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公开(公告)号：CN116059276B
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202211183064.0
申请日：2022-09-27
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： A61K31/704 , A61K36/71 , A61P31/14 , A61P37/04
摘要： 本申请公开了一种抗猪流行性腹泻病毒的药物组合物，涉及医药技术领域。所述抗猪流行性腹泻病毒的药物组合物包括三七总皂苷和白头翁皂苷B4。本申请的防治猪流行性腹泻病毒病的药物能有效提升动物特异性的抗体效价，降低病毒载量，增强免疫细胞和免疫介质的数量与活性，促进免疫器官的生长发育，全面增强动物免疫功能和防御疾病的能力，克服了疫苗、化药、抗生素的毒副作用与食品安全隐患，研发前景乐观，临床应用广阔。
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公开(公告)号：CN116466079A
公开(公告)日：2023-07-21
申请号：CN202310177016.9
申请日：2023-02-28
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： G01N33/569 , G01N33/543
摘要： 本发明公开了一种检测猪流行性腹泻病毒抗体SIgA的ELISA方法，属于生物技术领域。该方法包括以S1蛋白作为包被抗原，检测待测样品中猪流行腹泻病毒抗体SIgA抗体的步骤，其中，所述S1蛋白的氨基酸序列为第19‑719位的截断序列。本发明通过优化条件初步建立了检测血清、肠道组织和乳汁中猪流行性腹泻病毒特异性SIgA抗体的间接ELISA方法，并确定最佳抗原包被浓度和包被时间分别为0.25μg/ml和4℃过夜12h‑16h，以及其他的最佳检测条件。本研究建立的检测血清、肠道组织和乳汁中PEDV特异性SIgA的方法简便快速，具有较好的敏感性、特异性，这为评价PEDV黏膜免疫水平提供了依据和检测标准。
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公开(公告)号：CN114958763A
公开(公告)日：2022-08-30
申请号：CN202210041469.4
申请日：2022-01-14
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/10 , C12N5/071 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12N7/00
摘要： 本发明提供一种构建DBN1基因敲除的Vero细胞株的方法及其应用，属于分子生物学领域。该构建方法包括：找到Vero细胞DBN1基因靶点，设计靶向sgRNA，包括sgRNA‑DBN1‑F和sgRNA‑DBN1‑R；PX459(pSpCas9(BB)‑2A‑Puro)V2.0载体用Bbs I内切酶酶切，然后与sgRNA‑DBN1‑F和sgRNA‑DBN1‑R序列退火后形成的双链进行连接，得到敲除质粒；将所述敲除质粒与辅助包装质粒PSPXA2、PMD.2G共转染入Vero细胞，经筛选后，得到DBN1基因敲除的Vero细胞株。本发明构建方法高效，所得细胞株提高了PEDV的增殖滴度，显著降低了成本。
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公开(公告)号：CN117430673A
公开(公告)日：2024-01-23
申请号：CN202210868364.6
申请日：2022-07-22
申请人： 江苏省农业科学院
摘要： 本发明公开了用于抑杀革兰氏阴性菌的抗菌肽组合物及其应用。一种抗菌肽组合物，所述抗菌肽组合有两种抗菌肽组成，分别为Thanatin和BF‑15a3；所述抗菌肽Thanatin的序列如SEQ ID NO.1所示；所述抗菌肽BF‑15a3的序列如SEQID NO.2所示。发明中的抗菌肽组合物不仅具有协同杀死普通病原微生物的作用，而且对临床分离的多药耐药病原菌表现出十分优异的抗菌活性，并且没有表现出溶血活性。抗菌肽组合物使用的抗菌肽为人工合成，具有分子量小、人工合成方便，杀菌作用强、抗菌谱广、溶血活性低等优点，具有广泛的应用前景。
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公开(公告)号：CN117959420A
公开(公告)日：2024-05-03
申请号：CN202410141901.6
申请日：2024-02-01
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： A61K39/215 , A61K39/39 , A61P31/14 , C07K14/165 , C12N15/85 , C12N15/50
摘要： 本发明公开了一种猪流行性腹泻病毒二价亚单位疫苗及制备方法，属于兽用生物制品领域。本发明构建了含S基因的重组真核质粒pPEDV‑2b‑S和pPEDV‑2a‑S，经纯化得到较纯的重组蛋白PEDV‑2a‑S和pPEDV‑2b‑S，将两者混合后与佐剂共同构建猪流行性腹泻病毒二价亚单位疫苗，利用该疫苗免疫猪后，重组蛋白能有效刺激仔猪和母猪产生特异性抗体，且在血清和乳汁中诱导较高的中和抗体水平，免疫的仔猪/乳猪的粪便中病毒载量较低，说明本发明制备的猪流行性腹泻病毒二价亚单位疫苗对猪具有良好的免疫原性，为猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗的研发提供了基础。
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公开(公告)号：CN117683726A
公开(公告)日：2024-03-12
申请号：CN202311777549.7
申请日：2023-12-22
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/10 , C12N15/50 , C12N15/85 , C07K14/165 , C07K1/22 , A61K39/215 , A61P31/14 , G01N33/569 , C12R1/91
摘要： 本发明公开了一种稳定外分泌表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的CHO细胞系的构建方法，属于基因工程技术领域。本发明通过设计合成9个信号肽引物，以同源重组的方式得到表达猪流行性腹泻病毒变异株AH2012/12株S全长蛋白的9个重组表达质粒，瞬时转染HEK 293T细胞后，通过Western‑blot验证蛋白外分泌表达水平，筛选出含跨膜蛋白酶丝氨酸9信号肽S蛋白具有较好的外分泌表达特性；随后利用G418筛选获得稳定表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的单克隆细胞，通过传代验证不同代次的蛋白表达水平，成功构建了可稳定外分泌表达猪流行性腹泻病毒S蛋白的CHO细胞系，为进一步研制猪流行性腹泻病毒亚单位疫苗奠定了基础。
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公开(公告)号：CN116059276A
公开(公告)日：2023-05-05
申请号：CN202211183064.0
申请日：2022-09-27
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： A61K36/71 , A61P31/14 , A61P37/04 , A61K36/258
摘要： 本申请公开了一种抗猪流行性腹泻病毒的药物组合物，涉及医药技术领域。所述抗猪流行性腹泻病毒的药物组合物包括三七总皂苷和白头翁皂苷B4。本申请的防治猪流行性腹泻病毒病的药物能有效提升动物特异性的抗体效价，降低病毒载量，增强免疫细胞和免疫介质的数量与活性，促进免疫器官的生长发育，全面增强动物免疫功能和防御疾病的能力，克服了疫苗、化药、抗生素的毒副作用与食品安全隐患，研发前景乐观，临床应用广阔。
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公开(公告)号：CN114958763B
公开(公告)日：2023-02-14
申请号：CN202210041469.4
申请日：2022-01-14
申请人： 江苏省农业科学院
IPC分类号： C12N5/10 , C12N5/071 , C12N15/12 , C12N15/867 , C12N7/00
摘要： 本发明提供一种构建DBN1基因敲除的Vero细胞株的方法及其应用，属于分子生物学领域。该构建方法包括：找到Vero细胞DBN1基因靶点，设计靶向sgRNA，包括sgRNA‑DBN1‑F和sgRNA‑DBN1‑R；PX459(pSpCas9(BB)‑2A‑Puro)V2.0载体用Bbs I内切酶酶切，然后与sgRNA‑DBN1‑F和sgRNA‑DBN1‑R序列退火后形成的双链进行连接，得到敲除质粒；将所述敲除质粒与辅助包装质粒PSPXA2、PMD.2G共转染入Vero细胞，经筛选后，得到DBN1基因敲除的Vero细胞株。本发明构建方法高效，所得细胞株提高了PEDV的增殖滴度，显著降低了成本。
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