一种提高肌酸酶热稳定性的方法

    公开(公告)号:CN106399283B

    公开(公告)日:2019-09-17

    申请号:CN201610865045.4

    申请日:2016-09-29

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高肌酸酶热稳定性的方法,属于基因工程和酶工程领域。本发明的突变体,是在Pseudomonas putida源的肌酸酶的基础上进行氨基酸替换突变得到的。本发明的突变体H125C/L130C与野生型肌酸酶相比Tm值增加了8.2℃,热稳定性得到了显著的提高。通过本发明的方法,有效提高了肌酸酶的热稳定性。

    一种胆固醇酯酶的制备方法

    公开(公告)号:CN109971735A

    公开(公告)日:2019-07-05

    申请号:CN201910266195.7

    申请日:2019-04-03

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种胆固醇酯酶的制备方法,属于酶工程技术领域。本发明中的胆固醇酯酶是利用保藏编号为CCTCC NO:M2017661的洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia)ZWS15进行制备得到。该酶具有良好的酸碱稳定性和温度稳定性,70℃下2小时酶活残留量还有70%,且能够耐受5%的高浓度的表面活性剂,和50%高浓度的有机溶剂。本发明制备得到的胆固醇酯酶对胆固醇苯甲酸酯、胆固醇油酸酯、胆固醇亚油酸酯、胆固醇辛酸酯的胆固醇酯酶活力分别高达415U/L、1038U/L、996U/L、294U/L。且能够降解三酰基甘油酯及对硝基苯酯类底物。

    一种在油水两相体系下高效脱除二苯并噻吩中硫的方法

    公开(公告)号:CN106010633B

    公开(公告)日:2018-01-16

    申请号:CN201610309780.7

    申请日:2016-05-11

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种在油水两相体系下高效脱除二苯并噻吩中硫的方法,属于生物脱硫技术领域。本发明基于单因素考擦菌体生长、脱硫及响应面优化分析获得油水两相体系的最佳脱硫条件:油水体积比1:5;转速200rpm;β‑CD 4.44g/L;烟酰胺:1.57mmol/L;核黄素20.7μmmol/L。脱硫效率是对照体系的4.1倍。此外,该菌株对国Ⅳ,国Ⅴ标准模拟油的处理效果较好,最终能达到无硫水平。本发明模式显著提高了戈登氏菌种脱除二苯并噻吩中硫的能力,有望广泛应用于工业燃料油的脱硫。

    一种提高肌酸酶pH稳定性的方法

    公开(公告)号:CN107201357A

    公开(公告)日:2017-09-26

    申请号:CN201710376236.9

    申请日:2017-05-25

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明公开了一种提高肌酸酶pH稳定性的方法,属于酶工程领域。本发明通过多聚赖氨酸对游离肌酸酶同源二聚体进行修饰,获得了pH稳定性提高,kcat/Km仅仅降低24%的肌酸酶。此方法条件温和,操作简单,更加适合工业化应用,为肌酸酶在医疗诊断等领域的应用提供了方便。而且本发明的方法也为其他多亚基酶的稳定性改造提供了一条可行的途径。

    一组芽孢杆菌属(Bacillus)菌种检测探针

    公开(公告)号:CN103757107B

    公开(公告)日:2017-01-11

    申请号:CN201410007446.7

    申请日:2014-01-08

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 一组芽孢杆菌属(Bacillus)菌种检测探针,属于核酸检测领域。具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:用于特异性结合芽孢杆菌属的16S rRNA的分析探针、用于结合在载体上并与分析探针特异性结合的捕获探针以及用于与分析探针特异性结合的信号探针。分析探针具有如SEQ ID NO:1所示的核苷酸序列;捕获探针具有如SEQ ID NO:2所示的核苷酸序列,具有生物素标记;信号探针具有如SEQ ID NO:3所示的核苷酸序列,在3´端有异硫氰酸(FITC)标记。在每毫升培养液B.subtilis菌体浓度在1.33×102-2.13×105范围内与检测信号强度线性相关,R²=0.99741,而且特异性好、灵敏度高、稳定性高、定性定量,可应用到白酒等传统发酵生产过程中芽孢杆菌属的实时监测。

    一种黄铜矿生物浸出过程中吸附态微生物的检测方法

    公开(公告)号:CN103276079B

    公开(公告)日:2015-05-20

    申请号:CN201310205395.4

    申请日:2013-05-27

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02P10/234

    Abstract: 一种黄铜矿生物浸出过程中吸附态微生物的检测方法,属于生物浸出技术领域。本发明包括用于矿石表面吸附菌种的洗涤方法、吸附态总的菌体浓度的计算以及混菌体系下微生物的定性定量检测方法。以黄铜矿生物浸出的三个不同浸出体系:氧化亚铁硫杆菌CUMT-1纯菌体系、氧化硫硫杆菌ZJJN-1纯菌体系以及两菌的混菌(个数浓度1︰1)体系为例进行了验证,发现本发明方法操作简单易行,对设备要求低且在混菌体系下检测具有特异性好和稳定性高等优点,可以快速实现生物浸出过程中吸附态微生物定性定量检测,对提高浸出率提供了基础技术手段,适于推广应用。

    一种利用微藻处理发酵工业废水并生产藻粉的方法

    公开(公告)号:CN102863115B

    公开(公告)日:2014-07-02

    申请号:CN201110189591.8

    申请日:2011-07-07

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: Y02W10/37

    Abstract: 本发明提供了一种利用微藻处理发酵工业废水并生产藻粉的方法,包括以下步骤:(1)预处理发酵工业废水;(2)加入微藻进行处理;(3)收集微藻;(4)制成藻粉。较佳地,预处理包括稀释发酵工业废水和调节发酵工业废水的pH值,从而适于微藻生长,CO2气体为收集发酵工厂释放的CO2,作为微藻培养的主要碳源,处理在光生物反应器进行,优选透明的槽式封闭光生物反应器。本发明的利用微藻处理发酵工业废水并生产藻粉的方法在发酵工业废水处理的同时,实现CO2减排和生产藻粉,降低生产成本,可达到废物资源的综合利用,实现节能减排的绿色生产,适用从实验室到工业规模化微藻培养,设计巧妙独特,适于大规模推广应用。

    氧化亚铁硫杆菌检测探针组合物及相关检测方法

    公开(公告)号:CN102839210B

    公开(公告)日:2014-05-21

    申请号:CN201110169853.4

    申请日:2011-06-22

    Applicant: 江南大学

    Abstract: 本发明涉及一种氧化亚铁硫杆菌检测探针组合物,包括用于特异性结合氧化亚铁硫杆菌的rRNA的分析探针、用于结合在载体上并与分析探针特异性结合的捕获探针以及用于与分析探针特异性结合的信号探针,所述信号探针具有蛋白标记,较佳地,分析探针具有如SEQ?ID?NO:1所示的核苷酸序列,捕获探针具有如SEQ?ID?NO:2所示的核苷酸序列,捕获探针具有生物素标记,信号探针具有如SEQ?ID?NO:3所示的核苷酸序列,蛋白标记是荧光素标记。还提供了一种氧化亚铁硫杆菌检测方法。本发明的氧化亚铁硫杆菌检测探针组合物设计巧妙,可以快速定性定量检测氧化亚铁硫杆菌,且检测方法操作简单、重复性好,适于大规模推广应用。

    一组裂殖壶菌菌种检测探针

    公开(公告)号:CN103667473A

    公开(公告)日:2014-03-26

    申请号:CN201310646491.2

    申请日:2013-12-06

    Applicant: 江南大学

    CPC classification number: C12Q1/6834 C12Q2565/519 C12Q2521/307 C12Q2563/131

    Abstract: 一组裂殖壶菌菌种检测探针,属于核酸检测领域。本发明具体包括三条相互关联的寡核苷酸探针:用于特异性结合裂殖壶菌(S.limacinum)的rRNA的分析探针,用于结合在载体上并与分析探针特异性结合的捕获探针,以及用于与分析探针特异性结合的信号探针。分析探针具有如SEQIDNO:1所示的核苷酸序列;捕获探针具有如SEQIDNO:2所示序列,具有生物素标记;信号探针具有如SEQIDNO:3所示序列,在5´端有异硫氰酸(FITC)标记。该检测探针在每毫升培养液S.limacinum菌体浓度在0.29×103~2.1×103范围内与检测信号强度线性相关(R²=0.9942),特异性好、灵敏度高、稳定性高、定性定量,用于S.limacinum的菌种选育及该菌发酵生产过程中的质量检测。

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