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公开(公告)号:CN118127060A
公开(公告)日:2024-06-04
申请号:CN202311843393.8
申请日:2023-12-29
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/82 , C07K14/415 , C12N15/29 , A01H5/00 , A01H6/74
Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及苹果防御素基因,特别是指一种苹果防御素基因、蛋白质和表达载体在防治腐皮镰刀菌中的应用。本申请通过对接种了腐皮镰刀菌的苹果幼树的生理指标进行检测,鉴定了25个苹果防御素基因在整个苹果基因组中的结构和蛋白质保护模式,并结合启动子元件、基因表达和q‑PCR分析,进行了叶片转化,并通过稳定遗传验证了防御素的抗性。寻找对F.solani具有抗性的防御素基因,以提高苹果幼树对再植病害的抗性。
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公开(公告)号:CN114703200B
公开(公告)日:2023-06-16
申请号:CN202210462311.4
申请日:2022-04-26
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苹果耐旱负调控基因MdbHLH108及其应用,所述苹果基因MdbHLH108的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明通过植物基因工程技术,从平邑甜茶实生苗中分离克隆出抗性相关基因MdbHLH108完整编码区段的DNA片段,并验证了该基因的功能,发现采用超量表达之后转基因材料抗旱性降低,并且对ABA敏感性明显提高,说明基因MdbHLH108在干旱中起到负调控的作用,该负调控因子有潜力应用于基因编辑培育抗旱新品种,并且对苹果抗旱定向遗传改良和砧木选育有重要意义。
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公开(公告)号:CN114457097A
公开(公告)日:2022-05-10
申请号:CN202111617913.4
申请日:2021-12-27
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苹果β‑半乳糖苷酶基因Mdβ‑gal18及在调控果实成熟软化中的应用,分析了该基因在不同处理苹果果实采后贮藏过程中的表达模式,利用瞬时过表达和VIGS技术验证Mdβ‑gal18基因在苹果果实后熟软化中的作用,发现过表达Mdβ‑gal18基因的苹果果实与对照果实相比,乙烯释放显著升高,硬度显著降低,果实颜色明显变黄;而沉默Mdβ‑gal18基因的苹果果实乙烯释放显著降低,果实颜色偏青。说明该基因可以调控苹果果实后熟软化,对培育耐贮运的苹果新品种具有积极的指导作用。
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公开(公告)号:CN115960866B
公开(公告)日:2025-04-25
申请号:CN202310014122.5
申请日:2023-01-05
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6895 , C12Q1/6816 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于基因编辑领域,涉及Cas12a蛋白,特别是指一种Mb2Cas12a‑RRVRR突变体蛋白及其制备方法和应用。本研究首次对16种Cas12a蛋白进行了评价,特别是它们在较低温度下的切割活性进行了评估。发现来自Moraxella bovoculi 57922菌株的Mb2Cas12a蛋白活性比其他蛋白更强。此外,本申请在Mb2Cas12a蛋白中引入了5个突变,从而创制Mb2Cas12a‑RRVRR变体蛋白,它具有更广泛的PAMs范围和更强的活性。综上所述,基于CRISPR/Mb2Cas12a‑RRVRR变体的新型检测工具增强了CRISPR技术的诊断能力,有潜力取代现有的Cas12a蛋白。
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公开(公告)号:CN114107526B
公开(公告)日:2024-04-16
申请号:CN202111440174.6
申请日:2021-11-30
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12N15/113 , C12N15/11 , C12R1/01
Abstract: 本发明属于病原微生物的快速检测领域,特别是指一种检测西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)的RPA引物对和crRNA及其试剂盒和使用方法。所述RPA引物对序列如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示,crRNA靶标序列如SEQ ID No.3所示。本发明将采用Crispr/LbCas12a核酸检测平台,针对西瓜嗜酸菌(Acidovorax citrulli)的基因组设计特异性检测位点,并结合荧光可视化技术,开发出适合检测此类病原菌的简易性诊断方法。同时结合RPA等温扩增技术,进一步提高灵敏度。
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公开(公告)号:CN114438096B
公开(公告)日:2023-06-16
申请号:CN202210090531.9
申请日:2022-01-21
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N15/29 , C07K14/415 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H6/74
Abstract: 本发明公开了一种苹果抗性相关基因MdERF‑049、蛋白及用途,所述MdERF‑049基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。将该基因导入目的植物,得到转基因植物,发现过表达基因MdERF‑049能够增强植物的抗旱性,增强对ABA的耐受力。在相同逆境处理下转基因植物,发现该转基因植物的抗旱性和对ABA的耐受力均比野生植株强。这说明MdERF‑049基因可用于调节植物抗逆性,并且本发明对于植物育种具有重大的应用价值。
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公开(公告)号:CN111440892A
公开(公告)日:2020-07-24
申请号:CN202010510441.1
申请日:2020-06-08
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种与苹果柱状树形基因紧密连锁的分子标记及应用,利用本发明中的分子标记引物,可在幼苗期时对柱型与普通型苹果的杂交群体后代中进行分子标记的辅助选择,能够有效的克服1~2年生的柱状苹果杂交群体后代中柱状苹果树与普通型苹果树在幼苗期形态学不易鉴定的缺点,并且这种方法快速,简单,准确,可以在一定程度上提高育种效率,加速育种工作的进程。
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公开(公告)号:CN110567951B
公开(公告)日:2020-06-02
申请号:CN201910886954.X
申请日:2019-09-19
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12Q1/70
Abstract: 本发明属于分子生物学领域,涉及基于CRISPR‑Cas12a技术的苹果茎沟病毒可视化检测体系及其检测方法。根据ASGV保守序列设计出crRNA,并制作用于比色检测的AuNP‑DNA,探究Cas12a蛋白体外切割反应时间和linker DNA浓度对检测效果的影响,建立最佳ASGV可视化检测体系及检测方法,该方法为恒温反应条件,并通过CRISPR‑Cas12a‑crRNA复合体识别病毒来提高特异性,且linker DNA具有通用性,不需要昂贵的双标记探针,借助低速离心可在40 min内检测多个样本,其检测下限为5.62×102copies/反应,灵敏度比RT‑PCR高100倍。
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公开(公告)号:CN114561404B
公开(公告)日:2023-06-16
申请号:CN202210436357.9
申请日:2022-04-20
Applicant: 河南农业大学
Abstract: 本发明公开了一种苹果MdSHN1基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。本发明从耐涝苹果砧木平邑甜茶叶片中克隆得到MdSHN1基因cDNA全长序列,还公开了扩增所述的苹果MdSHN1基因的引物,并确定了该基因的氨基酸序列。通过拟南芥转基因功能验证分析发现,MdSHN1基因在提高植株的抗性方面具有显著效果,提高了转基因植株的抗逆境能力,尤其是和野生型相比,在淹水胁迫下,转基因植株的耐受性强于野生型,可见,MdSHN1基因跟耐涝有关,能够提高植株的耐涝性,对于苹果新品种的选育具有重要意义。
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公开(公告)号:CN115960866A
公开(公告)日:2023-04-14
申请号:CN202310014122.5
申请日:2023-01-05
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N9/22 , C12N15/55 , C12N15/70 , C12Q1/6895 , C12Q1/6816 , C12R1/19
Abstract: 本发明属于基因编辑领域,涉及Cas12a蛋白,特别是指一种Mb2Cas12a‑RRVRR突变体蛋白及其制备方法和应用。本研究首次对16种Cas12a蛋白进行了评价,特别是它们在较低温度下的切割活性进行了评估。发现来自Moraxella bovoculi 57922菌株的Mb2Cas12a蛋白活性比其他蛋白更强。此外,本申请在Mb2Cas12a蛋白中引入了5个突变,从而创制Mb2Cas12a‑RRVRR变体蛋白,它具有更广泛的PAMs范围和更强的活性。综上所述,基于CRISPR/Mb2Cas12a‑RRVRR变体的新型检测工具增强了CRISPR技术的诊断能力,有潜力取代现有的Cas12a蛋白。
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