公开(公告)号：CN119736280A

公开(公告)日：2025-04-01

申请号：CN202411583375.5

申请日：2024-11-07

Applicant: 武汉轻工大学

Inventor： 杨江科 ,  朱美鑫 ,  苗润发

IPC: C12N9/38 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/04 ,  C12P19/00

Abstract: 本发明属于基因工程领域，涉及一种高稳定性乳糖酶及其在低聚半乳糖生产中的应用。本发明乳糖酶NK‑Lac的核心氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，经过人工定向进化，显著增强了其温度和pH稳定性与表达效率。通过摇瓶发酵，重组菌株展示了更高的蛋白产量和酶活性，尤其在60％乳糖底物浓度下表现出卓越的催化效率。将15U酶液加入乳糖溶液中，在50℃下反应12‑21h，可高效转化乳糖生成高浓度GOS糖浆。反应后，采用薄层色谱(TLC)和高效液相色谱(HPLC)分析GOS生成情况，验证其产量与纯度。该方法不仅满足了高浓度GOS糖浆的生产需求，还简化了工业化制备工艺，提供了稳定且高效的解决方案。

公开(公告)号：CN119752853A

公开(公告)日：2025-04-04

申请号：CN202411583372.1

申请日：2024-11-07

Applicant: 武汉轻工大学

Inventor： 杨江科 ,  朱美鑫 ,  成静 ,  田小笛

IPC: C12N9/38 ,  C12N15/56 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P19/14 ,  C12P19/12 ,  C12P19/04 ,  C12P19/00

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，涉及一种耐高温乳糖酶及应用与一锅法合成低聚半乳糖的方法。本发明所述乳糖酶GAL‑Sup的核心氨基酸序列如SEQ ID NO：1所示，通过人工定向进化获得了显著提高温度稳定性和表达水平的乳糖酶基因。在“一锅法”的GOS合成过程中，GAL‑Sup乳糖酶在70％底物浓度的乳糖溶液中表现出极高的热稳定性，耐受温度高达80℃，且反应速率大幅提升。将含500U的酶液加入乳糖酶溶液后，在80℃条件下反应15‑24h，可高效将乳糖转化为低聚半乳糖，满足高浓度糖浆生产的需求。本发明所提供的乳糖酶不仅提高了酶的热稳定性和活性，而且为工业化生产低聚半乳糖提供了高效途径。

公开(公告)号：CN119391696A

公开(公告)日：2025-02-07

申请号：CN202411592556.4

申请日：2024-11-08

Applicant: 武汉轻工大学

Inventor： 杨江科 ,  苗润发 ,  朱美鑫 ,  田小笛 ,  鲍丙杰

IPC: C12N15/10 ,  C12R1/84 ,  C12R1/865 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明属于基因工程技术领域，具体地，涉及一种快速提取酵母基因组DNA的方法及应用。所述快速提取酵母基因组DNA的方法的主要步骤包括：细胞重悬，碱性溶液处理，微波加热和离心沉淀。本发明方法无需使用玻璃珠、研磨杵等物理研磨手段，也无需酚、氯仿等毒性较大的有机溶剂进行抽提。该方法操作步骤简单，安全性高，适用于大规模制备酵母基因组DNA，整个操作流程仅需10～15分钟即可完成。本发明所制备的酵母DNA溶液可用于PCR扩增的模板，长度大于5000bp的基因均能被高效地扩增出来。本发明方法适用于毕赤酵母、酿酒酵母、乳酸克鲁维酵母等多种酵母细胞的基因工程操作，显著地提高了对酵母细胞进行遗传改造的效率。