一种基于短期禁食与小剂量PloyI:C/D-GalN诱导的小鼠急性肝衰竭模型的建立方法

    公开(公告)号:CN119488380A

    公开(公告)日:2025-02-21

    申请号:CN202411632553.9

    申请日:2024-11-15

    Abstract: 本发明公开了一种基于短期禁食与小剂量PloyI:C/D‑GalN诱导的小鼠急性肝衰竭模型的建立方法,只需要先为5‑6w c57BL/6J小鼠提供24h禁食,随后尾静脉注射PloyI:C药物0.014ug/g小鼠,腹腔注射D‑GalN药物0.56mg/g小鼠,即可成功建立小鼠急性肝衰竭模型。本发明通过短期禁食预处理,模拟了机体在应激状态下的生理调整,使得后续小剂量PloyI:C/D‑GalN诱导的肝损伤更加贴近实际疾病发生发展的生理过程。相对于传统的单一大剂量药物诱导,本方法减少了因药物过量导致的非特性损伤,提高了模型的稳定性和可重复性。且操作简便,成本降低:本方法操作简单,无需特殊设备,且由于减少了药物用量,降低了实验成本。

    用于敲低斑马鱼mRNA的crRNA、基因编辑系统及其制备与应用

    公开(公告)号:CN119464296A

    公开(公告)日:2025-02-18

    申请号:CN202411675838.0

    申请日:2024-11-21

    Inventor: 裴得胜 唐启萍

    Abstract: 本发明属于基因工程技术领域,具体涉及一种用于敲低斑马鱼mRNA的crRNA、基因编辑系统及其制备与应用。该crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.11所示。该基因编辑系统为CRISPR‑hfCas13x编辑系统,包括crRNA和zCas13x mRNA。本发明还提供了一种基于CRISPR‑hfCas13x编辑系统敲低斑马鱼mRNA的方法,包括:将zCas13x目的基因质粒转录成mRNA;设计并合成斑马鱼内源性基因mRNA的crRNA序列;将zCas13x mRNA和crRNA显微共注射到斑马鱼受精卵中,实现斑马鱼mRNA的敲低。该方法具有高特异性、高安全性的特点。

    构建Ddx58-R109C点突变小鼠模型的方法和应用

    公开(公告)号:CN119193696A

    公开(公告)日:2024-12-27

    申请号:CN202411351788.0

    申请日:2024-09-26

    Abstract: 本发明公开了一种利用CRISPR/Cas9基因编辑技术构建Ddx58‑R109C点突变小鼠模型的方法及应用,包括如下步骤:(1)靶点构建:寻找Ddx58基因的CDS区,明确外显子部分,确定基因突变位点;(2)获取受精卵,在体外通过显微注射技术将Cas9mRNA和gRNA以及donor oligo一同注射到C57BL/6J小鼠的受精卵中,获得F0代杂合小鼠;(3)将F0代杂合小鼠与野生型小鼠进行交配,获得F1代小鼠;(4)将经鉴定为阳性的F1代杂合子小鼠进行交配,繁育所得后代即可获得纯合的Ddx58‑R109C突变型和野生型的小鼠;(5)表型分析显示Ddx58‑R109C点突变小鼠可出现系统性红斑狼疮及狼疮肾炎病理改变;本发明可以为研究人员深入探索Ddx58‑R109C突变在疾病中的作用机制提供有效的研究途径和方法,对阐释系统性红斑狼疮的发病机制,研发靶向治疗药物具有重要意义。

    子宫基质细胞特异性基因编辑小鼠的构建方法

    公开(公告)号:CN119120466A

    公开(公告)日:2024-12-13

    申请号:CN202411191475.3

    申请日:2024-08-28

    Inventor: 刘极龙 赵久麒

    Abstract: 本发明属于分子生物学技术,公开了子宫基质特异性基因编辑小鼠的构建方法,本发明基于CRISPR‑Cas9的基质特异性基因编辑鼠。由Vim作为特异性启动子的Cre鼠,激活Cas9,Cas9鼠不仅解决了传统Cre鼠的繁育复杂的问题,在无需纯合的情况下就可实现一种组织特异性敲除。Cas9鼠可以用于多种sgRNA的敲除,为基因编辑模型的开发提供更多的可能性。将得到的Cas9鼠与sgMettl3报告鼠交配,成功在子宫基质细胞内向导敲除Mettl3基因。本发明为子宫内膜基因研究提供了宝贵的基因编辑模型,克服了双特异性位点介导基因敲除难的挑战。

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