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公开(公告)号：CN118813572B
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202411174985.X
申请日：2024-08-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种S‑腺苷蛋氨酸合成酶活性提高的突变体及其应用，属于生物酶工程技术领域。对S‑腺苷蛋氨酸合成酶MAT的189位、200位、234位、266位、371位进行定点组合突变，得到了酶活提高的一系列突变体，其中以I189V/N371R提升最为明显，比酶活为1.092±0.0497U·mg‑1，相对于亲本WT提升了342.82％。本申请提供的酶突变体，在生产S‑腺苷蛋氨酸以及构建S‑腺苷蛋氨酸的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN118581052B
公开(公告)日：2025-04-25
申请号：CN202410635539.8
申请日：2024-05-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了酶活与热稳定性提高的谷胱甘肽双功能合成酶突变体及应用，属于基因工程和发酵工程领域。所述谷胱甘肽双功能合成酶突变体选自如下任一种：其氨基酸序列由SEQ ID NO.1所示序列突变获得，所述突变为选自如下一个或多个氨基酸残基位点发生突变：61位、218位、485位和722位。本申请通过对谷胱甘肽双功能合成酶GshFst的氨基酸序列(SEQ ID NO.1)进行定点突变，获得的单突变体，以及两个位点突变获得的双突变体，其酶活和热稳定性相较于野生型均具有显著提升。本申请提供的酶突变体，在生产谷胱甘肽以及构建生产谷胱甘肽的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN118581052A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410635539.8
申请日：2024-05-22
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了酶活与热稳定性提高的谷胱甘肽双功能合成酶突变体及应用，属于基因工程和发酵工程领域。所述谷胱甘肽双功能合成酶突变体选自如下任一种：其氨基酸序列由SEQ ID NO.1所示序列突变获得，所述突变为选自如下一个或多个氨基酸残基位点发生突变：61位、218位、485位和722位。本申请通过对谷胱甘肽双功能合成酶GshFst的氨基酸序列(SEQ ID NO.1)进行定点突变，获得的单突变体，以及两个位点突变获得的双突变体，其酶活和热稳定性相较于野生型均具有显著提升。本申请提供的酶突变体，在生产谷胱甘肽以及构建生产谷胱甘肽的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN119144578A
公开(公告)日：2024-12-17
申请号：CN202411174979.4
申请日：2024-08-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种S‑腺苷蛋氨酸合成酶突变体及其应用，属于基因工程和发酵工程领域。对S‑腺苷蛋氨酸合成酶MAT的189位、200位、234位、266位、370位、371位进行定点组合突变，得到了酶活提高的一系列突变体，其中N371R的酶活力提高幅度最大，比酶活为1.2128±0.0423U·mg‑1，是WT的4.91倍。本申请提供的酶突变体，在生产S‑腺苷蛋氨酸以及构建S‑腺苷蛋氨酸的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN118813572A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202411174985.X
申请日：2024-08-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种S‑腺苷蛋氨酸合成酶活性提高的突变体及其应用，属于生物酶工程技术领域。对S‑腺苷蛋氨酸合成酶MAT的189位、200位、234位、266位、371位进行定点组合突变，得到了酶活提高的一系列突变体，其中以I189V/N371R提升最为明显，比酶活为1.092±0.0497U·mg‑1，相对于亲本WT提升了342.82％。本申请提供的酶突变体，在生产S‑腺苷蛋氨酸以及构建S‑腺苷蛋氨酸的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN116042545B
公开(公告)日：2025-04-11
申请号：CN202310035864.6
申请日：2023-01-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/00 , C12N15/70 , C12N15/52 , C12N1/21 , C07K5/093 , C12P21/02 , A61K38/06 , A61P39/02 , A61P39/06 , A61K8/64 , A61Q19/08 , A61Q19/00 , A23L33/18 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种大肠杆菌谷胱甘肽双功能合成酶蛋白突变体、基因工程菌及应用。本发明首先对来源于嗜热链球菌的谷胱甘肽双功能合成酶进行异源表达，构建了重组大肠杆菌，对谷胱甘肽双功能合成酶蛋白进行改造，对其进行定点突变，提高了酶活。本发明成功在大肠杆菌中表达了谷胱甘肽双功能合成酶，并进一步提高了酶活，酶活提高了48.93％，有利于进一步提高谷胱甘肽的产量。通过全细胞催化，突变体S722A的谷胱甘肽产量达到20.10mmol/L，产量和转化率都有了进一步提高。
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公开(公告)号：CN116042545A
公开(公告)日：2023-05-02
申请号：CN202310035864.6
申请日：2023-01-10
Applicant: 江南大学
IPC: C12N9/00 , C12N15/70 , C12N15/52 , C12N1/21 , C07K5/093 , C12P21/02 , A61K38/06 , A61P39/02 , A61P39/06 , A61K8/64 , A61Q19/08 , A61Q19/00 , A23L33/18 , C12R1/19
Abstract: 本发明涉及基因工程技术领域，具体涉及一种大肠杆菌谷胱甘肽双功能合成酶蛋白突变体、基因工程菌及应用。本发明首先对来源于嗜热链球菌的谷胱甘肽双功能合成酶进行异源表达，构建了重组大肠杆菌，对谷胱甘肽双功能合成酶蛋白进行改造，对其进行定点突变，提高了酶活。本发明成功在大肠杆菌中表达了谷胱甘肽双功能合成酶，并进一步提高了酶活，酶活提高了48.93％，有利于进一步提高谷胱甘肽的产量。通过全细胞催化，突变体S722A的谷胱甘肽产量达到20.10mmol/L，产量和转化率都有了进一步提高。
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公开(公告)号：CN109971789A
公开(公告)日：2019-07-05
申请号：CN201910225056.X
申请日：2019-03-25
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种基因编辑系统及其在新金色分枝杆菌中的应用，属于基因工程技术领域以及生物工程技术领域。此系统可达到对新金色分枝杆菌进行基因编辑的目的，其工作机制如下：先将pML‑Cpf1质粒导入新金色分枝杆菌中，使得pML‑Cpf1质粒上的Cpf1基因、编码DNA末端结合蛋白mku的基因以及编码DNA连接酶LigD的基因表达，然后将pJM‑crRNA质粒导入新金色分枝杆菌中，使得pJM‑crRNA质粒转录生成crRNA序列，crRNA序列会与Cpf1基因结合形成复合物，此复合物会靶向并切割需编辑基因使得新金色分枝杆菌中需编辑的基因被敲除。
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公开(公告)号：CN118581053A
公开(公告)日：2024-09-03
申请号：CN202410635546.8
申请日：2024-05-22
Applicant: 江苏集萃未来食品技术研究所有限公司 , 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活性提高的谷胱甘肽双功能合成酶突变体及应用，属于基因工程和发酵工程技术领域。所述谷胱甘肽双功能合成酶突变体将136位亮氨酸突变为赖氨酸，并将498位缬氨酸突变为半胱氨酸，得到了酶活提高的突变体L136K/V498C，其比酶活较亲本提高了86.80％，在37℃半衰期为134min，其相对热稳定性较亲本提高了40.95％，说明该突变体的酶活和热稳定性得到大大提升；所述突变体L136K/V498C全细胞催化合成谷胱甘肽产量为24.17mM。本申请提供的酶突变体，在生产谷胱甘肽以及构建生产谷胱甘肽的基因工程微生物中具有广阔的应用前景。
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