公开(公告)号：CN118878645A

公开(公告)日：2024-11-01

申请号：CN202410730997.X

申请日：2024-06-06

申请人： 河南农业大学

发明人： 吴亚楠 ,  张改平 ,  周蕾 ,  宋金星 ,  孙卓雅 ,  王梦翔 ,  庄国庆 ,  何华 ,  孙俊如 ,  李炎泽 ,  朱瑞勤 ,  焦刘洋 ,  卜友浩

IPC分类号： C07K14/01 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20 ,  G01N33/569

摘要： 本申请属于动物疫病防治技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒K205R蛋白相关的表位。所述表位有两个：表位aa 160‑170表位氨基酸序：PEIQAILDEQF；表位aa 176‑183表位氨基酸序列：IERLHAEG。本申请中，发明人利用重组制备的ASFV K205R蛋白制备获得了相关的单克隆抗体，进一步截短重叠多肽等技术，鉴定了单克隆抗体所识别的表位，基于这些表位位点，可为更为高效的ASFV血清学检测、以及有效的非洲猪瘟防治疫苗开发奠定一定技术基础，因此具有较好的技术应用价值。

公开(公告)号：CN116925209A

公开(公告)日：2023-10-24

申请号：CN202310978473.8

申请日：2023-08-04

申请人： 河南农业大学

发明人： 张改平 ,  宋金星 ,  吴亚楠 ,  王梦翔 ,  田盼盼 ,  周蕾 ,  孙俊如 ,  孙卓雅

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N5/20 ,  G01N33/569 ,  G01N33/577

摘要： 本申请属于抗体制备技术领域，具体涉及一种抗非洲猪瘟病毒pB602L蛋白的单克隆抗体。所述单克隆抗体包括重链和轻链两部分，重链亚类为IgG2a，轻链为κ型；重链和轻链的氨基酸序列分别如SEQ ID No.1和SEQ ID No.2所示。非洲猪瘟病毒pB602L作为最具免疫优势的抗原之一，发明人制备了相关重组蛋白并免疫小鼠，获得了抗非洲猪瘟病毒pB602L小鼠的单克隆抗体。本申请通过制备相关单克隆抗体，并鉴定出其结合的相关最短线性B细胞表位，可为了解非洲猪瘟抗体和抗原之间的相互作用模式、非洲猪瘟的早期检测、疫苗靶点和新型疫苗设计等具有重要意义。

公开(公告)号：CN117031039A

公开(公告)日：2023-11-10

申请号：CN202311012142.5

申请日：2023-08-11

申请人： 河南农业大学

发明人： 吴亚楠 ,  张改平 ,  周蕾 ,  宋金星 ,  王梦翔 ,  孙俊如 ,  孙卓雅 ,  田盼盼 ,  张二芹 ,  姬鹏超

IPC分类号： G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58

摘要： 本申请属于动物疫病检测技术领域，具体涉及一种针对非洲猪瘟病毒(ASFV)抗体的间接ELISA检测方法。该方法以CP204L基因编码的p30和B602L基因编码的pB602L蛋白为抗原，包括：包被抗原、封闭、加入待检血清进行孵育、检测等步骤。鉴于p30和pB602L在ASFV结构形成中的重要作用，本申请通过制备纯化的重组ASFV p30和pB602L蛋白，并据此建立了一种可以检测ASFV抗体的双抗原间接ELISA方法，初步实验结果表明，所建立的ELISA检测方法灵敏度和特异性较好，可为ASF检测和判定、以及ASF的早期预防奠定良好的技术基础。

公开(公告)号：CN115975011A

公开(公告)日：2023-04-18

申请号：CN202310055518.4

申请日：2023-01-16

申请人： 河南农业大学

发明人： 吴亚楠 ,  宋金星 ,  夏璐 ,  张艺璇 ,  王梦翔 ,  姬鹏超 ,  万博 ,  张改平

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  C12N15/85 ,  G01N33/569

摘要： 本发明属于抗体制备技术领域，具体涉及一种针对p72蛋白的抗非洲猪瘟病毒的抗体。该抗体属于一种仅包括重链可变区VH与轻链可变区VL的单链抗体。本申请中，基于现有成熟噬菌体抗体库筛选技术，筛选获得了一个对非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72蛋白具有高亲和力的特异性scFv‑Fc抗体。初步实验结果表明，该单链抗体较好保留了对抗原的亲和活性，可以特异性的识别并结合衣壳蛋白p72；而且由于其分子量小、穿透力强，因此易于通过基因工程技术手段借助于原核或真核表达系统进行大量制备，可为非洲猪瘟病毒的检测、预防和治疗药物的开发奠定一定技术基础。

公开(公告)号：CN117551179A

公开(公告)日：2024-02-13

申请号：CN202311503322.3

申请日：2023-11-13

申请人： 河南农业大学

发明人： 张改平 ,  宋金星 ,  吴亚楠 ,  王梦翔 ,  田盼盼 ,  周蕾 ,  孙俊如 ,  孙卓雅

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/34 ,  A61K39/12 ,  A61K39/385 ,  A61P31/20 ,  C12N15/70 ,  C12N15/62 ,  C07K19/00

摘要： 本申请属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟病毒多表位纳米颗粒疫苗。该颗粒疫苗包含两种功能蛋白组分：SC‑Ferritin蛋白和ST‑XME蛋白；SC‑Ferritin蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.1所示；ST‑XME蛋白氨基酸序列如SEQ ID No.4所示。本申请中，通过对特异性的B细胞表位和T细胞表位的筛选、识别，设计构建了相关免疫用蛋白。进一步利用铁蛋白作为载体以及将抗原与XCL1融合，靶向cDC1增强交叉提呈及T细胞的免疫应答，最终构建一种自组装纳米载体疫苗。初步结果表明，本申请的纳米颗粒疫苗能够以较低的抗原剂量来诱导高水平且持续的特异性抗体和特异性细胞免疫反应。

公开(公告)号：CN116183927A

公开(公告)日：2023-05-30

申请号：CN202211087923.6

申请日：2022-09-07

申请人： 河南农业大学

发明人： 张改平 ,  吴亚楠 ,  杜永坤 ,  王梦翔 ,  宋金星 ,  孙俊如 ,  夏璐 ,  魏战勇

IPC分类号： G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58 ,  C12N15/34

摘要： 本申请属于非洲猪瘟病毒检测技术领域，具体涉及一种基于p30蛋白的检测血清中抗非洲猪瘟抗体的双抗原夹心ELISA方法。该方法包括：抗原包被、封闭、加样和加入酶标抗原、显色和检测判定等步骤。本申请以特定重组p30蛋白为基础，以血清为检测样品，以非洲猪瘟抗体为检测对象，所构建的双抗原夹心ELISA法具有特异性好、成本低、可重复性强、可批量化检测应用的技术优点，可为预防和控制ASF的流行奠定一定的检测技术基础。

公开(公告)号：CN118580345A

公开(公告)日：2024-09-03

申请号：CN202410646437.6

申请日：2024-05-23

申请人： 河南农业大学

发明人： 张改平 ,  杜永坤 ,  张昂克 ,  王小格 ,  王选年 ,  李潮 ,  吴亚楠 ,  王娜 ,  万博

IPC分类号： C07K16/08 ,  C12N15/13 ,  C12N5/20 ,  A61K39/12 ,  A61K39/395 ,  A61P31/20 ,  G01N33/577 ,  G01N33/569 ,  C07K14/01

摘要： 本发明公开了抗非洲猪瘟病毒DP96R蛋白单克隆抗体、抗原表位肽与应用，属于生物技术领域。本发明提供的抗非洲猪瘟病毒DP96R蛋白的单克隆抗体，利用原核表达系统成功制备ASFV DP96R蛋白单克隆抗体，经Western blot和IFA鉴定，证明了DP96R重组蛋白具有良好的免疫原性，制备的单克隆抗体具有良好的反应性和特异性。制备高质量和高效价的鼠抗ASFV DP96R单克隆抗体为研究DP96R蛋白功能提供了良好的工具。原核表达蛋白可用于血清学检测方法的建立。

公开(公告)号：CN117843732A

公开(公告)日：2024-04-09

申请号：CN202410048808.0

申请日：2024-01-12

申请人： 河南农业大学

发明人： 张改平 ,  吴亚楠 ,  田盼盼 ,  王梦翔 ,  孙卓雅 ,  宋金星 ,  孙俊如 ,  周蕾 ,  张二芹 ,  庄国庆 ,  杜永坤

IPC分类号： C07K14/01 ,  C12N15/34 ,  G01N33/569 ,  A61K39/12 ,  A61P31/20

摘要： 本申请属于动物疫苗制备技术领域，具体涉及一个非洲猪瘟病毒p30蛋白相关的线性B细胞表位及其应用。非洲猪瘟病毒p30蛋白相关的线性B细胞表位，其为一个具有7个氨基酸残基的多肽，具体氨基酸序列如SEQ ID No.1所示，具体为：HNFIQTI。对所鉴定的B细胞表位信息的分析结果表明，该表位在中国不同地区的所有参考ASFV株系中都是保守的，包括广泛分布的高致病性株系Georgia 2007/1(NC_044959.2)。总体上，基于这些实验结果，可为相关非洲猪瘟检测试剂制备、以及相关疫苗开发奠定一定良好的技术基础。

公开(公告)号：CN117890585A

公开(公告)日：2024-04-16

申请号：CN202410080672.1

申请日：2024-01-19

申请人： 河南农业大学

发明人： 张改平 ,  吴亚楠 ,  王梦翔 ,  宋金星 ,  田盼盼 ,  孙俊如 ,  孙卓雅 ,  周蕾 ,  万博 ,  孙爱军 ,  杜永坤 ,  王选年 ,  王娜 ,  何华

IPC分类号： G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/577 ,  G01N33/531

摘要： 本申请属动物疫病检测技术领域，具体涉及一种非洲猪瘟检测用双探针及相应的ELSIA检测方法。本申请中，发明人构建了两种探针，其中MNPs‑p30探针是通过使用EDC和NHC活化MNPs上的羧基以形成活化酯溶液，进而与p30蛋白上的氨基反应后偶联复合形成为一个整体；McAb‑HRP探针则是将抗p30的单克隆抗体与HRP偶联复合为一个整体。基于这两种探针，发明人构建了一种适于ASFV检测的双探针竞争性ELISA检测方法。实验结果表明，本申请所提供的ELISA检测方法具有灵敏度高、准确度高、可重复性好等优点，尤其是可大幅简化相关操作步骤，且可大幅缩短检测时间，可为ASF的防控奠定良好的技术基础。