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公开(公告)号：CN116042775B
公开(公告)日：2024-10-29
申请号：CN202211726947.1
申请日：2022-12-30
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心
IPC: C12Q1/6818 , C12N15/11 , C12Q1/6895
Abstract: 本发明公开了一种钠离子检测试剂盒及其快速检测方法和应用，该检测试剂盒包括两条短核酸序列Enzymestrand和Substratestrand，其中Enzymestrand为Na+依赖性DNAzyme链，5'末端修饰有淬灭基团，Substratestrand为Na+依赖性DNAzyme底物链，3'末端修饰有荧光基团。本发明是以钠离子为分子生物标志物，通过基于Na+依赖性DNAzyme酶促反应和荧光共振能量转移(FRET)机制，建立Na+检测生物传感器，从而达到对Na+快速检测的目的，并可进一步应用于耐盐水稻品种的快速鉴定与选育。
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公开(公告)号：CN111850035B
公开(公告)日：2023-11-14
申请号：CN202010626377.3
申请日：2020-07-01
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心
Abstract: 本发明公开了一种通过抑制植物除草剂抗性基因表达去除色选漏检转基因种子的方法，包括如下步骤：将抑制植物除草剂抗性基因表达的元件，与育性恢复基因、花粉致死基因和荧光标记基因构建四元连锁表达载体，转化入对对应类型除草剂具有抗性的不育系中，获得对对应类型除草剂敏感的繁殖系；繁殖系自交结实，采用对应类型除草剂对色选机筛选得到的不育系种子进行除杂，去除色选漏检的含有四元转基因元件的繁殖系种子。该方法可以杀死色选漏检的含有转基因成分的繁殖系，可以百分之百规避第三代杂交水稻制种或机械化混播混收制种使用不育系因色选漏检带来的杂交制种及获得的杂交种子转基因污染风险，操作简单、高效。
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公开(公告)号：CN114375826A
公开(公告)日：2022-04-22
申请号：CN202011118091.0
申请日：2020-10-19
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用红色颖壳亲本生产杂交水稻种子的方法，包括以下步骤：以颖壳颜色为红色的恢复系为父本，以正常颖壳颜色的光温敏雄性不育系为母本，进行混播制种获得杂交稻种子；通过色选方式分选出高纯度的杂交稻种子。本发明以隆科638S为母本、先恢xk01为父本，针对播种方式、父母本比例、赶粉与否设置参数，进行混播制种，筛选出产量较高、成本大幅降低的参数，色选精度达到99.97％以上，为实现机械化制种提供有力支撑。
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公开(公告)号：CN113430224A
公开(公告)日：2021-09-24
申请号：CN202110679391.4
申请日：2021-06-18
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
IPC: C12N15/84 , C12N15/65 , C12N15/55 , C12N15/56 , C12N15/29 , C12N15/10 , A01H5/02 , A01H5/10 , A01H6/46
Abstract: 本发明公开了一种可视化CRISPR/Cas9基因编辑系统，包括基因编辑元件、外源T‑DNA可视化追踪元件和转基因花粉失活元件，转基因花粉失活元件为玉米α‑淀粉酶基因ZMAA1的表达框；基因编辑元件为CRISPR/Cas9表达结构，CRISPR/Cas9表达结构包括Cas9基因表达框和gRNA表达框；外源T‑DNA可视化追踪元件为红色荧光蛋白基因DsRed的表达框。本发明利用胚乳荧光蛋白标记携带外源Cas9基因T‑DNA区的转基因种子，以筛选不含转基因的突变体种子。同时，利用花粉失活技术使携带Cas9基因的花粉失活，增加无转基因成分种子的比例，且避免因转基因花粉漂移带来的生物安全隐患。
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公开(公告)号：CN110331161B
公开(公告)日：2021-04-02
申请号：CN201910699895.5
申请日：2019-07-31
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用显性黑色颖壳性状提高水稻遗传工程核不育系种子色选精度的方法，具体为：培育黄颖双色选遗传工程核不育系；将显性黑色颖壳基因、育性恢复基因、花粉失活基因和荧光标记基因四个连锁表达的基因导入至黄颖双色选遗传工程核不育系基因组中培育黑颖双色选遗传工程繁殖系；黑颖双色选遗传工程繁殖系与黄颖双色选遗传工程核不育系混植，混收全部种子；根据颖壳颜色对混收的种子进行第一次筛选，分离黄颖不育系种子和黑颖种子；根据胚乳是否发荧光进行第二次筛选，提纯黄颖不育系种子。本发明利用水稻显性黑色颖壳作为新的色选标记提高遗传工程核不育系种子在分选过程中的纯度，实现遗传工程核不育系纯度达到生产应用标准的目标。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN112063742A
公开(公告)日：2020-12-11
申请号：CN202010967845.3
申请日：2020-09-15
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于鉴定Cry1Ab基因的KASP标记引物及应用，由其组成的试剂盒及试剂盒的应用，KASP标记引物包括K2标记引物和K4标记引物；K2标记引物包括K2A‑F、K2A‑R、K2G‑F K2G‑R；K4标记引物包括K4C‑F、K4C‑R、K4G‑F、K4G‑R。试剂盒包括KASP标记引物和KASP反应混合液。本发明的KASP标记引物，能够快速精准高通量的完成回交转育后代的基因分型，并有效区分抗虫基因的杂合型，可应用于抗虫回交转育群体的基因型鉴定。
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公开(公告)号：CN111850035A
公开(公告)日：2020-10-30
申请号：CN202010626377.3
申请日：2020-07-01
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心
Abstract: 本发明公开了一种通过抑制植物除草剂抗性基因表达去除色选漏检转基因种子的方法，包括如下步骤：将抑制植物除草剂抗性基因表达的元件，与育性恢复基因、花粉致死基因和荧光标记基因构建四元连锁表达载体，转化入对对应类型除草剂具有抗性的不育系中，获得对对应类型除草剂敏感的繁殖系；繁殖系自交结实，采用对应类型除草剂对色选机筛选得到的不育系种子进行除杂，去除色选漏检的含有四元转基因元件的繁殖系种子。该方法可以杀死色选漏检的含有转基因成分的繁殖系，可以百分之百规避第三代杂交水稻制种或机械化混播混收制种使用不育系因色选漏检带来的杂交制种及获得的杂交种子转基因污染风险，操作简单、高效。
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公开(公告)号：CN110250000B
公开(公告)日：2020-04-07
申请号：CN201910699890.2
申请日：2019-07-31
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用隐性颖壳颜色性状提高水稻遗传工程核不育系种子色选精度的方法，将隐性异色颖壳可育水稻材料培育成双色选遗传工程核不育系；将包含黄颖基因、育性恢复基因、花粉失活基因和荧光标记基因的四元连锁载体导入至双色选遗传工程核不育系的基因组中培育双色选遗传工程繁殖系；将双色选遗传工程繁殖系和与双色选遗传工程核不育系混植，混收全部种子；第一次荧光筛选，分离无荧光的不育系种子和发荧光的繁殖系种子；第二次颖壳颜色筛选，提纯异色颖壳不育系种子。本发明利用水稻隐性异色颖壳作为新的色选标记提高遗传工程核不育系种子在分选过程中的纯度，实现遗传工程核不育系纯度达到生产应用标准的目标。
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公开(公告)号：CN110305895A
公开(公告)日：2019-10-08
申请号：CN201910700220.8
申请日：2019-07-31
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心 , 湖南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种利用水稻RAmy1A基因防止转基因花粉漂移的方法，包括以下步骤：将花粉特异性启动子和水稻RAmy1A基因连接至表达载体的目标T-DNA区得到重组载体；水稻RAmy1A基因如SEQ ID NO.1所示；花粉特异性启动子为PNOP启动子，PNOP启动子的DNA序列如SEQ ID NO.2所示；将所述重组载体导入水稻愈伤组织中获得花粉败育的水稻植株。本发明利用水稻内源α淀粉酶基因构建花粉失活技术来防止转基因花粉漂移，将RAmy1A基因和花粉特异性启动子导入到水稻愈伤组织中，通过在花粉发育过程中高水平表达α淀粉酶，使花粉成熟过程中形成的淀粉粒不断降解。达到构建水稻普通核不育系种子的目的。
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公开(公告)号：CN105210858B
公开(公告)日：2017-07-25
申请号：CN201510759876.9
申请日：2015-11-09
Applicant: 湖南杂交水稻研究中心
IPC: A01H1/02
Abstract: 本发明提供了一种杂交水稻的育种方法，该方法包括：(1)将第一水稻品系与第二水稻品系进行杂交，得到F1代水稻；(2)将所述F1代水稻进行自交得到F2代水稻；(3)选择上述F1自交后代中，带有目标性状的可育单株水稻进行自交系选；获得遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系；(4)使用基因定点突变技术，敲除上述遗传稳定的带有目标性状的可育水稻品系中的温敏核不育基因TMS5，获得带有目标性状但不含转基因成分的温敏核不育水稻品系S；(5)利用所述S通过杂交配组，选育杂交水稻组合。本发明的杂交水稻的育种方法优化了两系杂交水稻选育过程，大大提高了育种效果。
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