公开(公告)号：CN117736338A

公开(公告)日：2024-03-22

申请号：CN202311679527.7

申请日：2023-12-08

Applicant: 温州医科大学

Inventor： 李校堃 ,  林丽 ,  高爽 ,  龚方华 ,  赵文刚 ,  王云鹏 ,  许诺

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  C12N15/74 ,  C12N1/21 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/20 ,  C12Q1/6895 ,  C12N15/11 ,  G01N33/68 ,  A61K47/64 ,  A61K38/18 ,  A61P17/14 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种角质细胞生长因子‑透皮肽融合蛋白，该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.12所示，编码如所述的融合蛋白的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.8所示，含有如所述的基因的重组载体，所述重组载体采用pGM3301。本发明解决了现有技术对KGF‑2的稳定性造成不可逆的影响，同时也会影响使用者的体验感的问题。本发明能提高KGF2的生物安全性和稳定性，不影响KGF2的生物学活性，融合了TP1的KGF2显著的提高KGF2的透皮率，并且极大提高了其促生发作用的应用前景；同时生物透皮给药也可以减少微针带来的疼痛感，此融合蛋白生产系统和凝胶制剂无任何潜在风险，减少了对于皮肤的伤害。

公开(公告)号：CN107058332A

公开(公告)日：2017-08-18

申请号：CN201710004159.4

申请日：2017-01-04

Applicant: 温州医科大学

Inventor： 田海山 ,  李校堃 ,  郑婕 ,  姜潮 ,  王申 ,  马吉胜 ,  许诺

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/50 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16 ,  A61K38/18 ,  A61P21/00 ,  A61P19/08 ,  A61P9/00 ,  A61P17/02 ,  C12R1/19

CPC classification number: C07K14/50 ,  A61K38/00 ,  C12N15/70 ,  C12N2800/101

Abstract: 本发明公开了一种编码rhFGF‑6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用，涉及生物医药领域。本发明提供的编码rhFGF‑6的核酸片段根据FGF‑6的天然序列优化而得，在天然序列的基础上去除了37个信号肽，消除了不利于表达的二级结构，但是不改变FGF‑6的氨基酸序列，将此核酸片段构建到合适的载体构成重组表达载体，再将重组表达载体转化进入宿主细胞，得到重组菌，培养该重组菌，用诱导剂进行诱导表达，能够高表达rhFGF‑6，并且表达的rhFGF‑6具有促进组织再生、促进骨生成、修复心肌损伤、促进创伤愈合、促进血管再生的活性。

公开(公告)号：CN107058332B

公开(公告)日：2021-03-23

申请号：CN201710004159.4

申请日：2017-01-04

Applicant: 温州医科大学

Inventor： 田海山 ,  李校堃 ,  郑婕 ,  姜潮 ,  王申 ,  马吉胜 ,  许诺

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/50 ,  C07K1/18 ,  C07K1/16 ,  A61K38/18 ,  A61P21/00 ,  A61P19/08 ,  A61P9/00 ,  A61P17/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种编码rhFGF‑6的核酸片段、表达载体、宿主细胞、生产方法及应用，涉及生物医药领域。本发明提供的编码rhFGF‑6的核酸片段根据FGF‑6的天然序列优化而得，在天然序列的基础上去除了37个信号肽，消除了不利于表达的二级结构，但是不改变FGF‑6的氨基酸序列，将此核酸片段构建到合适的载体构成重组表达载体，再将重组表达载体转化进入宿主细胞，得到重组菌，培养该重组菌，用诱导剂进行诱导表达，能够高表达rhFGF‑6，并且表达的rhFGF‑6具有促进组织再生、促进骨生成、修复心肌损伤、促进创伤愈合、促进血管再生的活性。

公开(公告)号：CN106801060B

公开(公告)日：2020-06-09

申请号：CN201710199557.6

申请日：2017-03-29

Applicant: 温州医科大学 ,  李校堃

Inventor： 田海山 ,  姜潮 ,  杨欢欢 ,  王申 ,  许诺 ,  林海鹏

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C07K14/50 ,  C07K1/14 ,  C07K1/18 ,  C07K1/22 ,  A61K38/18 ,  A61P1/16 ,  A61P25/00 ,  A61P27/02 ,  A61P17/02 ,  A61P1/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种重组人成纤维细胞生长因子‑22的基因克隆、表达和应用，涉及分子生物学技术领域。本发明通过对人成纤维细胞生长因子‑22核苷酸序列进行优化及与适宜的表达载体和宿主细胞的组合，构建了重组人成纤维细胞生长因子‑22的高效表达菌株，建立规模化的高密度发酵培养技术及优化包涵体变复性方法，并通过合理串联色谱柱纯化，最终获得纯度超过95％并具有高生物学活性的重组人成纤维细胞生长因子‑22蛋白，为进一步开展疾病相关作用机制研究和新药开发奠定了基础。

公开(公告)号：CN107012150A

公开(公告)日：2017-08-04

申请号：CN201710340788.4

申请日：2017-05-12

Applicant: 温州医科大学 ,  李校堃

Inventor： 田海山 ,  姜潮 ,  程继亮 ,  许诺

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C07K14/50 ,  C07K1/36 ,  C07K1/18 ,  C07K1/22 ,  C12Q1/02 ,  A61K38/18 ,  A61P9/00 ,  A61P17/02 ,  A61P17/00 ,  G01N33/574 ,  C12R1/19

CPC classification number: C07K14/50 ,  A61K38/00 ,  C12N15/70 ,  C12N2503/02 ,  G01N33/5008 ,  G01N33/57423 ,  G01N33/57449 ,  G01N33/57484 ,  G01N2333/50 ,  G01N2500/10

Abstract: 本发明提供了一种重组人成纤维细胞生长因子‑16的克隆、表达和应用及其生物学活性的测定方法，涉及生物医药的技术领域。本发明通过对hFGF16基因进行优化和重组菌株构建，获得高效稳定表达的工程菌株；通过建立高密度培养方法，使rhFGF16蛋白的表达水平达到菌体总蛋白的30％以上。通过温度、培养基、诱导剂及添加方式的优化，增加可溶性表达蛋白的含量，并建立了可溶性蛋白和包涵体形式表达蛋白的纯化方法。另外，本发明还建立了用NIH 3T3、H460及H9C2细胞株进行rhFGF16蛋白促增殖作用活性的测定方法。

公开(公告)号：CN118546231A

公开(公告)日：2024-08-27

申请号：CN202410859456.7

申请日：2024-06-28

Applicant: 温州医科大学

Inventor： 李校堃 ,  林丽 ,  高爽 ,  龚方华 ,  张宏宇 ,  胡振林 ,  宣暄 ,  许诺

IPC: C07K14/475 ,  C12N15/66 ,  C12N15/82 ,  C12N15/12 ,  A01H6/20 ,  A01H5/00 ,  A61K38/18 ,  A61P17/02 ,  A61K8/64 ,  A61Q19/00

Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，尤其涉及一种修复皮肤屏障的VEGF改构蛋白(VEGFt)及其在植物中表达的方法。本发明公开了一种新型VEGF改构蛋白。通过精确改造，该蛋白去除了与VEGFR1和VEGFR2的结合区，从而显著降低了其促进肿瘤血管生成的风险；同时，仍保留了修复皮肤屏障的关键功能，并提高了透皮效率。此外，本发明还创新性地采用了植物生物反应器来表达所述VEGF改构蛋白，利用含有VEGFt基因片段的质粒载体转化受体植物，从成功转基因的植物株系中提取VEGFt。这种方法不仅提高了生物安全性和稳定性，还有助于降低生产成本，因此具有广阔的应用前景。

公开(公告)号：CN117327193A

公开(公告)日：2024-01-02

申请号：CN202311053372.6

申请日：2023-08-21

Applicant: 温州医科大学

Inventor： 高爽 ,  林世盛 ,  于广东 ,  许诺 ,  唐璐 ,  赵文刚

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C12N15/66 ,  C12N1/21 ,  A61K38/18 ,  A61K47/64 ,  A61K9/00 ,  A61P17/16 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种成纤维细胞生长因子21‑透皮肽融合蛋白、制备方法及其应用，该蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，并且进一步通过大肠杆菌表达生产高纯度的蛋白的制备方法。本发明提供的融合了TP1的FGF21，能提高FGF21的生物安全性和稳定性，不影响FGF21的生物学活性，并且解决FGF21在大肠杆菌表达体系中纯化后的纯度较低问题，可显著提高FGF21通过大肠杆菌表达生产的蛋白纯化产量极大提高了保护皮肤免受光损伤的应用前景；这为FGF21作为新的皮肤光损伤保护剂提供了新的应用前景。

公开(公告)号：CN106801060A

公开(公告)日：2017-06-06

申请号：CN201710199557.6

申请日：2017-03-29

Applicant: 温州医科大学 ,  李校堃

Inventor： 田海山 ,  姜潮 ,  杨欢欢 ,  王申 ,  许诺 ,  林海鹏

IPC: C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C07K14/50 ,  C07K1/14 ,  C07K1/18 ,  C07K1/22 ,  A61K38/18 ,  A61P1/16 ,  A61P25/00 ,  A61P27/02 ,  A61P17/02 ,  A61P1/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明提供了一种重组人成纤维细胞生长因子‑22的基因克隆、表达和应用，涉及分子生物学技术领域。本发明通过对人成纤维细胞生长因子‑22核苷酸序列进行优化及与适宜的表达载体和宿主细胞的组合，构建了重组人成纤维细胞生长因子‑22的高效表达菌株，建立规模化的高密度发酵培养技术及优化包涵体变复性方法，并通过合理串联色谱柱纯化，最终获得纯度超过95％并具有高生物学活性的重组人成纤维细胞生长因子‑22蛋白，为进一步开展疾病相关作用机制研究和新药开发奠定了基础。