公开(公告)号：CN102533677B

公开(公告)日：2013-07-24

申请号：CN201210005573.4

申请日：2012-01-10

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司 ,  天津耀宇生物技术有限公司 ,  天津市国际生物医药联合研究院

发明人： 崔立旺 ,  张耀洲 ,  吴昕昕 ,  陈剑清 ,  舒特俊

IPC分类号： C12N7/01 ,  C12N15/30 ,  C12N15/866 ,  C07K14/445 ,  A61K39/015 ,  A61P33/06 ,  C12R1/93

CPC分类号： Y02A50/412

摘要： 本发明涉及一种疟疾疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域。本发明通过构建一种重组家蚕杆状病毒，并运用杆状病毒表面展示技术将恶性疟原虫裂殖子表面膜蛋白1C-末端的19kD片段(MSP119C)表达于家蚕杆状病毒表面，以家蚕蛹作为生物反应器生产重组杆状病毒，并以此重组杆状病毒制备疟疾疫苗。相比于传统的疟疾疫苗生产具有安全性好、生产成本低、产量高、易于操作、适用于大规模生产的特点。

公开(公告)号：CN102372777B

公开(公告)日：2013-12-25

申请号：CN201110339033.5

申请日：2011-11-01

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司 ,  天津市国际生物医药联合研究院

发明人： 叶曼 ,  陈昊 ,  张耀洲 ,  陈剑清 ,  舒特俊

IPC分类号： C07K14/81 ,  C07K1/14

摘要： 本发明属于一种天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的纯化方法，方法包括蚕蛹预处理，天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的初步分离纯化，天然丝氨酸蛋白酶抑制剂的分离纯化的步骤。本发明能利用蚕蛹作为原料，通过分离纯化获得具有药用价值的蚕蛹中天然丝氨酸蛋白酶抑制剂，该方法操作简便，且产量高，适用于大规模生产，提纯的天然丝氨酸蛋白酶抑制剂可作为保健药物，无毒副作用。

公开(公告)号：CN102516381B

公开(公告)日：2013-10-30

申请号：CN201110426497.X

申请日：2011-12-19

申请人： 天津耀宇生物技术有限公司 ,  天津市国际生物医药联合研究院

发明人： 叶曼 ,  陈昊 ,  刘阳 ,  陈剑清 ,  舒特俊 ,  张耀洲

IPC分类号： C07K14/435 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C12N5/07 ,  C12N5/073

摘要： 本发明涉及一种天然性别储存白2的制备方法及其用途，属于生物技术领域。本发明以蚕蛹作为原料，通过匀浆，过滤，离心，收集上清后,利用蛋白本身耐高温的特性分离纯化，获得高纯度的天然性别储存蛋白2(SSP2)，并用于细胞培养。本发明所提供的方法，原料易得，生产成本低；而且简单易操作，且产量高，可适用于大规模生产；此外所提纯的性别储存蛋白2可作为细胞培养中的保护剂，保护细胞以免细胞应激而导致细胞凋亡。

公开(公告)号：CN102850447B

公开(公告)日：2013-12-25

申请号：CN201210277340.X

申请日：2012-08-06

申请人： 天津耀宇生物技术有限公司 ,  天津市国际生物医药联合研究院

发明人： 张耀洲 ,  杨波 ,  张小蓓 ,  陈剑清 ,  舒特俊

IPC分类号： C07K14/435 ,  C07K1/36 ,  C07K1/34 ,  C07K1/18

摘要： 本发明涉及一种家蚕天然膜蛋白PRMC2的纯化方法，属于蛋白质纯化技术领域。本发明以发病蚕蛹作为原料，通过匀浆，差速离心，密度梯度离心，超滤，及HA活性标定，得到膜含量高的组分，然后用去垢剂将膜蛋白提取出来，再经三步层析分离纯化，得到所述家蚕天然膜蛋白PRMC2。本发明提供的纯化方法，对较难分离的天然膜蛋白的纯化提出了一种全新的解决方法，具有重要意义。

公开(公告)号：CN102559613B

公开(公告)日：2014-04-23

申请号：CN201210005571.5

申请日：2012-01-10

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司 ,  天津耀宇生物技术有限公司

发明人： 崔立旺 ,  张耀洲 ,  申俊 ,  陈剑清 ,  舒特俊

IPC分类号： C12N7/01 ,  C12N15/30 ,  C12N15/866 ,  C07K14/445 ,  A61K39/015 ,  A61P33/06 ,  C12R1/93

CPC分类号： Y02A50/412

摘要： 本发明涉及一种恶性疟疾疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域。本发明通过构建一种家蚕重组杆状病毒，并运用重组杆状病毒表面展示技术构建表达恶性疟原虫主要抗原AMA1胞外域的重组杆状病毒，以家蚕蛹作为生物反应器生产该重组杆状病毒，并以此重组杆状病毒作为疟疾疫苗原生产疫苗。相比传统疫苗生产具有安全性好、生产成本低、产量高、易于操作、适用于大规模生产的特点。

公开(公告)号：CN104711232B

公开(公告)日：2018-12-14

申请号：CN201310705625.3

申请日：2013-12-16

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司

发明人： 张耀洲

IPC分类号： C12N7/02 ,  C12R1/93

摘要： 本发明提供一种表面展示有H5N1流感病毒HA蛋白的家蚕重组杆状病毒的纯化方法，它以感染了重组杆状病毒NPV‑gp64‑HA的蚕蛹为原料，与无菌水进行混合后进行匀浆，取匀浆液低速离心，取低速离心的稠状溶液高速离心，取高速离心的上清用0.1μm膜包超滤，取截留液超速离心，得到黑团用超滤液重悬过夜，蔗糖密度梯度离心，然后取区带后活性高的样品，300KD膜包超滤，0.22μm滤膜过滤，收集截留液，获得表面展示有H5N1流感病毒HA蛋白的病毒粒子。该方法可以获得具有较纯的在家蚕杆状病毒表面展示有禽流感H5N1HA蛋白的病毒粒子。

公开(公告)号：CN104711289A

公开(公告)日：2015-06-17

申请号：CN201310714984.5

申请日：2013-12-16

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司

发明人： 张耀洲 ,  李伟杰 ,  崔立旺 ,  王小飞 ,  闫晶晶 ,  舒特俊 ,  陈剑清 ,  盖其静

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/866 ,  C07K19/00 ,  A61K48/00 ,  A61K39/015 ,  A61P33/06

CPC分类号： Y02A50/412

摘要： 本发明提供一种重组载体、利用该载体制备的重组杆状病毒以及该病毒在疟疾疫苗制备中的应用。该重组载体由一段重组序列插入到pFastBacDual载体中构建而成，所述重组序列为根据CMV、Ph、SP、TM序列，在SP和TM间加入EcoR I酶切位点和Xho I酶切位点，CMV-F前加入KpnI酶切位点，TM-R后加入HindIII酶切位点形成。该重组杆状病毒由约氏疟原虫Pys25抗原基因插入到该重组载体并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，然后转染家蚕细胞，在家蚕细胞内包装得到。该重组杆状病毒通过简单地分离纯化，制备抗体具有良好的效价，能够为P25疟疾疫苗的研究提供参考。

公开(公告)号：CN104711288A

公开(公告)日：2015-06-17

申请号：CN201310714982.6

申请日：2013-12-16

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司

发明人： 崔立旺 ,  李伟杰 ,  张耀洲 ,  盛稳稳 ,  闫晶晶 ,  舒特俊 ,  陈剑清 ,  盖其静

IPC分类号： C12N15/85 ,  C12N15/866 ,  C07K19/00 ,  A61K48/00 ,  A61K39/015 ,  A61P33/06

CPC分类号： Y02A50/412

摘要： 本发明提供一种重组载体、利用该载体制备的重组杆状病毒以及该病毒在疟疾疫苗制备中的应用。该重组载体由一段重组序列插入到pFastBacDual载体中构建而成，所述重组序列为根据CMV、Ph、SP、TM序列，在SP和TM间加入EcoR I酶切位点和Xho I酶切位点，CMV-F前加入KpnI酶切位点，TM-R后加入HindIII酶切位点形成。该重组杆状病毒由约氏疟原虫Pys48抗原基因插入到该重组载体并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，然后转染家蚕细胞，在家蚕细胞内包装得到。该重组杆状病毒通过简单地分离纯化，制备抗体具有良好的效价，能够为P48疟疾疫苗的研究提供参考。

公开(公告)号：CN102533860A

公开(公告)日：2012-07-04

申请号：CN201210005587.6

申请日：2012-01-10

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司

发明人： 于东寨 ,  陈剑清 ,  舒特俊 ,  张耀洲

IPC分类号： C12N15/866 ,  C12N15/66 ,  C07K14/09 ,  A61K48/00 ,  A61K39/135 ,  A61P31/14

摘要： 本发明一种手足口病疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域。本发明通过构建一种重组家蚕杆状病毒，并运用杆状病毒表面展示技术将手足口病主要抗原蛋白基因EV71VP1序列表达于家蚕杆状病毒表面，以家蚕蛹作为生物反应器生产重组杆状病毒，并以此重组杆状病毒制备手足口病疫苗。相比于传统的手足口病疫苗生产具有安全性好、生产成本低、产量高、易于操作、适用于大规模生产的特点；此外所生产的疫苗免疫BALB/c小鼠后抗血清IgG效价达1:800，中和抗体效价达1:700，故具有良好的免疫原性。

公开(公告)号：CN104293740B

公开(公告)日：2018-03-09

申请号：CN201310301800.2

申请日：2013-07-18

申请人： 特菲(天津)生物医药科技有限公司

发明人： 张耀洲 ,  闫晶晶 ,  舒特俊 ,  陈剑清 ,  盖其静 ,  赵红玉

IPC分类号： C12N7/01 ,  C12N15/866 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00 ,  A61K39/295 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14

摘要： 本发明公开了一种表面展示SARS双价抗原的重组杆状病毒及其制备方法和应用，该病毒是由重组蛋白SP‑N‑TM和SP‑RBD‑TM的编码基因插入到供体质粒并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，获得重组杆状病毒基因组DNA，然后将该基因组DNA转染家蚕细胞，在细胞内包装得到的重组杆状病毒；其中重组蛋白SP‑N‑TM是由SARS病毒的N蛋白的N‑端连接GP64的信号肽SP，C‑端连接GP64的跨膜域TM构成；SP‑RBD‑TM是由SARS病毒的RBD蛋白的N‑端连接SP，C‑端连接TM构成。该重组杆状病毒将SARS病毒的N蛋白及RBD蛋白基因在病毒衣壳表面展示，具有良好的免疫原性。