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公开(公告)号:CN116375813A
公开(公告)日:2023-07-04
申请号:CN202211025619.9
申请日:2022-08-25
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K14/01 , C12N15/867 , C12N5/10 , G01N33/569 , G01N33/543
Abstract: 本发明提供了一种非洲猪瘟病毒CD2v蛋白的制备方法,该方法为:构建重组载体pTRIP‑Pure‑CD2v‑ex,然后进行包装得到重组慢病毒液CD2v‑LVs,感染CHO‑S细胞,得到转导后的CHO‑S细胞,进行筛选后,筛选出表达量最高的高表达阳性CHO‑CD2v单克隆,PCR鉴定和蛋白纯化,得到非洲猪瘟病毒CD2v蛋白。还提供了应用,用于鉴别非洲猪瘟病毒野毒株与CD2v缺失毒株感染的间接ELISA抗体检测。本发明的非洲猪瘟病毒CD2v蛋白具有更接近天然蛋白的糖基化修饰,以该蛋白为检测抗原建立的间接ELISA检测方法,具有良好的特异性和灵敏度,且非洲猪瘟病毒CD2v蛋白细胞系的建立提高了蛋白表达量,很大程度上节约了生产成本。
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公开(公告)号:CN118580344A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410646089.2
申请日:2024-05-23
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , A61K39/395 , A61K39/12 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C07K14/01
Abstract: 本发明公开了抗非洲猪瘟病毒B117L‑213蛋白单克隆抗体、制备方法及应用,属于生物技术领域。其重链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,其轻链可变区氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。本发明所述抗非洲猪瘟病毒B117L‑213蛋白单克隆抗体与重组表达的B117L‑213蛋白具有良好的亲和反应能力;这为进一步建立ASFV血清学检测方法、鉴定与非洲猪瘟其他蛋白相互作用和深入研究B117L‑213蛋白的生物学功能奠定了基础。
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公开(公告)号:CN116173002B
公开(公告)日:2023-08-25
申请号:CN202310191829.3
申请日:2023-03-02
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K31/216 , A61P31/14 , A61P39/06 , A61P29/00 , A61P1/16
Abstract: 本发明公开了丹酚酸A在制备防治猪繁殖与呼吸综合征的药物中的应用,涉及生物医药技术领域。本发明从中草药库中筛选初步发现丹酚酸A可以显著抑制PRRSV的复制。首先明确丹酚酸A的安全使用剂量,病毒感染实验进一步分析丹酚酸A抗PRRSV活性,并明确影响病毒复制的哪个阶段。试验结果显示丹酚酸A的安全使用剂量为1‑60μM;丹酚酸A呈剂量依赖性显著抑制PRRSV的复制,并且20μM丹酚酸A可以完全抑制病毒复制;丹酚酸A对不同PRRSV毒株均具有抗病毒活性,呈现出广谱抗病毒活性;最后明确丹酚酸A通过影响病毒的吸附和进入进而发挥抗病毒活性。
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公开(公告)号:CN114990073A
公开(公告)日:2022-09-02
申请号:CN202210584612.4
申请日:2022-05-27
Applicant: 河南农业大学
IPC: C12N5/20 , C07K16/24 , G01N33/577 , G01N33/68 , G01N33/58
Abstract: 本发明公开了一种抗猪CCL2蛋白的单克隆抗体及其制备方法和应用,属于生物技术领域。所述杂交瘤细胞系的保藏编号为CCTCC NO:C202279。通过杂交瘤融合筛选技术,成功制备了一株抗猪CCL2蛋白的单克隆抗体,并利用猪CCL2特异性兔多抗和鼠单抗建立了双抗体夹心ELISA的CCL2蛋白检测方法,评价了该方法在猪CCL2检测中的应用,为后续建立商品化定量夹心ELISA试剂盒提供了关键的抗体材料。
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公开(公告)号:CN112920268A
公开(公告)日:2021-06-08
申请号:CN202110305660.0
申请日:2021-03-19
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , C07K19/00 , C12N9/08 , G01N33/535 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白及制备方法、应用,涉及生物技术领域;本发明提供一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白由纳米抗体p54‑Nb83与HRP串联而成,所述纳米抗体p54‑Nb83的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示;本发明还利用所述纳米抗体‑HRP融合蛋白作为灵敏探针,建立检测ASFV血清抗体的阻断ELISA,相比传统间接ELISA检测方法,所述阻断ELISA具有操作简单,成本低,灵敏度高,特异性强,稳定性好的优势,具有广阔的市场化及临床应用前景。
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公开(公告)号:CN118580345A
公开(公告)日:2024-09-03
申请号:CN202410646437.6
申请日:2024-05-23
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N5/20 , A61K39/12 , A61K39/395 , A61P31/20 , G01N33/577 , G01N33/569 , C07K14/01
Abstract: 本发明公开了抗非洲猪瘟病毒DP96R蛋白单克隆抗体、抗原表位肽与应用,属于生物技术领域。本发明提供的抗非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的单克隆抗体,利用原核表达系统成功制备ASFV DP96R蛋白单克隆抗体,经Western blot和IFA鉴定,证明了DP96R重组蛋白具有良好的免疫原性,制备的单克隆抗体具有良好的反应性和特异性。制备高质量和高效价的鼠抗ASFV DP96R单克隆抗体为研究DP96R蛋白功能提供了良好的工具。原核表达蛋白可用于血清学检测方法的建立。
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公开(公告)号:CN118319899A
公开(公告)日:2024-07-12
申请号:CN202410482828.9
申请日:2024-04-22
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K31/352 , A61P31/14 , A61P31/22
Abstract: 本发明涉及生物医药领域,特别是涉及Engyodontiumone H在制备广谱抗病毒药物中的应用。本发明具体实施例结果表明,Engyodontiumone H能够显著抑制PRRSV在其易感细胞Marc‑145的增殖,同时能降低Marc‑145细胞培养上清中的子代病毒的释放,并且随着药物浓度的增加,其抗病毒作用也增强。本发明证明了Engyodontiumone H具有良好的抗病毒作用,有望成为一种新型的防治猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒的药物,并且对猪伪狂犬病毒和鸡新城疫病毒也有着初步抑制作用。
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公开(公告)号:CN112920268B
公开(公告)日:2021-09-24
申请号:CN202110305660.0
申请日:2021-03-19
Applicant: 河南农业大学
IPC: C07K16/08 , C12N15/13 , C12N15/85 , C07K19/00 , C12N9/08 , G01N33/535 , G01N33/58 , G01N33/569 , G01N33/68
Abstract: 本发明公开一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白及制备方法、应用,涉及生物技术领域;本发明提供一种ASFV‑p54蛋白特异性的纳米抗体‑HRP融合蛋白由纳米抗体p54‑Nb83与HRP串联而成,所述纳米抗体p54‑Nb83的氨基酸序列如SEQ ID No:1所示;本发明还利用所述纳米抗体‑HRP融合蛋白作为灵敏探针,建立检测ASFV血清抗体的阻断ELISA,相比传统间接ELISA检测方法,所述阻断ELISA具有操作简单,成本低,灵敏度高,特异性强,稳定性好的优势,具有广阔的市场化及临床应用前景。
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公开(公告)号:CN112336717A
公开(公告)日:2021-02-09
申请号:CN202011447806.7
申请日:2020-12-09
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K31/4015 , A61P31/14
Abstract: 本发明公开了尹奎色亭在制备防治猪繁殖与呼吸综合征的药物中的应用,属于医药领域。本发明通过qRT‑PCR、Western Blot、测定细胞上清中子代病毒TCID50及IFA等方法研究了尹奎色亭在Marc‑145和PAM细胞水平上对PRRSV的抗病毒作用,结果表明,尹奎色亭显著的抑制了PRRSV在其易感细胞Marc‑145和宿主靶细胞PAM中的增殖,且其抗病毒作用随浓度增加而上升。本发明证明了尹奎色亭制剂具有很好的抗病毒效果,有望成为一种新型的防治猪繁殖与呼吸综合征的药物。
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公开(公告)号:CN116173002A
公开(公告)日:2023-05-30
申请号:CN202310191829.3
申请日:2023-03-02
Applicant: 河南农业大学
IPC: A61K31/216 , A61P31/14 , A61P39/06 , A61P29/00 , A61P1/16
Abstract: 本发明公开了丹酚酸A在制备防治猪繁殖与呼吸综合征的药物中的应用,涉及生物医药技术领域。本发明从中草药库中筛选初步发现丹酚酸A可以显著抑制PRRSV的复制。首先明确丹酚酸A的安全使用剂量,病毒感染实验进一步分析丹酚酸A抗PRRSV活性,并明确影响病毒复制的哪个阶段。试验结果显示丹酚酸A的安全使用剂量为1‑60μM;丹酚酸A呈剂量依赖性显著抑制PRRSV的复制,并且20μM丹酚酸A可以完全抑制病毒复制;丹酚酸A对不同PRRSV毒株均具有抗病毒活性,呈现出广谱抗病毒活性;最后明确丹酚酸A通过影响病毒的吸附和进入进而发挥抗病毒活性。
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