含N-非取代葡萄糖胺肝素六糖的制备及其纯化

    公开(公告)号:CN103724458A

    公开(公告)日:2014-04-16

    申请号:CN201410019945.8

    申请日:2014-01-17

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明涉及一种含N-非取代葡萄糖胺(GlcNH3+)肝素六糖的制备及其纯化。所述方法是以酶解低分子量肝素为原料,通过凝胶色谱和离子交换高效液相色谱等方法分离提纯肝素钠六糖;利用阳离子交换树脂和吡啶中和法制备肝素吡啶六糖;最后用脱N-硫酸化法制备含不同GlcNH3+数目的肝素六糖,并用SAX-HPLC等方法进行分离提纯。本方法可特异性制备出含不同GlcNH3+数目和序列的系列肝素寡糖,为硫酸类肝素中GlcNH3+残基的结构与功能及其与疾病关系的研究提供重要的糖库。

    蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析

    公开(公告)号:CN110628845A

    公开(公告)日:2019-12-31

    申请号:CN201910995475.1

    申请日:2019-10-18

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析方法。所述方法为先用微量的胰蛋白酶酶解蛤蟆油,再通过DEAE阴离子交换色谱柱除去蛋白等杂质,并经透析、冻干、浓缩得到蛤蟆油糖胺聚糖(OR-GAG)。糖胺聚糖由重复的二糖单元构成,通过肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解OR-GAG,再利用分子排阻色谱法,得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖(HS/HP二糖)。HS/HP二糖经2-氨基吖啶酮(AMAC)荧光标记后,利用反相色谱柱C18柱进行质谱分析,得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。最后,建立HS/HP区域结构模型。

    一种提取阿胶中硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸的方法

    公开(公告)号:CN110642963A

    公开(公告)日:2020-01-03

    申请号:CN201910995447.X

    申请日:2019-10-18

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明公开了一种提取阿胶中阿胶硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸的方法,该提取方法通过酶解、DEAE离子交换、高效液相色谱分离等一系列步骤,能够将阿胶中硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸提取出来,并利用液相色谱-离子阱/飞行时间质谱(LC-MS-ITTOF)确定阿胶中阿胶硫酸软骨素/硫酸皮肤素/透明质酸二糖组分含量,这对开发阿胶作为保健食品和药品的新功能有重要意义。

    含N-非取代葡萄糖胺肝素六糖的制备及其纯化

    公开(公告)号:CN103724458B

    公开(公告)日:2016-03-30

    申请号:CN201410019945.8

    申请日:2014-01-17

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明涉及一种含N-非取代葡萄糖胺(GlcNH3+)肝素六糖的制备及其纯化。所述方法是以酶解低分子量肝素为原料,通过凝胶色谱和离子交换高效液相色谱等方法分离提纯肝素钠六糖;利用阳离子交换树脂和吡啶中和法制备肝素吡啶六糖;最后用脱N-硫酸化法制备含不同GlcNH3+数目的肝素六糖,并用SAX-HPLC等方法进行分离提纯。本方法可特异性制备出含不同GlcNH3+数目和序列的系列肝素寡糖,为硫酸类肝素中GlcNH3+残基的结构与功能及其与疾病关系的研究提供重要的糖库。

    一种具有抑制新冠刺突蛋白结合活性的阿胶硫酸类肝素及其制备方法

    公开(公告)号:CN119708290A

    公开(公告)日:2025-03-28

    申请号:CN202510011529.1

    申请日:2025-01-04

    Applicant: 福州大学

    Inventor: 魏峥 梁群焘

    Abstract: 本发明公开了一种具有抑制新冠刺突蛋白活性的阿胶硫酸类肝素及其制备方法,该阿胶硫酸类肝素是先将阿胶溶液用链霉菌蛋白酶酶解后,采用DEAE阴离子交换色谱进行分离纯化得到阿胶糖胺聚糖;再利用硫酸软骨素ABC酶对其进行酶解后,利用DEAE阴离子交换色谱进行分离纯化制得,其平均分子量为13.2 Kda,是由己糖醛酸与葡萄糖胺以1‑4糖苷键连接的二糖单元租成,其中己糖醛酸C‑2‑氧位、葡萄糖胺的C‑6‑氧位和N‑位的总硫酸化程度分别为28.2%,44.3%和38.9%。该阿胶硫酸类肝素具有竞争性抑制新冠刺突蛋白与肝素的结合活性,可实现对新冠病毒初期感染的有效预防,并为开发阿胶新的临床用途奠定重要基础。

    蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析

    公开(公告)号:CN110628845B

    公开(公告)日:2021-12-21

    申请号:CN201910995475.1

    申请日:2019-10-18

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供一种蛤蟆油中硫酸乙酰肝素/肝素的提取与结构分析方法。所述方法为先用微量的胰蛋白酶酶解蛤蟆油,再通过DEAE阴离子交换色谱柱除去蛋白等杂质,并经透析、冻干、浓缩得到蛤蟆油糖胺聚糖(OR‑GAG)。糖胺聚糖由重复的二糖单元构成,通过肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解OR‑GAG,再利用分子排阻色谱法,得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖(HS/HP二糖)。HS/HP二糖经2‑氨基吖啶酮(AMAC)荧光标记后,利用反相色谱柱C18柱进行质谱分析,得到蛤蟆油中各二糖组分的结构与摩尔百分比。最后,建立HS/HP区域结构模型。

    燕窝中硫酸乙酰肝素/肝素的提取方法与结构解析

    公开(公告)号:CN110592165B

    公开(公告)日:2021-04-27

    申请号:CN201910996268.8

    申请日:2019-10-18

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明提供燕窝中硫酸乙酰肝素/肝素的提取方法与结构解析,属于天然产物制备纯化领域。该方法先将粉末状燕窝用胰蛋白酶酶解,再通过DEAE阴离子交换色谱柱、透析、冻干等一系列步骤得到燕窝糖胺聚糖。然后样品用肝素酶Ⅰ、肝素酶Ⅱ、肝素酶Ⅲ特异性酶解燕窝糖胺聚糖至硫酸乙酰肝素/肝素二糖,再利用分子排阻色谱法,分离纯化得到硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖。硫酸乙酰肝素二糖/肝素二糖以离子对试剂为流动相,利用LC/MS‑ITTOF分析二糖组分的结构并得到摩尔百分比,最后建立硫酸乙酰肝素二糖/肝素区域结构模型。

    一种制备硫酸乙酰肝素寡糖的方法

    公开(公告)号:CN111763702A

    公开(公告)日:2020-10-13

    申请号:CN202010670262.4

    申请日:2020-07-13

    Applicant: 福州大学

    Abstract: 本发明公开了一种制备硫酸乙酰肝素寡糖的方法,包括以下步骤:向搅拌式过滤装置中加入Tris-HCL缓冲液、硫酸乙酰肝素、肝素酶I进行第一超滤反应,收集第一反应滤液;对第一反应滤液进行冷冻干燥,获得第一硫酸乙酰肝素寡糖产品。本发明的一种制备硫酸乙酰肝素寡糖的方法将制备反应与超滤相结合,实现制备反应与超滤同时进行,利用这一动态反应方法可以制备系列不同结构的硫酸乙酰肝素寡糖,使得硫酸乙酰肝素寡糖产品中寡糖的结构种类更丰富,为研究肝素/硫酸乙酰肝素(Hep/HS)结构与功能的关系提供重要的样品糖库;并成功解决了Hep/HS酶解过程中生成的硫酸乙酰肝素寡糖难以分离的难题。

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