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公开(公告)号:CN103724458A
公开(公告)日:2014-04-16
申请号:CN201410019945.8
申请日:2014-01-17
Applicant: 福州大学
IPC: C08B37/10
Abstract: 本发明涉及一种含N-非取代葡萄糖胺(GlcNH3+)肝素六糖的制备及其纯化。所述方法是以酶解低分子量肝素为原料,通过凝胶色谱和离子交换高效液相色谱等方法分离提纯肝素钠六糖;利用阳离子交换树脂和吡啶中和法制备肝素吡啶六糖;最后用脱N-硫酸化法制备含不同GlcNH3+数目的肝素六糖,并用SAX-HPLC等方法进行分离提纯。本方法可特异性制备出含不同GlcNH3+数目和序列的系列肝素寡糖,为硫酸类肝素中GlcNH3+残基的结构与功能及其与疾病关系的研究提供重要的糖库。
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公开(公告)号:CN110628845A
公开(公告)日:2019-12-31
申请号:CN201910995475.1
申请日:2019-10-18
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供一种蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析方法。所述方法为先用微量的胰蛋白酶酶解蛤蟆油,再通过DEAE阴离子交换色谱柱除去蛋白等杂质,并经透析、冻干、浓缩得到蛤蟆油糖胺聚糖(OR-GAG)。糖胺聚糖由重复的二糖单元构成,通过肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解OR-GAG,再利用分子排阻色谱法,得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖(HS/HP二糖)。HS/HP二糖经2-氨基吖啶酮(AMAC)荧光标记后,利用反相色谱柱C18柱进行质谱分析,得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。最后,建立HS/HP区域结构模型。
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公开(公告)号:CN110646548A
公开(公告)日:2020-01-03
申请号:CN201910991789.4
申请日:2019-10-18
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明属于天然产物纯化领域,具体涉及一种提取阿胶中肝素/硫酸类肝素二糖的方法。该提取方法利用一系列步骤,能够从复杂的阿胶混合物中提取和纯化肝素/硫酸类肝素二糖。同时,运用液相色谱-离子阱/飞行时间质谱(LC-MS-ITTOF)能确定阿胶中肝素/硫酸类肝素二糖的质量,分析二糖组分。这对阿胶在糖生物学上的特性研究和功能具有重要的作用。
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公开(公告)号:CN103724458B
公开(公告)日:2016-03-30
申请号:CN201410019945.8
申请日:2014-01-17
Applicant: 福州大学
IPC: C08B37/10
Abstract: 本发明涉及一种含N-非取代葡萄糖胺(GlcNH3+)肝素六糖的制备及其纯化。所述方法是以酶解低分子量肝素为原料,通过凝胶色谱和离子交换高效液相色谱等方法分离提纯肝素钠六糖;利用阳离子交换树脂和吡啶中和法制备肝素吡啶六糖;最后用脱N-硫酸化法制备含不同GlcNH3+数目的肝素六糖,并用SAX-HPLC等方法进行分离提纯。本方法可特异性制备出含不同GlcNH3+数目和序列的系列肝素寡糖,为硫酸类肝素中GlcNH3+残基的结构与功能及其与疾病关系的研究提供重要的糖库。
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公开(公告)号:CN119708290A
公开(公告)日:2025-03-28
申请号:CN202510011529.1
申请日:2025-01-04
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种具有抑制新冠刺突蛋白活性的阿胶硫酸类肝素及其制备方法,该阿胶硫酸类肝素是先将阿胶溶液用链霉菌蛋白酶酶解后,采用DEAE阴离子交换色谱进行分离纯化得到阿胶糖胺聚糖;再利用硫酸软骨素ABC酶对其进行酶解后,利用DEAE阴离子交换色谱进行分离纯化制得,其平均分子量为13.2 Kda,是由己糖醛酸与葡萄糖胺以1‑4糖苷键连接的二糖单元租成,其中己糖醛酸C‑2‑氧位、葡萄糖胺的C‑6‑氧位和N‑位的总硫酸化程度分别为28.2%,44.3%和38.9%。该阿胶硫酸类肝素具有竞争性抑制新冠刺突蛋白与肝素的结合活性,可实现对新冠病毒初期感染的有效预防,并为开发阿胶新的临床用途奠定重要基础。
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公开(公告)号:CN110628845B
公开(公告)日:2021-12-21
申请号:CN201910995475.1
申请日:2019-10-18
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供一种蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析方法。所述方法为先用微量的胰蛋白酶酶解蛤蟆油,再通过DEAE阴离子交换色谱柱除去蛋白等杂质,并经透析、冻干、浓缩得到蛤蟆油糖胺聚糖(OR‑GAG)。糖胺聚糖由重复的二糖单元构成,通过肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解OR‑GAG,再利用分子排阻色谱法,得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖(HS/HP二糖)。HS/HP二糖经2‑氨基吖啶酮(AMAC)荧光标记后,利用反相色谱柱C18柱进行质谱分析,得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。最后,建立HS/HP区域结构模型。
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公开(公告)号:CN110669152A
公开(公告)日:2020-01-10
申请号:CN201910995448.4
申请日:2019-10-18
Applicant: 福州大学
IPC: C08B37/08 , C12P19/26 , C12P21/06 , G01N30/96 , G01N30/72 , G01N30/74 , G01N30/89 , G01N30/06 , G01N30/14 , G01N30/86 , G01N30/02
Abstract: 本发明提供一种从蛤蟆油中提取硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸的方法。所述方法先将蛤蟆油充分溶胀后加入的胰蛋白酶酶解蛤蟆油,再通过DEAE阴离子交换色谱柱提取蛤蟆油中的糖胺聚糖OR-GAG,然后经透析、冻干、浓缩后,用硫酸软骨素ABC酶特异性酶解OR-GAG,足量的酶可将长链酶解至硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸(CS/DS/HA)二糖单元。CS/DS/HA二糖单元经2-氨基吖啶酮荧光标记后,利用LC/MS-ITTOF进行结构分析,得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。
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公开(公告)号:CN110592165B
公开(公告)日:2021-04-27
申请号:CN201910996268.8
申请日:2019-10-18
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明提供燕窝中硫酸乙酰肝素/肝素的提取方法与结构解析,属于天然产物制备纯化领域。该方法先将粉末状燕窝用胰蛋白酶酶解,再通过DEAE阴离子交换色谱柱、透析、冻干等一系列步骤得到燕窝糖胺聚糖。然后样品用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解燕窝糖胺聚糖至硫酸乙酰肝素/肝素二糖,再利用分子排阻色谱法,分离纯化得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖。硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖以离子对试剂为流动相,利用LC/MS‑ITTOF分析二糖组分的结构并得到摩尔百分比,最后建立硫酸乙酰肝素二糖/肝素区域结构模型。
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公开(公告)号:CN111763702A
公开(公告)日:2020-10-13
申请号:CN202010670262.4
申请日:2020-07-13
Applicant: 福州大学
Abstract: 本发明公开了一种制备硫酸乙酰肝素寡糖的方法,包括以下步骤:向搅拌式过滤装置中加入Tris-HCL缓冲液、硫酸乙酰肝素、肝素酶I进行第一超滤反应,收集第一反应滤液;对第一反应滤液进行冷冻干燥,获得第一硫酸乙酰肝素寡糖产品。本发明的一种制备硫酸乙酰肝素寡糖的方法将制备反应与超滤相结合,实现制备反应与超滤同时进行,利用这一动态反应方法可以制备系列不同结构的硫酸乙酰肝素寡糖,使得硫酸乙酰肝素寡糖产品中寡糖的结构种类更丰富,为研究肝素/硫酸乙酰肝素(Hep/HS)结构与功能的关系提供重要的样品糖库;并成功解决了Hep/HS酶解过程中生成的硫酸乙酰肝素寡糖难以分离的难题。
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