公开(公告)号：CN119161493A

公开(公告)日：2024-12-20

申请号：CN202411588796.7

申请日：2024-11-08

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 张雪寒 ,  李彬 ,  汪伟 ,  周俊明 ,  祝昊丹 ,  李运川 ,  王丹丹 ,  杨珊珊 ,  何孔旺

IPC: C07K19/00 ,  C12N15/62 ,  G01N33/569 ,  G01N33/543 ,  G01N33/58

Abstract: 本发明公开了一种Eae‑Stx2融合蛋白及基于间接ELISA法检测致病性大肠杆菌抗体的试剂盒，属于生物技术领域。所述Eae‑Stx2融合蛋白是将Eae蛋白和Stx2蛋白通过柔性连接子连接而成，所述Eae‑Stx2融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。本发明利用所述Eae‑Stx2融合蛋白作为包被抗原，建立致病性大肠杆菌抗体间接ELISA检测方法和试剂盒。本发明制备的大肠杆菌Eae‑Stx2融合蛋白抗原性好，所构建的间接ELISA抗体检测方法，具有灵敏度高、特性强、重复性好的特点，适合检测猪、牛，以及人类携带/感染致病性大肠杆菌的抗体情况，便于规模样品检测和流行病学监测用。

公开(公告)号：CN118909083A

公开(公告)日：2024-11-08

申请号：CN202411030447.3

申请日：2024-07-30

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 杨珊珊 ,  李彬 ,  曹秋霞 ,  颜可欣 ,  张雪寒 ,  范宝超 ,  郭容利

IPC: C07K14/705 ,  C12N15/12 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12P21/02 ,  C07K1/14 ,  C07K1/22 ,  C07K1/34 ,  C07K1/36 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种猪B细胞增殖诱导配体蛋白及其制备方法和应用，属于基因工程领域。通过预测增殖诱导配体蛋白二级结构、功能域和跨膜区后，获取去除跨膜区的重组蛋白氨基酸序列，之后构建表达该重组蛋白的重组载体并在大肠杆菌表达系统中进行表达、纯化，经鉴定该重组蛋白能够保证猪B细胞存活，这对研究增殖诱导配体蛋白对猪流行性腹泻病毒感染的作用机制以及制备防控猪肠道病毒病的黏膜疫苗等方面具有重要的科学意义和价值。

公开(公告)号：CN117683726A

公开(公告)日：2024-03-12

申请号：CN202311777549.7

申请日：2023-12-22

Applicant: 江苏省农业科学院

Inventor： 李彬 ,  范宝超 ,  王传红 ,  赵永祥 ,  郭容利 ,  李运川 ,  周俊明 ,  李基棕 ,  张雪寒 ,  朱雪蛟 ,  汪伟 ,  杨珊珊 ,  孙敏 ,  周金柱

IPC: C12N5/10 ,  C12N15/50 ,  C12N15/85 ,  C07K14/165 ,  C07K1/22 ,  A61K39/215 ,  A61P31/14 ,  G01N33/569 ,  C12R1/91

Abstract: 本发明公开了一种稳定外分泌表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的CHO细胞系的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明通过设计合成9个信号肽引物，以同源重组的方式得到表达猪流行性腹泻病毒变异株AH2012/12株S全长蛋白的9个重组表达质粒，瞬时转染HEK 293T细胞后，通过Western‑blot验证蛋白外分泌表达水平，筛选出含跨膜蛋白酶丝氨酸9信号肽S蛋白具有较好的外分泌表达特性；随后利用G418筛选获得稳定表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的单克隆细胞，通过传代验证不同代次的蛋白表达水平，成功构建了可稳定外分泌表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的CHO细胞系，为进一步研制猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗奠定了基础。