长链非编码RNA的测序文库构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN111378720A

    公开(公告)日:2020-07-07

    申请号:CN201910211343.5

    申请日:2019-03-20

    摘要: 本发明公开了长链非编码RNA的测序文库构建方法及其应用。其中,该长链非编码RNA的测序文库构建方法包括:对所述待测样本进行去除rRNA处理,以便得到去除rRNA的产物;基于所述去除rRNA的产物进行逆转录处理,以便得到单链DNA,其中,所述逆转录处理的引物具有SEQ ID NO:1所示的序列;将所述单链DNA进行第一扩增处理,以便得到双链DNA;将所述双链DNA进行片段化处理,以便得到DNA片段;以及将所述DNA片段进行第二扩增处理,所述第二扩增的产物构成所述测序文库。该方法先通过rRNA去除探针去除rRNA,再进行逆转录,避免了大量的rRNA对mRNA和lncRNA逆转录的影响,并且,利用rRNA去除探针去除rRNA,rRNA的去除率高,方法的稳定性好。

    缓冲液组合物及其应用
    7.
    发明公开

    公开(公告)号:CN113026113A

    公开(公告)日:2021-06-25

    申请号:CN201911353778.X

    申请日:2019-12-25

    IPC分类号: C40B50/06

    摘要: 本发明公开了缓冲液组合物及其应用,其中,该缓冲液组合物包括:通用缓冲液,所述通用缓冲液包括5‑25mMol通用Tris缓冲液、5‑20mMol通用二价阳离子、75‑150mMol通用一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mMol二硫苏糖醇(DTT),pH8‑10;以及连接缓冲液,所述连接缓冲液包括33‑66mM连接Tris缓冲液,0.5‑5mM连接二价阳离子、0.5‑10mM二硫苏糖醇(DTT)、5‑15%PEG4000‑8000和0.5‑2mM ATP,pH值为7‑9。由此,该缓冲液组合物能用于多样本的文库构建,并且,反应时间短,转化率高,错配率低。