公开(公告)号：CN115975837A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202210819968.1

申请日：2022-07-12

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 梅建凤 ,  郑素晶 ,  应国清 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  张彦璐

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/02 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌zjut‑mhol及其在产血红素加氧酶‑1中的应用，本发明合成并克隆了小鼠来源的HO‑1经偏好密码子优化的基因，构建了能够产HO‑1的基因重组大肠杆菌，并经过紫外线诱变，获得一株酶活力高、传代稳定的突变株，可应用于HO‑1的制备。该菌株经产酶培养，获得具有胞内活性HO‑1的菌体，产酶活力按干菌体质量计为122U/g。从菌体分离获得HO‑1冻干粉，冻干粉的酶活力为91.8U/g。

公开(公告)号：CN113355313B

公开(公告)日：2022-05-24

申请号：CN202110457533.2

申请日：2021-04-27

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 易喻 ,  岑灵照 ,  应国清 ,  梅建凤 ,  陈建澍 ,  张彦璐 ,  王旭东

IPC: C12N11/084 ,  C12N11/10 ,  C07K16/00 ,  C07K1/22 ,  B01J20/26 ,  B01J20/28 ,  B01J20/30 ,  B01D15/38 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种聚合物微球及其制备与在制备抗体纯化填料中的应用，所述聚合物微球是以聚乙烯醇和海藻酸钠为原料，加入水在80‑100℃溶解后，降温至40℃后加入含ZZ融合蛋白的重组大肠杆菌菌液制成水相；再将液体石蜡和表面活性剂混合为油相，水相缓慢滴加到油相中，30‑70℃搅拌形成乳液后，再加入饱和硼酸氯化钙水溶液，制备得到所述的聚合物微球；所述ZZ融合蛋白是将ZZ蛋白通过连接肽与锚定蛋白(LppOmpA)融合而成；本发明方法制备的聚合物微球的直径为50‑250nm，超大孔径为1μm至2μm，原料廉价，成本低，操作简单，省略了常规配基的表达、纯化、接枝等制备过程，解决了配基昂贵等问题。

公开(公告)号：CN107338201B

公开(公告)日：2021-02-02

申请号：CN201710485218.4

申请日：2017-06-23

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 梅建凤 ,  应国清 ,  董志红 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  张彦璐

IPC: C12N1/20 ,  C12P19/12 ,  C12R1/46

Abstract: 本发明公开了一种马链球菌兽疫亚种SXY36及在发酵生产透明质酸中的应用，本发明提供了马链球菌兽疫亚种SXY36菌株，以及发酵工艺法控制HA分子量的方法，其有益效果主要体现在：(1)SXY36经紫外线、微波和γ射线照射诱变选育，无溶血性，HA发酵产率高，遗传稳定，在优选的发酵条件下，摇瓶发酵产率可达0.731g/L，发酵罐发酵的产率可达4.78g/L；(2)采用两段变温发酵和稳定pH法，可以发酵制备高分子量HA，分子量可达1.89MDa，是常规发酵法的2倍。(3)采用发酵液自酶降解法制备不同分子量HA，控制酶解时间，即可生产分子量在0.035～1.89MDa范围内的HA。

公开(公告)号：CN105969691B

公开(公告)日：2019-06-14

申请号：CN201610407429.1

申请日：2016-06-08

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 梅建凤 ,  李靓 ,  应国清 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  张彦璐

IPC: C12N1/20 ,  C12N9/52 ,  C12R1/43

Abstract: 本发明公开了一种粘质沙雷氏菌LL‑413菌株及其制备舍雷肽酶的应用，将粘质沙雷氏菌LL‑413菌株接种入产酶培养基，于28～32℃、200～250r/min发酵20～42h，获得含有舍雷肽酶的发酵液，发酵液经过离心后去除菌体，上清液再经过盐析、透析和冷冻干燥后，即可得到舍雷肽酶；本发明LL‑413菌株生长快、容易培养，发酵周期短；产舍雷肽酶活性高，在优选的条件下，摇瓶发酵的酶活可达1126U/mL，10L发酵罐发酵酶活可达1505U/mL；分离纯化工艺简单，经盐析和透析脱盐后，舍雷肽酶的冻干粉酶活达2843U/mg，舍雷肽酶分子量为50kDa，纤溶活性达112357U/g。

公开(公告)号：CN105441504A

公开(公告)日：2016-03-30

申请号：CN201510804386.6

申请日：2015-11-19

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 梅建凤 ,  金航 ,  李靓 ,  王鸿 ,  应国清 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  张彦璐

IPC: C12P17/12 ,  C12R1/80

Abstract: 本发明提供了一种环二肽类化合物的制备方法，所述方法是将桔青霉(Penicillium citrinum)MNP12010101接种在含钴离子的发酵培养基中，在25～30℃、200～250r/min恒温振荡条件下培养5～7d后，再在25～30℃下静置4～5d，将培养液分离纯化，获得环(甘-脯)二肽、环(丙-脯)二肽、环(异亮-脯)二肽和环(丙-缬)二肽化合物；本发明所述培养方法使桔青霉MNP12010101细胞合成了常规培养条件下不能合成的环二肽；培养基组成简单，工艺简单，发酵成本低；桔青霉MNP12010101细胞合成的4种环二肽具有抗肿瘤活性。

公开(公告)号：CN112143691B

公开(公告)日：2022-02-11

申请号：CN202010912807.8

申请日：2020-09-03

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 梅建凤 ,  吴霞 ,  郑素晶 ,  易喻 ,  应国清 ,  王旭东 ,  张彦璐

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种大肠杆菌zjut‑bvr及其在制备胆绿素还原酶中的应用，所述的应用为：大肠杆菌zjut‑bvr经种子扩大培养后，以体积浓度3％–5％的接种量接种于含50μg/mL卡那霉素的表达培养基，于35–37℃、150–200r/min振荡培养至OD600＝0.6–1.0，加入终浓度为0.75–1.25mmol/L的IPTG，诱导培养至OD600＝1.2–2.5，获得含胆绿素还原酶的培养液，将培养液分离提取，获得胆绿素还原酶；本发明大肠杆菌经表达培养，获得含胞内活性胆绿素还原酶的菌体，培养液的酶活为0.267U/mL，经分离纯化获得活性为1.84U/mg的胆绿素还原酶。

公开(公告)号：CN109678957B

公开(公告)日：2021-04-06

申请号：CN201811487449.X

申请日：2018-12-06

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 张彦璐 ,  应国清 ,  俞敬爱 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  梅建凤

IPC: C07K16/24 ,  C12N5/20 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  G01N33/577 ,  G01N33/574 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种抗人TSLP单克隆抗体及其制备与应用，所述抗人TSLP单克隆抗体包括重链可变区和轻链可变区，所述重链可变区包含SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3所示的CDR1、CDR2、CDR3互补决定区或其功能可变体；所述轻链可变区包含SEQ ID NO.4、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6所示的CDR1、CDR2、CDR3互补决定区或其功能可变体；本发明成功制备了抗人TSLP单克隆抗体，该抗体特异性好，能够与人TSLP特异性结合，结合率高，且廉价易得，可以大规模生产，十分有利于开发成为过敏性炎症以及肿瘤免疫治疗的潜在药物。

公开(公告)号：CN109627309B

公开(公告)日：2020-05-26

申请号：CN201811621708.3

申请日：2018-12-28

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 梅建凤 ,  蔡少芬 ,  应国清 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  张彦璐 ,  徐敏

IPC: C07K14/435 ,  C12P21/06

Abstract: 本发明公开了一种利用舍雷肽酶水解丝素制备丝素肽的方法，所述方法为：将蚕丝丝素溶于CaC12水溶液中，加热煮沸至丝素溶解后，过滤，取滤液，获得丝素溶液；将丝素溶液与pH 7.5‑8.0的缓冲液混合，于35‑37℃水浴中预热5‑10min，加入舍雷肽酶构成酶解体系，35‑37℃水浴振荡酶解完成后，煮沸灭酶活，冷却后离心，取上清液，透析去除Ca2+后，冷冻干燥，获得丝素肽。本发明使用舍雷肽酶水解丝素，具有水解速度快、水解度易控制的优点；(2)酶解制备的丝素肽具有较好的抗氧化活性；(3)本发明具有方法简单、环境友好，易于实现工业化应用的优点。

公开(公告)号：CN110128535A

公开(公告)日：2019-08-16

申请号：CN201910235649.4

申请日：2019-03-27

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 应国清 ,  倪梦梦 ,  梅建凤 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  张彦璐

IPC: C07K16/26 ,  G01N33/74 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明公开了一种AMH单克隆抗体及其制备与应用，所述单克隆抗体是用抗原免疫Balb/c小鼠，通过辛酸-硫酸铵法及Protein G两步纯化获得；所述抗原氨基酸序列为SEQ ID No：3所示，核苷酸序列为SEQ ID No：2所示。本发明的试剂盒灵敏度可达1ng/ml，效价可达1.0×106以上，在国内市场具有一定优势。同时，不需要价格昂贵的仪器设备，降低仪器维修及检测成本，存在试剂交叉污染与样品干扰可能性小，背景信号低，同时环境因素及非特异性反应对检测结果影响不大，具有快速、廉价、简便、灵敏的特点。

公开(公告)号：CN105441504B

公开(公告)日：2018-10-23

申请号：CN201510804386.6

申请日：2015-11-19

Applicant: 浙江工业大学

Inventor： 梅建凤 ,  金航 ,  李靓 ,  王鸿 ,  应国清 ,  易喻 ,  陈建澍 ,  张彦璐

IPC: C12P17/12 ,  C12R1/80

Abstract: 本发明提供了一种环二肽类化合物的制备方法，所述方法是将桔青霉(Penicillium citrinum)MNP12010101接种在含钴离子的发酵培养基中，在25～30℃、200～250r/min恒温振荡条件下培养5～7d后，再在25～30℃下静置4～5d，将培养液分离纯化，获得环(甘‑脯)二肽、环(丙‑脯)二肽、环(异亮‑脯)二肽和环(丙‑缬)二肽化合物；本发明所述培养方法使桔青霉MNP12010101细胞合成了常规培养条件下不能合成的环二肽；培养基组成简单，工艺简单，发酵成本低；桔青霉MNP12010101细胞合成的4种环二肽具有抗肿瘤活性。