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公开(公告)号：CN104711232B
公开(公告)日：2018-12-14
申请号：CN201310705625.3
申请日：2013-12-16
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
Inventor： 张耀洲
Abstract: 本发明提供一种表面展示有H5N1流感病毒HA蛋白的家蚕重组杆状病毒的纯化方法，它以感染了重组杆状病毒NPV‑gp64‑HA的蚕蛹为原料，与无菌水进行混合后进行匀浆，取匀浆液低速离心，取低速离心的稠状溶液高速离心，取高速离心的上清用0.1μm膜包超滤，取截留液超速离心，得到黑团用超滤液重悬过夜，蔗糖密度梯度离心，然后取区带后活性高的样品，300KD膜包超滤，0.22μm滤膜过滤，收集截留液，获得表面展示有H5N1流感病毒HA蛋白的病毒粒子。该方法可以获得具有较纯的在家蚕杆状病毒表面展示有禽流感H5N1HA蛋白的病毒粒子。
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公开(公告)号：CN104711289A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201310714984.5
申请日：2013-12-16
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/866 , C07K19/00 , A61K48/00 , A61K39/015 , A61P33/06
CPC classification number: Y02A50/412
Abstract: 本发明提供一种重组载体、利用该载体制备的重组杆状病毒以及该病毒在疟疾疫苗制备中的应用。该重组载体由一段重组序列插入到pFastBacDual载体中构建而成，所述重组序列为根据CMV、Ph、SP、TM序列，在SP和TM间加入EcoR I酶切位点和Xho I酶切位点，CMV-F前加入KpnI酶切位点，TM-R后加入HindIII酶切位点形成。该重组杆状病毒由约氏疟原虫Pys25抗原基因插入到该重组载体并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，然后转染家蚕细胞，在家蚕细胞内包装得到。该重组杆状病毒通过简单地分离纯化，制备抗体具有良好的效价，能够为P25疟疾疫苗的研究提供参考。
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公开(公告)号：CN104711288A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201310714982.6
申请日：2013-12-16
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
IPC: C12N15/85 , C12N15/866 , C07K19/00 , A61K48/00 , A61K39/015 , A61P33/06
CPC classification number: Y02A50/412
Abstract: 本发明提供一种重组载体、利用该载体制备的重组杆状病毒以及该病毒在疟疾疫苗制备中的应用。该重组载体由一段重组序列插入到pFastBacDual载体中构建而成，所述重组序列为根据CMV、Ph、SP、TM序列，在SP和TM间加入EcoR I酶切位点和Xho I酶切位点，CMV-F前加入KpnI酶切位点，TM-R后加入HindIII酶切位点形成。该重组杆状病毒由约氏疟原虫Pys48抗原基因插入到该重组载体并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，然后转染家蚕细胞，在家蚕细胞内包装得到。该重组杆状病毒通过简单地分离纯化，制备抗体具有良好的效价，能够为P48疟疾疫苗的研究提供参考。
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公开(公告)号：CN102533860A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210005587.6
申请日：2012-01-10
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
IPC: C12N15/866 , C12N15/66 , C07K14/09 , A61K48/00 , A61K39/135 , A61P31/14
Abstract: 本发明一种手足口病疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域。本发明通过构建一种重组家蚕杆状病毒，并运用杆状病毒表面展示技术将手足口病主要抗原蛋白基因EV71VP1序列表达于家蚕杆状病毒表面，以家蚕蛹作为生物反应器生产重组杆状病毒，并以此重组杆状病毒制备手足口病疫苗。相比于传统的手足口病疫苗生产具有安全性好、生产成本低、产量高、易于操作、适用于大规模生产的特点；此外所生产的疫苗免疫BALB/c小鼠后抗血清IgG效价达1:800，中和抗体效价达1:700，故具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN104292338B
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201310301846.4
申请日：2013-07-18
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
Abstract: 本发明公开了含SARS病毒N抗原的重组蛋白及展示N蛋白的杆状病毒，该重组蛋白SP-N-TM是由SARS病毒的N蛋白的N-端连接杆状病毒囊膜蛋白GP64的信号肽SP，C-端连接杆状病毒囊膜蛋白GP64的跨膜域TM构成。表面展示SARS抗原N蛋白的重组杆状病毒是由SP-N-TM的编码基因插入到供体质粒并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，获得重组杆状病毒基因组，然后将重组杆状病毒基因组转染家蚕细胞，在其内包装得到的重组杆状病毒。本发明的重组杆状病毒将SARS病毒的N蛋白基因与家蚕杆状病毒囊膜蛋白GP64基因融合，实现N蛋白在病毒衣壳上的表面展示，具有良好的免疫原性，应用价值大。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104711290A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201310705623.4
申请日：2013-12-16
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
IPC: C12N15/866 , C12N7/01 , C12N15/30 , C07K19/00 , A61K39/015 , A61P33/06
CPC classification number: Y02A50/412
Abstract: 本发明提供一种重组质粒、利用该重组质粒制备的重组杆状病毒以及该病毒在间日疟传播阻断疫苗制备中的应用。该重组质粒由一段重组序列插入到pFastBacDual质粒中构建而成，该重组序列为根据CMV、Pph、SP、TM已知序列，在SP和TM序列间加入Xba I酶切位点和Xho I酶切位点，CMV-F前加入KpnI酶切位点，TM-R后加入HindIII酶切位点形成。该重组杆状病毒由Pvs25基因插入到上述重组质粒并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，然后转染家蚕细胞，在家蚕细胞内包装得到。此生产疫苗的方法具有安全性好、生产成本低、易于大规模生产操作的特点。
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公开(公告)号：CN104711232A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201310705625.3
申请日：2013-12-16
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
Inventor： 张耀洲
Abstract: 本发明提供一种表面展示有H5N1流感病毒HA蛋白的家蚕重组杆状病毒的纯化方法，它以感染了重组杆状病毒NPV-gp64-HA的蚕蛹为原料，与无菌水进行混合后进行匀浆，取匀浆液低速离心，取低速离心的稠状溶液高速离心，取高速离心的上清用0.1μm膜包超滤，取截留液超速离心，得到黑团用超滤液重悬过夜，蔗糖密度梯度离心，然后取区带后活性高的样品，300KD膜包超滤，0.22μm滤膜过滤，收集截留液，获得表面展示有H5N1流感病毒HA蛋白的病毒粒子。该方法可以获得具有较纯的在家蚕杆状病毒表面展示有禽流感H5N1HA蛋白的病毒粒子。
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公开(公告)号：CN104293740A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201310301800.2
申请日：2013-07-18
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/866 , C12N15/62 , C07K19/00 , A61K39/295 , A61K39/215 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了一种表面展示SARS双价抗原的重组杆状病毒及其制备方法和应用，该病毒是由重组蛋白SP-N-TM和SP-RBD-TM的编码基因插入到供体质粒并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，获得重组杆状病毒基因组DNA，然后将该基因组DNA转染家蚕细胞，在细胞内包装得到的重组杆状病毒；其中重组蛋白SP-N-TM是由SARS病毒的N蛋白的N-端连接GP64的信号肽SP，C-端连接GP64的跨膜域TM构成；SP-RBD-TM是由SARS病毒的RBD蛋白的N-端连接SP，C-端连接TM构成。该重组杆状病毒将SARS病毒的N蛋白及RBD蛋白基因在病毒衣壳表面展示，具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN104292339A
公开(公告)日：2015-01-21
申请号：CN201310301896.2
申请日：2013-07-18
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
Abstract: 本发明公开了含SARS病毒RBD抗原的重组蛋白及展示RBD蛋白的杆状病毒，该重组蛋白SP-RBD-TM是由SARS病毒的RBD蛋白的N-端连接杆状病毒囊膜蛋白GP64的信号肽SP，C-端连接杆状病毒囊膜蛋白GP64的跨膜域TM构成。表面展示SARS抗原RBD蛋白的重组杆状病毒是由SP-RBD-TM的编码基因插入到供体质粒并通过转座与穿梭载体Bacmid的基因组进行同源重组，获得重组杆状病毒基因组，然后将重组杆状病毒基因组转染家蚕细胞，在其内包装得到的重组杆状病毒。重组杆状病毒将SARS病毒的RBD蛋白与家蚕杆状病毒囊膜蛋白GP64融合，实现RBD蛋白在病毒衣壳上的展示，具有良好的免疫原性。
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公开(公告)号：CN102533677A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201210005573.4
申请日：2012-01-10
Applicant: 特菲(天津)生物医药科技有限公司
IPC: C12N7/01 , C12N15/30 , C12N15/866 , C07K14/445 , A61K39/015 , A61P33/06 , C12R1/93
CPC classification number: Y02A50/412
Abstract: 本发明涉及一种疟疾疫苗及其制备方法，属于生物医药技术领域。本发明通过构建一种重组家蚕杆状病毒，并运用杆状病毒表面展示技术将恶性疟原虫裂殖子表面膜蛋白1C-末端的19kD片段(MSP119C)表达于家蚕杆状病毒表面，以家蚕蛹作为生物反应器生产重组杆状病毒，并以此重组杆状病毒制备疟疾疫苗。相比于传统的疟疾疫苗生产具有安全性好、生产成本低、产量高、易于操作、适用于大规模生产的特点。
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