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公开(公告)号：CN102212578B
公开(公告)日：2014-01-29
申请号：CN201110109007.3
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成果糖棕榈酸酯的方法，包括：将果糖和棕榈酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得果糖棕榈酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS 115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成果糖棕榈酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN103315137A
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201310231331.1
申请日：2013-06-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种生物转化油菜茎叶和油菜籽饼粕制备饲料用复合酶兼益生菌制剂的方法，包括：将经渥堆发酵的普洱熟茶、香菇菌棒、茶树菇菌棒、第一油菜茎叶、第一油菜籽饼粕、第一麦麸、第一苹果渣和第一水充分混合，经驯化培养后形成发酵剂；将发酵剂、第二油菜茎叶、第二油菜籽饼粕、第二麦麸、第二苹果渣和第二水充分混合，经发酵后，得到饲料用复合酶兼益生菌制剂。本发明中，利用微生态稳定的食品级安全菌群来发酵油菜茎叶和油菜籽饼粕制备各项性能指标较好的饲料用复合酶兼益生菌制剂，实现油菜茎叶和油菜籽饼粕的低成本高效生物转化。同时，本发明方法，微生物易生长，酶活力高，发酵过程粗放，易于工业化大规模生产。
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公开(公告)号：CN103315131A
公开(公告)日：2013-09-25
申请号：CN201310231020.5
申请日：2013-06-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种生物转化西兰花根茎和大豆饼粕制备饲料用复合酶兼益生菌制剂的方法，包括：将经渥堆发酵的普洱熟茶、香菇菌棒、茶树菇菌棒、第一西兰花根茎、第一大豆饼粕、第一麦麸、第一苹果渣和第一水充分混合，经驯化培养后形成发酵剂；将发酵剂、第二西兰花根茎、第二大豆饼粕、第二麦麸、第二苹果渣和第二水充分混合，经发酵后，得到饲料用复合酶兼益生菌制剂。本发明中，利用微生态稳定的食品级安全菌群来发酵西兰花根茎和大豆饼粕制备各项性能指标较好的饲料用复合酶兼益生菌制剂，实现西兰花根茎和大豆饼粕的低成本高效生物转化。同时，本发明方法，微生物易生长，酶活力高，发酵过程粗放，不需严格无菌条件，易于工业化大规模生产。
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公开(公告)号：CN103300215A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310232483.3
申请日：2013-06-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种生物转化豌豆茎叶和棕榈饼粕制备饲料用复合酶兼益生菌制剂的方法，包括：将经渥堆发酵的普洱熟茶、香菇菌棒、茶树菇菌棒、第一豌豆茎叶、第一棕榈饼粕、第一麦麸、第一苹果渣和第一水充分混合，经驯化培养后形成发酵剂；将发酵剂、第二豌豆茎叶、第二棕榈饼粕、第二麦麸、第二苹果渣和第二水充分混合，经发酵后，得到饲料用复合酶兼益生菌制剂。本发明中，利用微生态稳定的食品级安全菌群来发酵豌豆茎叶和棕榈饼粕制备各项性能指标较好的饲料用复合酶兼益生菌制剂，实现豌豆茎叶和棕榈饼粕的低成本高效生物转化。同时，本发明方法，微生物易生长，酶活力高，发酵过程粗放，易于工业化大规模生产。
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公开(公告)号：CN103300210A
公开(公告)日：2013-09-18
申请号：CN201310229627.X
申请日：2013-06-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种生物转化芦苇和花生饼粕制备饲料用复合酶兼益生菌制剂的方法，包括：将经渥堆发酵的普洱熟茶、香菇菌棒、茶树菇菌棒、第一芦苇、第一花生饼粕、第一麦麸、第一苹果渣和第一水充分混合，经驯化培养后形成发酵剂；将发酵剂、第二芦苇、第二花生饼粕、第二麦麸、第二苹果渣和第二水充分混合，经发酵后，得到饲料用复合酶兼益生菌制剂。本发明中，利用微生态稳定的食品级安全菌群来发酵芦苇和花生饼粕制备各项性能指标较好的饲料用复合酶兼益生菌制剂，实现芦苇和花生饼粕的低成本高效生物转化。同时，本发明方法，微生物易生长，酶活力高，发酵过程粗放，易于工业化大规模生产。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102212601B
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201110110428.8
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的方法，包括：将维生素A醋酸酯和棕榈酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，无氧条件下于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得维生素A棕榈酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成维生素A棕榈酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN102517224A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110446673.6
申请日：2011-12-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表面展示纤维素酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用。该重组酿酒酵母的构建方法为：将纤维素酶基因插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间，构建获得重组质粒；采用同源重组技术将酿酒酵母的GAL1基因替换为GAL4基因，将所述重组质粒转入该细胞，获得重组酿酒酵母。本发明通过同源重组技术获得了具有双重GAL4基因的重组酿酒酵母，可有效提高GAL1启动子表达效率；同时，细胞壁α凝集素能将纤维素酶高密度展示表达在酿酒酵母细胞壁外表面。利用该重组酿酒酵母表面展示纤维素酶，表达效率较高，表达量较大，能获得较高酶活的纤维素酶，且酵母发酵培养后可直接作为纤维素酶制剂使用。
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公开(公告)号：CN102242107A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201010171804.X
申请日：2010-05-14
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明的一种提高亚油酸异构酶活力持续性的方法，包括以下步骤：将亚油酸异构酶基因(Genbank号：DQ227322)连接在酿酒酵母细胞壁成份α凝集素序列(Genbank号：M28164)的N端，然后插入酿酒酵母表达载体GAL1启动子(Genbank号：AY428072)下游MFα1信号肽序列(Genbank号：M17301)的C端，构建成表达框，表达框从N端到C端：GAL1启动子+MFα1信号肽序列+亚油酸异构酶基因+α凝集素序列；将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞。本发明的优点：将亚油酸异构酶展露表达在酿酒酵母细胞壁外表面，实现酶与细胞外底物的完全接触，从而显著提高亚油酸异构酶活力持续性。
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公开(公告)号：CN102242105A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201010171773.8
申请日：2010-05-14
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明的一种提高谷氨酸脱羧酶活性的方法，包括以下步骤：将谷氨酸脱羧酶基因(Genbank号：NM_168056)连接在酿酒酵母细胞壁成份α凝集素序列(Genbank号：M28164)的N端，然后插入酿酒酵母表达载体GAL1启动子(Genbank号：AY428072)下游MFα1信号肽序列(Genbank号：M17301)的C端，构建成表达框，表达框从N端到C端：GAL1启动子+MFα1信号肽序列+谷氨酸脱羧酶基因+α凝集素序列；将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞。本发明的优点：将谷氨酸脱羧酶展露表达在酿酒酵母细胞壁外表面，实现酶与细胞外底物的完全接触，从而显著提高谷氨酸脱羧酶活性。
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公开(公告)号：CN102212592A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110108793.5
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成麦芽糖月桂酸酯的方法，包括：将麦芽糖和月桂酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得麦芽糖月桂酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成麦芽糖月桂酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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