公开(公告)号：CN114807197A

公开(公告)日：2022-07-29

申请号：CN202210329228.X

申请日：2022-03-31

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 李营 ,  强昕 ,  贾芝琪 ,  胡建斌 ,  李丽丽 ,  李琼 ,  丁飞 ,  夏少颖 ,  陈斌 ,  高艳娜 ,  张世文 ,  马长生 ,  孙守如

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/84 ,  C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82 ,  A01H4/00 ,  A01G31/00

Abstract: 本发明公开了一种通过基因编辑创制番茄矮化材料的方法及其应用，通过基因编辑创制番茄矮化材料的方法可用于番茄株型的培育中；通过基因编辑创制番茄矮化材料的方法先通过重组载体的构建：包括gRNA靶位点的选择和重组质粒SlABIG1‑CP098的构建；然后番茄转化：以番茄子叶为外植体，用阳性农杆菌GV3101介导番茄转化，经过卡那霉素抗性筛选，获得T0代转基因番茄，纯合编辑植株，即为番茄矮化材料；并进行T0代转SlABIG1基因番茄DNA水平的鉴定和转SlABIG1基因纯系番茄的表型鉴定；本发明得到的番茄植株具有可高密度种植、充分利用空间和土地，增强光合效率，低耗水率，抗倒伏的优点；具有重要的应用价值。

公开(公告)号：CN119082175A

公开(公告)日：2024-12-06

申请号：CN202411240080.8

申请日：2024-09-05

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 李翔 ,  曹晨晨 ,  刘颖 ,  胡建斌 ,  李琼 ,  毛文文 ,  侯娟 ,  李丽丽 ,  王盼乔

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  A01H5/06 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了在甜瓜毛状根中验证CRISPR或Cas9载体活性及基因功能的方法，使用萌发两天的甜瓜种子的子叶作为外植体，利用发根农杆菌K599进行侵染，经过共培养，毛状根诱导，以绿色荧光蛋白eGFP作为转基因毛状根的筛选标记，可在1个月左右获得转化CRISPR/Cas9载体的毛状根。利用该转化材料，我们分析了多个基因的基因编辑靶位点的可用性，发现增加sgRNA表达单元拷贝数对于基因编辑效率具有促进作用，并且我们发现CmRHL1被编辑后，甜瓜根毛不能形成。因此，本发明为验证CRISPR/Cas9载体活性以及研究基因在根发育过程中的功能，提供了一种方便、快捷的途径，对于甜瓜的稳定遗传转化方法是一个有利补充。

公开(公告)号：CN116355951A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202211453013.5

申请日：2022-11-21

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 侯娟 ,  王际宇 ,  李琼 ,  胡建斌 ,  李翔 ,  李丽丽 ,  王盼乔 ,  毛文文 ,  王瑞丹 ,  周云新 ,  王瑜

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/53 ,  A01H5/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了一种基于芽真空侵染的甜瓜VIGS沉默体系的构建方法，选择pTRSV2为重组载体，去除种皮的芽萌发长度1‑2cm的甜瓜种子为受体材料，以体积比1：1的辅助载体pTRSV1与pTRSV2‑目的基因重组载体的混合菌液进行真空侵染，侵染条件为：侵染压强为0.9kPa、菌液浓度OD600=1.0、侵染时间5min。同时，我们以甜瓜八氢番茄红素脱氢酶基因CmPDS为例，对本发明体系进行了应用验证，结果显示该沉默体系可显著降低甜瓜中CmPDS的表达量，植株沉默率为85%。相对于子叶注射法，甜瓜芽真空侵染法时效更快，一般在侵染后1周一叶一心时期就可快速显现沉默表型，有利于在苗期快速挖掘和研究甜瓜重要农艺性状相关基因，该沉默体系也克服了甜瓜遗传转化体系不成熟、效率低、周期长的不足。

公开(公告)号：CN114703198A

公开(公告)日：2022-07-05

申请号：CN202210317796.8

申请日：2022-03-29

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 李营 ,  陈斌 ,  贾芝琪 ,  胡建斌 ,  李丽丽 ,  李琼 ,  丁飞 ,  夏少颖 ,  强昕 ,  高艳娜 ,  张世文 ,  马长生 ,  孙守如

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/84 ,  C07K14/415 ,  A01H4/00 ,  A01H5/00 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明公开了一种番茄转运蛋白SlZIF1的克隆及其应用，番茄转运蛋白SlZIF1的克隆可用于番茄果穗和株型调控中；番茄转运蛋白SlZIF1的克隆先通过SIZIF1基因的获得及超表达SIZIF1‑PRI101载体构建；再进行T0代番茄植株遗传转化与获得；经过转基因植株的鉴定，并通过试验结果表明超量表达材料除了在植株顶部有果穗，在植株下部真叶之间新增果穗；而野生型番茄MT只在植株顶部有番茄果穗，在植株下部无果穗；本发明超表达SIZIF1具有增加番茄产量的潜质，能形成更加合理地株型，具有重大的应用价值。

公开(公告)号：CN119876183A

公开(公告)日：2025-04-25

申请号：CN202510252238.1

申请日：2025-03-04

Applicant: 河南农业大学 ,  开封市农林科学研究院

Inventor： 胡建斌 ,  张修月 ,  李丽丽 ,  于玉红 ,  赵津禾 ,  孟晴 ,  李翔 ,  侯娟 ,  毛文文 ,  侯晟灿 ,  张琳 ,  罗晓丹

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了一种CmCAX5基因在提高甜瓜耐冷性中的应用。在甜瓜中过表达CmCAX5基因后甜瓜幼苗耐冷性增强，沉默CmCAX5基因后甜瓜幼苗耐冷性降低，说明该基因能够正向调控甜瓜苗期的耐冷性，是甜瓜耐冷性遗传改良中的重要候选基因，对于培育耐冷甜瓜品种具有一定的应用价值。

公开(公告)号：CN118109625B

公开(公告)日：2025-02-25

申请号：CN202410049387.3

申请日：2024-01-12

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 王盼乔 ,  胡建斌 ,  强军豪 ,  杜烜宇 ,  梁晓雪 ,  侯娟 ,  李翔 ,  毛文文 ,  李丽丽 ,  牛旭旭

IPC: C12Q1/6895 ,  C12Q1/6858 ,  C12N15/11 ,  C12N15/29

Abstract: 本发明提供了一种与甜瓜果肉厚度共分离的InDel分子标记及应用。所述InDel分子标记由SEQ ID NO:1所示的上游引物CmFpt‑F和SEQ ID NO:2所示的下游引物CmFpt‑R扩增得到。该分子标记引物不仅在自然群体中与果肉厚度性状共分离，在不同育种材料中，其扩增带型也与果肉厚度表型一致。基于InDel分子标记设计的引物对及其试剂盒可以在出芽期或苗期开展甜瓜果肉厚度性状筛选。因此，本发明提供的分子标记、引物对及试剂盒等可直接用于甜瓜分子标记辅助育种，降低种植大群体的生产成本，加速育种进程，提高育种效率，具有重要的应用价值；同时能提高选择的准确性、加快品种培育的进程。

公开(公告)号：CN118979043A

公开(公告)日：2024-11-19

申请号：CN202410293919.8

申请日：2024-03-14

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 侯娟 ,  王际宇 ,  李琼 ,  胡建斌 ,  王瑜 ,  曹磊 ,  梁晓雪 ,  毛文文 ,  李翔 ,  李丽丽 ,  王盼乔 ,  陈莹莹

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/83 ,  C12N15/84 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00 ,  A01H6/34 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了甜瓜ERF家族转录因子CmERF60基因、其编码蛋白和影响甜瓜苗期耐冷性的应用，所述CmERF60基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，并分析了该基因在甜瓜耐冷材料“H581”与甜瓜冷敏感材料“H906”在不同冷处理时间的表达量以及在相应植株中不同组织的表达模式。本发明通过在甜瓜苗期子叶中瞬时过表达CmERF60基因，发现能够提高过表达植株清除活性氧的能力从而提高苗期耐寒性，同时通过VIGS沉默CmERF60基因，对沉默植株与阴性对照进行冷处理，通过对比冷处理前后沉默植株与阴性对照之间的耐冷性表型差异，离子渗透量以及冷处理恢复后植株的最大光和效率，明确CmERF60基因能够正调控甜瓜苗期的耐冷性。

公开(公告)号：CN116970638A

公开(公告)日：2023-10-31

申请号：CN202310810474.1

申请日：2023-07-03

Applicant: 河南农业大学 ,  河南七度农业科技有限公司

Inventor： 李营 ,  李纪锁 ,  李丽丽 ,  贾芝琪 ,  李国文 ,  高艳娜 ,  张世文 ,  安光辉 ,  胡建斌 ,  张泳鑫 ,  孙守如 ,  李继德

IPC: C12N15/82 ,  C12N15/29 ,  C12N15/113 ,  C12N15/55 ,  A01H5/08 ,  A01H6/82

Abstract: 本发明公开了一种敲除番茄SlZF3基因的表达在提高番茄产量中的应用，所述SlZF3基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明以番茄为研究对象，构建了基于CRISPR/Cas9技术的番茄SlZF3基因敲除载体，通过对两个突变株系的表型鉴定，发现该基因的敲除会导致番茄果实的数量以及单株产量提高；该发明为番茄高产分子育种提供基因资源。

公开(公告)号：CN116179574A

公开(公告)日：2023-05-30

申请号：CN202211480233.7

申请日：2022-11-23

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 胡建斌 ,  李营 ,  李丽丽 ,  王际宇 ,  张修月 ,  王盼乔 ,  侯娟 ,  李翔 ,  毛文文 ,  李琼 ,  杨路明 ,  孙守如

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H5/08 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了CmEAF7基因在提高甜瓜耐冷性和/或果实品质中的应用，所述CmEAF7基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述提高甜瓜果实品质表现为甜瓜果实中蔗糖与果糖含量提高。本发明通过沉默CmEAF7基因，对沉默植株与阴性对照进行冷处理，通过对比冷处理前后沉默植株与阴性对照之间的耐冷性表型差异以及离子渗透量的变化，明确CmEAF7基因能够正调控甜瓜苗期的耐冷性；另外，过表达CmEAF7基因能够提高甜瓜果实中果糖和蔗糖含量，相反沉默CmEAF7基因能够降低甜瓜果实中果糖和蔗糖含量，可见CmEAF7基因在提高甜瓜耐冷性和/或果实中果糖和蔗糖含量中起着重要的作用，在甜瓜耐低温与高品质协同改良中具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN114634995A

公开(公告)日：2022-06-17

申请号：CN202210492268.6

申请日：2022-05-07

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 胡建斌 ,  李丽丽 ,  李琼 ,  侯娟 ,  李文龙 ,  王盼乔 ,  李翔 ,  杨路明 ,  朱华玉

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11 ,  C12Q1/6869 ,  A01H1/00 ,  A01H1/02 ,  A01H1/04

Abstract: 本发明公开了一种甜瓜耐冷QTL及其连锁的分子标记的方法与应用，以甜瓜耐冷材料PI‑169329为母本，冷敏感材料20KH.111为父本，构建F2及F2:3群体，分别获得实验室和田间条件下亲本及F2:3群体在冷胁迫后的冷害指数，利用1090个bin标记构建的高密度遗传图谱，进行耐冷QTL定位，最终获得甜瓜耐冷QTL及其连锁分子标记。本发明利用甜瓜材料PI‑169329和20KH.111的F2群体构建的高密度遗传图谱，结合两年田间和实验室的F2:3群体在冷胁迫后的冷害指数数据，最终鉴定出两个甜瓜耐冷主效QTL。依据两个耐冷主效QTL紧密连锁的分子标记，能够在DNA水平上对分离群体的耐冷性进行选择，为甜瓜耐冷分子育种提供位点信息和标记资源。