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公开(公告)号：CN1724662A
公开(公告)日：2006-01-25
申请号：CN200510080492.0
申请日：2005-07-06
Applicant: 江南大学 , 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种乳糖酶的固定化方法及固定化乳糖酶的应用。该发明利用发明人筛选得到的树脂作为载体吸附固定用重组毕赤酵母发酵得到过滤清液中的胞外游离乳糖酶；再将这种吸附了酶的载体用海藻酸钙包埋方法与戊二醛交联方法处理，制备成高结合强度的固定化乳糖酶。以该方法制备的固定化乳糖酶作为生物催化剂水解5％乳糖溶液，固定化酶用量为10～100％(w/v)，5～60℃下作用0.5～1小时，连续转化52批，乳糖水解率保持在75％以上；以该方法制备的固定化乳糖酶处理新鲜牛奶，5～60℃下转化0.2～8小时，连续转化30批，乳糖水解率保持在70％以上。
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公开(公告)号：CN1314800C
公开(公告)日：2007-05-09
申请号：CN200510080492.0
申请日：2005-07-06
Applicant: 江南大学 , 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明涉及一种乳糖酶的固定化方法及固定化乳糖酶的应用。该发明利用发明人筛选得到的树脂作为载体吸附固定用重组毕赤酵母发酵得到过滤清液中的胞外游离乳糖酶；再将这种吸附了酶的载体用海藻酸钙包埋方法与戊二醛交联方法处理，制备成高结合强度的固定化乳糖酶。以该方法制备的固定化乳糖酶作为生物催化剂水解5%乳糖溶液，固定化酶用量为10～100%(w/v)，5～60℃下作用0.5～1小时，连续转化52批，乳糖水解率保持在75%以上；以该方法制备的固定化乳糖酶处理新鲜牛奶，5～60℃下转化0.2～8小时，连续转化30批，乳糖水解率保持在70%以上。
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公开(公告)号：CN118222523B
公开(公告)日：2024-07-26
申请号：CN202410645986.1
申请日：2024-05-23
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了PET塑料降解酶BMHETase突变体及其应用。本发明将SEQ ID No.1所示的野生型BMHETase进行单位点或多位点突变得到单位点突变体或多位点突变体，这些突变体对BHET和MHET的降解活性相比野生型均有明显提高，且随着突变位点的叠加或增加，多位点突变体降解MHET以及BHET的活性逐渐提高，其中，六位点突变体BMHETase6M水解活性最高，分别是野生型BMHETase降解MHET、BHET的7.53倍和2.31倍；最佳反应温度检测结果表明，BMHETase6M降解MHET和BHET的最适反应温度分别为60℃和65℃，均比野生型BMHETase提高了5℃。
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公开(公告)号：CN112143721A
公开(公告)日：2020-12-29
申请号：CN202011347024.6
申请日：2020-11-26
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了低温过氧化氢酶及其制备方法和应用。本发明从天山土壤宏基因中分离得到过氧化氢酶基因，其多核苷酸序列为SEQ ID No.1所示，编码502个氨基酸和一个终止密码子。本发明过氧化氢酶的最适温度是10‑20℃，并且在0～30℃的低温范围内均具有较高的酶活性，具有低温酶的特性，能在低温环境中发挥清除H2O2的作用。本发明的过氧化氢酶具有良好的热稳定性，在40℃具有良好的热稳定性，处理3 h后仍残留74%的酶活性，在50℃具有一定的热稳定性，处理0.5 h后仍残留78%的酶活性。本发明过氧化氢酶的最适pH为8.0。本发明进一步提供了所述的过氧化氢酶作为抗氧化剂在清除H2O2中的应用。
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公开(公告)号：CN106801046B
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN201610822099.2
申请日：2016-09-13
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的酸性普鲁兰酶突变体及其编码基因和应用。本发明选择野生型酸性普鲁兰酶的6个位点进行定点突变，从中筛选出3个热稳定性提高的单点突变体。本发明进一步在单点突变的基础上进行组合突变，获得热稳定性和催化效率提高的普鲁兰酶组合突变体，其中组合突变体PulB‑D328H/N387D/A414P的Tm比突变前提高了4.91℃，在65℃下处理10min后，其残余酶活是突变前的12.4倍。本发明进一步公开了含有所述酸性普鲁兰酶突变体编码基因的重组表达载体和重组宿主细胞。本发明所述酸性普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率明显提高，在食品、化工或纺织等领域具有更好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111235078A
公开(公告)日：2020-06-05
申请号：CN202010352834.4
申请日：2020-04-29
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了水稻内生芽孢杆菌及其应用。本发明从水稻根中分离筛选获得一株具有高镉抗性、高镉吸附性、在镉胁迫下具有促生长植物能力以及在水稻根系能稳定定殖的内生芽孢杆菌181-22菌株，其微生物保藏编号是：CGMCC No.19468，该菌株能够与水稻互作，有效降低包括重金属对于作物胁迫所带来的各种危害，包括：促进作物在镉胁迫下的生长、降低作物对镉的吸收和转运、降低作物籽粒对镉的吸收、提高作物叶绿素在镉胁迫下的合成并提高叶片的光合作用；缓解作物在重金属胁迫下受到的氧化损伤、提高作物SOD酶的活性等。本发明还将所述的水稻内生芽孢杆菌制备成生物菌肥作为土壤修复剂修复包括镉在内的各种重金属污染的土壤。
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公开(公告)号：CN109852632A
公开(公告)日：2019-06-07
申请号：CN201910133957.6
申请日：2019-02-22
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了spoIIIJ蛋白作为芽孢杆菌表面展示系统中锚定蛋白的用途。本发明还提供一种芽孢杆菌表面展示系统，包括：含有融合基因的原核穿梭表达载体，宿主菌；所述的融合基因由锚定蛋白编码基因和外源目的蛋白编码基因融合而成；其中，所述的锚定蛋白是spoIIIJ蛋白，所述的宿主菌是芽孢杆菌。本发明进一步提供了一种将外源目的蛋白基因在芽孢杆菌的芽孢表面进行高效展示表达的方法。本发明所提供的枯草芽孢杆菌表面展示系统可以在芽孢表面高效展示大分子量的目的蛋白，能够应用于包括固定化酶的制备、生产抗原、多肽的高通量筛选、重金属的生物吸附以及构建生物传感器在内的多个领域。
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公开(公告)号：CN104673823B
公开(公告)日：2017-11-03
申请号：CN201510107100.9
申请日：2015-03-11
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
Abstract: 本发明公开了一种多策略叠加提高甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中分泌表达量的方法，属于提高酶蛋白在毕赤酵母中分泌表达量的领域。本发明通过单因素实验发现分别在其N端融合蛋白质标签、内质网驻留信号突变或酸稳定性突变均可在一定程度上提高甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中的分泌表达量。本发明进一步发现，将上述三种方案组合在一起后，甲基对硫磷水解酶在毕赤酵母中的分泌表达量呈显著的提升，三者的协同效应非常显著。本发明方法在应用毕赤酵母表达酶蛋白等方面具有重要的应用前景。
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公开(公告)号：CN104789564A
公开(公告)日：2015-07-22
申请号：CN201510149449.9
申请日：2015-03-31
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/63 , C12N15/75 , C12R1/125
Abstract: 本发明公开了一种启动子，该启动子的长度为150-1000bp，其中，所述启动子具有如SEQ ID NO.1所示的核酸片段，并且所述启动子能够启动在枯草芽孢杆菌中的转录。本发明还提供了一种重组表达载体，该重组表达载体能够允许插入阅读框并使所插入的阅读框在细菌中表达出蛋白质，所述重组表达载体中的启动子包括如上所述的启动子。本发明还提供了一种表达外源蛋白的方法，其中，该方法包括：将编码所述外源蛋白的阅读框插入如上所述的重组表达载体得到重组表达质粒。本发明还提供了如上所述的启动子在制备重组表达载体和/或表达质粒中的用途。通过上述技术方案，本发明在不进行诱导的条件下显著地提高了外源蛋白的表达量。
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公开(公告)号：CN104480110A
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201410429204.7
申请日：2014-08-27
Applicant: 中国农业科学院生物技术研究所
IPC: C12N15/113 , C12N15/82 , A01H5/00 , A01H4/00
Abstract: 本发明公开了玉米组织特异性启动子及其应用，属于植物组织特异性启动子的分离和应用领域。本发明从玉米中分离获得核苷酸序列为SEQ ID NO.1的组织特异性启动子以及截短后的SEQ ID NO.2所示的组织特异性启动子。本发明还公开了含有所述组织特异性启动子的重组植物表达载体以及宿主细胞。本发明进一步公开了所述组织特异性启动子在提高作物种子品质、改良作物性状以及培育转基因植物新品种等方面的应用。
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