公开(公告)号：CN116179574B

公开(公告)日：2025-04-18

申请号：CN202211480233.7

申请日：2022-11-23

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 胡建斌 ,  李营 ,  李丽丽 ,  王际宇 ,  张修月 ,  王盼乔 ,  侯娟 ,  李翔 ,  毛文文 ,  李琼 ,  杨路明 ,  孙守如

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H5/08 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了CmEAF7基因在提高甜瓜耐冷性和/或果实品质中的应用，所述CmEAF7基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述提高甜瓜果实品质为甜瓜果实中蔗糖与果糖含量提高。本发明通过沉默CmEAF7基因，通过对比冷处理前后沉默植株与阴性对照之间的耐冷性表型差异以及离子渗透量的变化，明确CmEAF7基因能够正调控甜瓜苗期的耐冷性；另外，过表达CmEAF7基因能够提高甜瓜果实中果糖和蔗糖含量，相反沉默CmEAF7基因能够降低甜瓜果实中果糖和蔗糖含量，可见CmEAF7基因在提高甜瓜耐冷性和/或果实中果糖和蔗糖含量起着重要作用，在甜瓜耐低温与高品质协同改良中具有潜在的应用价值。

公开(公告)号：CN116355951B

公开(公告)日：2023-12-15

申请号：CN202211453013.5

申请日：2022-11-21

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 侯娟 ,  王际宇 ,  李琼 ,  胡建斌 ,  李翔 ,  李丽丽 ,  王盼乔 ,  毛文文 ,  王瑞丹 ,  周云新 ,  王瑜

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/53 ,  A01H5/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了一种基于芽真空侵染的甜瓜VIGS沉默体系的构建方法，选择pTRSV2为重组载体，去除种皮的芽萌发长度1‑2cm的甜瓜种子为受体材料，以体积比1：1的辅助载体pTRSV1与pTRSV2‑目的基因重组载体的混合菌液进行真空侵染，侵染条件为：侵染压强为0.9kPa、菌液浓度OD600=1.0、侵染时间5min。同时，我们以甜瓜八氢番茄红素脱氢酶基因CmPDS为例，对本发明体系进行了应用验证，结果显示该沉默体系可显著降低甜瓜中CmPDS的表达量，植株沉默率为85%。相对于子叶注射法，甜瓜芽真空侵染法时效更快，一般在侵染后1周一叶一心时期就可快速显现沉默表型，有利于在苗期快速挖掘和研究甜瓜(56)对比文件Zhao F等.Development of tobaccoringspot virus-based vectors for foreigngene expression and virus-induced genesilencing in a variety of plants.《Virology》.2016,第第492卷卷摘要，第166页左栏第1段至第177页左栏第2段.刘美等.VIGS技术的研究进展及其在葫芦科作物中的应用《.果树学报》.2018,第35卷(第11期),摘要，第1423页左栏第1段至第1427页右栏第3段.朱华玉等.甜瓜黄绿叶色性状的遗传分析及其初步定位《.河南农业大学学报》.2019,第53卷(第06期),第855-860页.

公开(公告)号：CN116355951A

公开(公告)日：2023-06-30

申请号：CN202211453013.5

申请日：2022-11-21

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 侯娟 ,  王际宇 ,  李琼 ,  胡建斌 ,  李翔 ,  李丽丽 ,  王盼乔 ,  毛文文 ,  王瑞丹 ,  周云新 ,  王瑜

IPC: C12N15/84 ,  C12N15/53 ,  A01H5/10 ,  A01H5/00 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了一种基于芽真空侵染的甜瓜VIGS沉默体系的构建方法，选择pTRSV2为重组载体，去除种皮的芽萌发长度1‑2cm的甜瓜种子为受体材料，以体积比1：1的辅助载体pTRSV1与pTRSV2‑目的基因重组载体的混合菌液进行真空侵染，侵染条件为：侵染压强为0.9kPa、菌液浓度OD600=1.0、侵染时间5min。同时，我们以甜瓜八氢番茄红素脱氢酶基因CmPDS为例，对本发明体系进行了应用验证，结果显示该沉默体系可显著降低甜瓜中CmPDS的表达量，植株沉默率为85%。相对于子叶注射法，甜瓜芽真空侵染法时效更快，一般在侵染后1周一叶一心时期就可快速显现沉默表型，有利于在苗期快速挖掘和研究甜瓜重要农艺性状相关基因，该沉默体系也克服了甜瓜遗传转化体系不成熟、效率低、周期长的不足。

公开(公告)号：CN118979043A

公开(公告)日：2024-11-19

申请号：CN202410293919.8

申请日：2024-03-14

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 侯娟 ,  王际宇 ,  李琼 ,  胡建斌 ,  王瑜 ,  曹磊 ,  梁晓雪 ,  毛文文 ,  李翔 ,  李丽丽 ,  王盼乔 ,  陈莹莹

IPC: C12N15/29 ,  C07K14/415 ,  C12N15/83 ,  C12N15/84 ,  C12N1/21 ,  A01H5/00 ,  A01H6/34 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了甜瓜ERF家族转录因子CmERF60基因、其编码蛋白和影响甜瓜苗期耐冷性的应用，所述CmERF60基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，并分析了该基因在甜瓜耐冷材料“H581”与甜瓜冷敏感材料“H906”在不同冷处理时间的表达量以及在相应植株中不同组织的表达模式。本发明通过在甜瓜苗期子叶中瞬时过表达CmERF60基因，发现能够提高过表达植株清除活性氧的能力从而提高苗期耐寒性，同时通过VIGS沉默CmERF60基因，对沉默植株与阴性对照进行冷处理，通过对比冷处理前后沉默植株与阴性对照之间的耐冷性表型差异，离子渗透量以及冷处理恢复后植株的最大光和效率，明确CmERF60基因能够正调控甜瓜苗期的耐冷性。

公开(公告)号：CN116179574A

公开(公告)日：2023-05-30

申请号：CN202211480233.7

申请日：2022-11-23

Applicant: 河南农业大学

Inventor： 胡建斌 ,  李营 ,  李丽丽 ,  王际宇 ,  张修月 ,  王盼乔 ,  侯娟 ,  李翔 ,  毛文文 ,  李琼 ,  杨路明 ,  孙守如

IPC: C12N15/54 ,  C12N15/84 ,  A01H5/00 ,  A01H5/08 ,  A01H6/34

Abstract: 本发明公开了CmEAF7基因在提高甜瓜耐冷性和/或果实品质中的应用，所述CmEAF7基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，所述提高甜瓜果实品质表现为甜瓜果实中蔗糖与果糖含量提高。本发明通过沉默CmEAF7基因，对沉默植株与阴性对照进行冷处理，通过对比冷处理前后沉默植株与阴性对照之间的耐冷性表型差异以及离子渗透量的变化，明确CmEAF7基因能够正调控甜瓜苗期的耐冷性；另外，过表达CmEAF7基因能够提高甜瓜果实中果糖和蔗糖含量，相反沉默CmEAF7基因能够降低甜瓜果实中果糖和蔗糖含量，可见CmEAF7基因在提高甜瓜耐冷性和/或果实中果糖和蔗糖含量中起着重要的作用，在甜瓜耐低温与高品质协同改良中具有潜在的应用价值。