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公开(公告)号:CN111378720A
公开(公告)日:2020-07-07
申请号:CN201910211343.5
申请日:2019-03-20
申请人: 浙江安诺优达生物科技有限公司 , 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C12Q1/6806 , C12Q1/6869 , C40B50/06
摘要: 本发明公开了长链非编码RNA的测序文库构建方法及其应用。其中,该长链非编码RNA的测序文库构建方法包括:对所述待测样本进行去除rRNA处理,以便得到去除rRNA的产物;基于所述去除rRNA的产物进行逆转录处理,以便得到单链DNA,其中,所述逆转录处理的引物具有SEQ ID NO:1所示的序列;将所述单链DNA进行第一扩增处理,以便得到双链DNA;将所述双链DNA进行片段化处理,以便得到DNA片段;以及将所述DNA片段进行第二扩增处理,所述第二扩增的产物构成所述测序文库。该方法先通过rRNA去除探针去除rRNA,再进行逆转录,避免了大量的rRNA对mRNA和lncRNA逆转录的影响,并且,利用rRNA去除探针去除rRNA,rRNA的去除率高,方法的稳定性好。
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公开(公告)号:CN210656930U
公开(公告)日:2020-06-02
申请号:CN201920353723.8
申请日:2019-03-20
摘要: 本实用新型公开了长链非编码RNA的测序文库构建单元和对长链非编码RNA进行测序的系统。其中,该测序文库构建单元包括:去除rRNA装置、逆转录装置、第一扩增装置、片段化装置和第二扩增装置。该测序文库构建单元的去除rRNA装置先通过rRNA去除探针去除rRNA,再通过逆转录装置进行逆转录,避免了大量的rRNA对mRNA和lncRNA逆转录的影响,并且,利用rRNA去除探针去除rRNA,rRNA的去除率高,单元的稳定性好,尤其适用于微量RNA样本中的rRNA去除,从而,该单元尤其适用于单细胞的文库构建。
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公开(公告)号:CN111334501B
公开(公告)日:2024-03-15
申请号:CN202010173001.1
申请日:2020-03-13
IPC分类号: C12N15/10 , C12Q1/6806 , C12Q1/70
摘要: 本发明公开了一种复合缓冲液。根据本发明的实施例,该复合缓冲液包括:1‑5mM两性离子缓冲液、0.05‑0.5mM非离子螯合剂、0.002‑0.03质量/体积%非离子型表面活性剂,pH=7.0‑8.0。该复合缓冲液适于低浓度核酸的保存,有利于核酸保持良好的稳定性和活性。并且,该复合缓冲液有利于核酸抵抗非低吸附处理耗材,降低核酸之间的交缠,和非特异吸附,尤其适于高通量测序的低浓度核酸样本的保存,能显著降低长期反复冻融对样本活性的影响。
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公开(公告)号:CN113026113B
公开(公告)日:2023-08-29
申请号:CN201911353778.X
申请日:2019-12-25
IPC分类号: C40B50/06
摘要: 本发明公开了缓冲液组合物及其应用,其中,该缓冲液组合物包括:通用缓冲液,所述通用缓冲液包括5‑25mMol通用Tris缓冲液、5‑20mMol通用二价阳离子、75‑150mMol通用一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mMol二硫苏糖醇(DTT),pH8‑10;以及连接缓冲液,所述连接缓冲液包括33‑66mM连接Tris缓冲液,0.5‑5mM连接二价阳离子、0.5‑10mM二硫苏糖醇(DTT)、5‑15%PEG4000‑8000和0.5‑2mM ATP,pH值为7‑9。由此,该缓冲液组合物能用于多样本的文库构建,并且,反应时间短,转化率高,错配率低。
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公开(公告)号:CN111334501A
公开(公告)日:2020-06-26
申请号:CN202010173001.1
申请日:2020-03-13
IPC分类号: C12N15/10 , C12Q1/6806 , C12Q1/70
摘要: 本发明公开了一种复合缓冲液。根据本发明的实施例,该复合缓冲液包括:1-5mM两性离子缓冲液、0.05-0.5mM非离子螯合剂、0.002-0.03质量/体积%非离子型表面活性剂,pH=7.0-8.0。该复合缓冲液适于低浓度核酸的保存,有利于核酸保持良好的稳定性和活性。并且,该复合缓冲液有利于核酸抵抗非低吸附处理耗材,降低核酸之间的交缠,和非特异吸附,尤其适于高通量测序的低浓度核酸样本的保存,能显著降低长期反复冻融对样本活性的影响。
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公开(公告)号:CN114182359A
公开(公告)日:2022-03-15
申请号:CN202010958417.4
申请日:2020-09-14
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
摘要: 本发明公开了一种文库构建方法及试剂盒。其中,该方法包括对dsDNA片段进行末端修复及3'端加A反应,获得加A产物;将加A产物与接头连接,获得连接产物;其中,末端修复及加A反应缓冲液含有8‑12mM Tris‑HCl、1‑2mM MgCl2和45‑55mM KCl,且pH值为8‑10。该方法简化了建库流程,降低了反应时间,并且,建库所述样本量低。
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公开(公告)号:CN113026113A
公开(公告)日:2021-06-25
申请号:CN201911353778.X
申请日:2019-12-25
申请人: 安诺优达基因科技(北京)有限公司
IPC分类号: C40B50/06
摘要: 本发明公开了缓冲液组合物及其应用,其中,该缓冲液组合物包括:通用缓冲液,所述通用缓冲液包括5‑25mMol通用Tris缓冲液、5‑20mMol通用二价阳离子、75‑150mMol通用一价阳离子、0.05‑2质量%表面活性剂和0.5‑2mMol二硫苏糖醇(DTT),pH8‑10;以及连接缓冲液,所述连接缓冲液包括33‑66mM连接Tris缓冲液,0.5‑5mM连接二价阳离子、0.5‑10mM二硫苏糖醇(DTT)、5‑15%PEG4000‑8000和0.5‑2mM ATP,pH值为7‑9。由此,该缓冲液组合物能用于多样本的文库构建,并且,反应时间短,转化率高,错配率低。
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