一种漆酶EcLac及其应用、以及漆酶基因eclac及其应用

    公开(公告)号:CN115125220B

    公开(公告)日:2024-03-01

    申请号:CN202210808182.X

    申请日:2022-07-07

    Inventor: 杨江科 周波

    Abstract: 本发明公开一种漆酶EcLac及其应用、以及漆酶基因eclac及其应用;所述漆酶EcLac的氨基酸序列如SEQ ID NO:1所述。与原始的漆酶Lac相比较,漆酶EcLac的活性提高约3.9倍,使得所述漆酶EcLac具有高产、高活性的优点,且制造成本低,适于工业化生产,解决了现有漆酶的产量过低、活性较低、成本较高的问题。(56)对比文件Laura Cortes et al..The functionalroles of the three copper sitesassociated with the methionine-richinsert in the multicopper oxidase CueOfrom E. coli《.Metallomics》.2015,第776-785页.Takao Kajikawa et al..Modificationson the hydrogen bond network by mutationsof Escherichia coli copper efflux oxidaseaffect the process of proton transfer todioxygen leading to alterations ofenzymatic activities《.Biochemical andBiophysical Research Communications》.2012,第152-156页.Xiaojian Ma et al..High-levelexpression of a bacterial laccase, CueOfrom Escherichia coli K12 in Pichiapastoris GS115 and its application on thedecolorization of synthetic dyes《.Enzymeand Microbial Technology》.2017,第34-41页.

    一种改性淀粉酶的基因及其应用
    2.
    发明公开

    公开(公告)号:CN116410957A

    公开(公告)日:2023-07-11

    申请号:CN202211742767.2

    申请日:2022-12-29

    Abstract: 本发明公开一种改性淀粉酶的基因及其应用,所述改性淀粉酶的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。通过在原始淀粉酶的基础上,人工的理性设进行了定点突变改造,得到改造后的改性淀粉酶的氨基酸序列,然后根据该改性淀粉酶的氨基酸序列,人工重新优化设计改性淀粉酶的基因的核苷酸序列,由该改性淀粉酶的基因编码所得的改性淀粉酶可以很好地提高酶活性和产量。改性淀粉酶最适温度为60℃,最适pH为6。该酶具有良好的耐热性,在40‑90℃温度范围内,酶活均高95%;90℃处理1h,还能保持90%以上的酶活性;pH4~9范围内,淀粉酶活均保持在最高酶活性的90%以上。本发明可以获得具有良好应用前景的高产淀粉酶AMY2‑syn菌株,这非常有利于淀粉酶AMY2‑syn推广和在工业中的应用。

    一种脂肪酶基因COLIP及其编码的脂肪酶

    公开(公告)号:CN104152471B

    公开(公告)日:2017-01-04

    申请号:CN201410416419.5

    申请日:2014-08-22

    Abstract: 本发明属于人工合成基因领域,具体涉及一种脂肪酶基因COLIP及其编码的脂肪酶、表达脂肪酶基因COLIP的基因工程菌。本发明公开了一种脂肪酶基因COLIP,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,由其编码的脂肪酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。与现有技术相比,本发明所获得的脂肪酶基因COLIP可在毕赤酵母中超高效表达,所构建的毕赤酵母基因工程菌GS115(COLIP)可以用来大量生产脂肪酶。发酵结果显示:在10 L发酵罐条件下,发酵120小时,发酵液中脂肪酶的酶活可稳定在45,000 U/mL以上,发酵液中蛋白含量稳定在3.2 g/L以上。

    一种高稳定性乳糖酶及其在低聚半乳糖生产中的应用

    公开(公告)号:CN119736280A

    公开(公告)日:2025-04-01

    申请号:CN202411583375.5

    申请日:2024-11-07

    Abstract: 本发明属于基因工程领域,涉及一种高稳定性乳糖酶及其在低聚半乳糖生产中的应用。本发明乳糖酶NK‑Lac的核心氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,经过人工定向进化,显著增强了其温度和pH稳定性与表达效率。通过摇瓶发酵,重组菌株展示了更高的蛋白产量和酶活性,尤其在60%乳糖底物浓度下表现出卓越的催化效率。将15U酶液加入乳糖溶液中,在50℃下反应12‑21h,可高效转化乳糖生成高浓度GOS糖浆。反应后,采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析GOS生成情况,验证其产量与纯度。该方法不仅满足了高浓度GOS糖浆的生产需求,还简化了工业化制备工艺,提供了稳定且高效的解决方案。

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