加快蜜蜂育种速度。

公开(公告)号：CN112410441A

公开(公告)日：2021-02-26

申请号：CN202110041863.3

申请日：2021-01-13

Applicant: 福建农林大学

Inventor： 苏松坤 ,  黄安 ,  张曌楠 ,  李志国 ,  聂红毅 ,  黄景南

IPC: C12Q1/6888 ,  C12Q1/6869

Abstract: 本发明涉及一种利用SNP标记KZ288479.1_95621鉴别蜂群抗囊状幼虫病性状的方法，包括中华蜜蜂幼虫个体取样、蜜蜂幼虫样本DNA提取、合成引物、PCR检测和鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状，根据从该蜂群中随机收集的工蜂幼虫个体在SNP标记KZ288479.1_95621出现C基因的频率PC和T基因的频率PT之间是否存在显著差异，鉴别中华蜜蜂抗囊状幼虫病性状。本发明从分子水平，提供了使用中华蜜蜂工蜂幼虫抗囊状幼虫病相关的SNP（KZ288479.1_95621）标记，科学、准确、快速地鉴别中华蜜蜂蜂群抗囊状幼虫病性能，可以大大缩短抗囊状幼虫病中华蜜蜂的选育周期，加快蜜蜂育种速度。