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公开(公告)号：CN114350684B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202210090612.9
申请日：2022-01-24
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了一种苹果MdERF‑073基因、蛋白及应用所述MdERF‑073基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。将该基因导入目的植物，得到转基因植物，发现过表达基因MdERF‑073能够增强对ABA以及PEG的耐受力。在相同逆境处理下转基因植物，发现该转基因植物的对ABA和PEG的耐受力均比野生植株强。这说明MdERF‑073基因可用于调节植物抗逆性，并且本发明对于植物育种具有重大的应用价值。
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公开(公告)号：CN114703200A
公开(公告)日：2022-07-05
申请号：CN202210462311.4
申请日：2022-04-26
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苹果耐旱负调控基因MdbHLH108及其应用，所述苹果基因MdbHLH108的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明通过植物基因工程技术，从平邑甜茶实生苗中分离克隆出抗性相关基因MdbHLH108完整编码区段的DNA片段，并验证了该基因的功能，发现采用超量表达之后转基因材料抗旱性降低，并且对ABA敏感性明显提高，说明基因MdbHLH108在干旱中起到负调控的作用，该负调控因子有潜力应用于基因编辑培育抗旱新品种，并且对苹果抗旱定向遗传改良和砧木选育有重要意义。
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公开(公告)号：CN114395022A
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202210105876.7
申请日：2022-01-27
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/415 , C12N15/29 , C12N15/84 , A01H5/08 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了一种苹果锌指蛋白转录因子MdZF‑HD11及在调控果实成熟软化中的应用，分析了该基因在不同处理苹果果实采后贮藏过程中的表达模式，利用瞬时过表达和VIGS技术验证MdZF‑HD11基因在苹果果实后熟软化中的作用，发现过表达MdZF‑HD11基因的苹果果实与对照果实相比，乙烯释放显著升高，硬度显著降低，果实颜色明显变黄；而沉默MdZF‑HD11基因的苹果果实乙烯释放显著降低，果实颜色偏青。说明该基因可以调控苹果果实后熟软化，对培育耐贮运的苹果新品种具有积极的指导作用。
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公开(公告)号：CN114214348A
公开(公告)日：2022-03-22
申请号：CN202111354374.X
申请日：2021-11-16
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/70 , C12N15/55 , C12N15/10 , C12N9/22 , C12Q1/6816
Abstract: 本发明属于蛋白功能领域，涉及CRISPR‑Cas系统，特别是指一种用于核酸检测的LbCas12a‑5M突变体蛋白及其制备方法和应用。研究构建了LbCas12a的D156R/G532R/K538V/Y542R/K595R变体，评估蛋白的乱切活性在核酸检测中PAM序列的偏好性以及检测效率方面是否优于野生型蛋白。同时，结合荧光可视化方法，开发出一套可以识别非常规PAM序列的核酸检测系统，进一步优化并扩大了Crispr/LbCas12a核酸诊断系统的应用。
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公开(公告)号：CN114107526A
公开(公告)日：2022-03-01
申请号：CN202111440174.6
申请日：2021-11-30
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于病原微生物的快速检测领域，特别是指一种检测西瓜嗜酸菌（Acidovorax citrulli）的RPA引物对和crRNA及其试剂盒和使用方法。所述RPA引物对序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示，crRNA靶标序列如SEQ ID No.3所示。本发明将采用Crispr/LbCas12a核酸检测平台，针对西瓜嗜酸菌（Acidovorax citrulli）的基因组设计特异性检测位点，并结合荧光可视化技术，开发出适合检测此类病原菌的简易性诊断方法。同时结合RPA等温扩增技术，进一步提高灵敏度。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114561404B
公开(公告)日：2023-06-16
申请号：CN202210436357.9
申请日：2022-04-20
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苹果MdSHN1基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明从耐涝苹果砧木平邑甜茶叶片中克隆得到MdSHN1基因cDNA全长序列，还公开了扩增所述的苹果MdSHN1基因的引物，并确定了该基因的氨基酸序列。通过拟南芥转基因功能验证分析发现，MdSHN1基因在提高植株的抗性方面具有显著效果，提高了转基因植株的抗逆境能力，尤其是和野生型相比，在淹水胁迫下，转基因植株的耐受性强于野生型，可见，MdSHN1基因跟耐涝有关，能够提高植株的耐涝性，对于苹果新品种的选育具有重要意义。
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公开(公告)号：CN115960866A
公开(公告)日：2023-04-14
申请号：CN202310014122.5
申请日：2023-01-05
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6895 , C12Q1/6816 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于基因编辑领域，涉及Cas12a蛋白，特别是指一种Mb2Cas12a‑RRVRR突变体蛋白及其制备方法和应用。本研究首次对16种Cas12a蛋白进行了评价，特别是它们在较低温度下的切割活性进行了评估。发现来自Moraxella bovoculi 57922菌株的Mb2Cas12a蛋白活性比其他蛋白更强。此外，本申请在Mb2Cas12a蛋白中引入了5个突变，从而创制Mb2Cas12a‑RRVRR变体蛋白，它具有更广泛的PAMs范围和更强的活性。综上所述，基于CRISPR/Mb2Cas12a‑RRVRR变体的新型检测工具增强了CRISPR技术的诊断能力，有潜力取代现有的Cas12a蛋白。
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公开(公告)号：CN110567951A
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201910886954.X
申请日：2019-09-19
Applicant: 河南农业大学
IPC: G01N21/78 , C12Q1/70 , C12Q1/686 , C12Q1/6809 , C12Q1/6811
Abstract: 本发明属于分子生物学领域，涉及基于CRISPR-Cas12a技术的苹果茎沟病毒可视化检测体系及其检测方法。根据ASGV保守序列设计出crRNA，并制作用于比色检测的AuNP-DNA，探究Cas12a蛋白体外切割反应时间和linker DNA浓度对检测效果的影响，建立最佳ASGV可视化检测体系及检测方法，该方法为恒温反应条件，并通过CRISPR-Cas12a-crRNA复合体识别病毒来提高特异性，且linker DNA具有通用性，不需要昂贵的双标记探针，借助低速离心可在40 min内检测多个样本，其检测下限为5.62×102copies/反应，灵敏度比RT-PCR高100倍。
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公开(公告)号：CN110241266A
公开(公告)日：2019-09-17
申请号：CN201910700918.X
申请日：2019-07-31
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明涉及病毒的快速检测领域，特别是指一种检测苹果茎沟病的RPA引物对、探针及试剂盒和使用方法。所述RPA引物对序列如SEQ ID NO.1、SEQ ID NO.2所示，探针序列如SEQ ID NO.3所示。所述试剂盒的反应体系包括25μL预混液Buffer A、10μL预混液Buffer B、7.5μL引物及探针预混液Buffer C和2.5μL 10μM醋酸镁。与RT-PCR、RPA检测方法相比本申请的RPA-LFD的灵敏度最高为0.3fg·μL-1，比RT-PCR高1000倍，比RPA（琼脂糖凝胶电泳）灵敏度高10倍，三种方法检出率一致性较高，结果可靠。
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公开(公告)号：CN115960866B
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202310014122.5
申请日：2023-01-05
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6895 , C12Q1/6816 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于基因编辑领域，涉及Cas12a蛋白，特别是指一种Mb2Cas12a‑RRVRR突变体蛋白及其制备方法和应用。本研究首次对16种Cas12a蛋白进行了评价，特别是它们在较低温度下的切割活性进行了评估。发现来自Moraxella bovoculi 57922菌株的Mb2Cas12a蛋白活性比其他蛋白更强。此外，本申请在Mb2Cas12a蛋白中引入了5个突变，从而创制Mb2Cas12a‑RRVRR变体蛋白，它具有更广泛的PAMs范围和更强的活性。综上所述，基于CRISPR/Mb2Cas12a‑RRVRR变体的新型检测工具增强了CRISPR技术的诊断能力，有潜力取代现有的Cas12a蛋白。
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