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公开(公告)号：CN114292825B
公开(公告)日：2023-08-18
申请号：CN202111549905.0
申请日：2021-12-17
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种托品酮的合成方法，合成生物学和酶催化技术领域。本发明通过联用能产生4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸的工程菌株与能催化4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸转化成托品酮的单胺氧化酶合成了托品酮。所述的工程菌株含有合成4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸的相关基因；所述的单胺氧化酶为氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质(即MAO‑N)。本发明为托品酮的合成提供了一条绿色高效的新路线，具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN110172078B
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201910517841.2
申请日：2019-06-14
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种19羟化可托多松衍生物及19‑羟基雄烯二酮的制备方法，属于有机合成及药学领域。本发明以19‑羟基可托多松为原料，在双氧水、三甲基碘硅烷、钯碳、二氯二氰基苯醌、氧化碘苯、硼氢化钠和高碘酸钠等试剂的分别作用下，使19‑羟基可托多松进行如下反应中的至少一种：对19‑羟基可托多松A环、B环进行结构修饰；使19‑羟基可托多松的17、21和/或19位羟基被取代基取代；切除19‑羟基可托多松的侧链。本发明极大程度地提高了炔诺酮类避孕药合成的必需中间体19‑羟基雄烯二酮的制备效率，降低了药物生产成本。
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公开(公告)号：CN110172078A
公开(公告)日：2019-08-27
申请号：CN201910517841.2
申请日：2019-06-14
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种19羟化可托多松衍生物及19-羟基雄烯二酮的制备方法，属于有机合成及药学领域。本发明以19-羟基可托多松为原料，在双氧水、三甲基碘硅烷、钯碳、二氯二氰基苯醌、氧化碘苯、硼氢化钠和高碘酸钠等试剂的分别作用下，使19-羟基可托多松进行如下反应中的至少一种：对19-羟基可托多松A环、B环进行结构修饰；使19-羟基可托多松的17、21和/或19位羟基被取代基取代；切除19-羟基可托多松的侧链。本发明极大程度地提高了炔诺酮类避孕药合成的必需中间体19-羟基雄烯二酮的制备效率，降低了药物生产成本。
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公开(公告)号：CN114317631B
公开(公告)日：2023-11-07
申请号：CN202111549936.6
申请日：2021-12-17
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了单胺氧化酶在制备托品酮中的应用，属于酶催化和合成生物学技术领域。本发明提供的单胺氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明提供了该酶在制备托品酮中的应用，通过催化4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸转化为托品酮。本发明制备托品酮的方法绿色温和，环境友好，其相较于P450的催化效率有显著的提升，具有应用前景。
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公开(公告)号：CN109180691A
公开(公告)日：2019-01-11
申请号：CN201810971942.2
申请日：2018-08-24
Applicant: 武汉大学
IPC: C07D487/22 , C07D519/00 , A61P25/00 , C12P17/18
Abstract: 本发明公开了一种C3-芳香型吡咯并吲哚类生物碱及其合成方法。该类化合物具有体外抗神经损伤活性。通过将nascB-P450基因以及菠菜来源的电子传递系统Fd/FdR共同转化到改造过的新型抗溶菌大肠杆菌GB05dir-T7中的方法构建全菌催化系统，实现了将含有色氨酸的环二肽底物催化转化为不同区域/立体选择性的多种二聚产物，该方法操作简单，催化效率高，所得目标产物光学纯度高，后处理简单，环保安全性好。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN108690837A
公开(公告)日：2018-10-23
申请号：CN201710237756.1
申请日：2017-04-12
Applicant: 武汉大学
CPC classification number: C12N9/0006
Abstract: 本发明公开了一种提高多聚体蛋白热稳定性的方法及热稳定性提高的醇脱氢酶，属于酶工程技术领域。提高多聚体蛋白热稳定性的方法为通过在N端相邻（8Å范围内）的多聚体蛋白的N端和内部亚基接触界面间引入共价键的方式，使多聚体蛋白的各个亚基链接起来，形成一个环合的整体。热稳定性提高的醇脱氢酶的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4，这些醇脱氢酶与野生型相比T5015值分别提高了5.5℃、6.0℃和18℃。本发明避免了现有技术中面临的筛选工作量大和过程繁琐等问题，同时通过界面间二硫键引入的策略使定点突变更有针对性。
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公开(公告)号：CN108949707A
公开(公告)日：2018-12-07
申请号：CN201710378065.3
申请日：2017-05-24
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种热稳定性提高的醇脱氢酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的醇脱氢酶突变体为以SEQ ID NO.1所示野生型醇脱氢酶为基础进行了如下突变后的突变体中的一种：第100位的T突变为R或K的单突变体T100R、T100K；第148位的S突变为I、V或L的单突变体S148I、S148V、S148L；第100位的T突变为R且第148位的S突变为I、V或L的双突变体；第100位的T突变为K且第148位的S突变为I、V或L的双突变体。这些突变体的热稳定性相对于野生型有了更进一步的提升，更加适合工业化的生产需求，具有更加广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN114317631A
公开(公告)日：2022-04-12
申请号：CN202111549936.6
申请日：2021-12-17
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了单胺氧化酶在制备托品酮中的应用，属于酶催化和合成生物学技术领域。本发明提供的单胺氧化酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示，本发明提供了该酶在制备托品酮中的应用，通过催化4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸转化为托品酮。本发明制备托品酮的方法绿色温和，环境友好，其相较于P450的催化效率有显著的提升，具有应用前景。
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公开(公告)号：CN114292825A
公开(公告)日：2022-04-08
申请号：CN202111549905.0
申请日：2021-12-17
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种托品酮的合成方法，合成生物学和酶催化技术领域。本发明通过联用能产生4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸的工程菌株与能催化4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸转化成托品酮的单胺氧化酶合成了托品酮。所述的工程菌株含有合成4‑(1‑甲基‑2‑吡咯烷基)‑3‑氧代丁酸的相关基因；所述的单胺氧化酶为氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的蛋白质(即MAO‑N)。本发明为托品酮的合成提供了一条绿色高效的新路线，具有较好的工业应用前景。
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公开(公告)号：CN108690837B
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN201710237756.1
申请日：2017-04-12
Applicant: 武汉大学
Abstract: 本发明公开了一种提高多聚体蛋白热稳定性的方法及热稳定性提高的醇脱氢酶，属于酶工程技术领域。提高多聚体蛋白热稳定性的方法为通过在N端相邻（8Å范围内）的多聚体蛋白的N端和内部亚基接触界面间引入共价键的方式，使多聚体蛋白的各个亚基链接起来，形成一个环合的整体。热稳定性提高的醇脱氢酶的序列分别如SEQ ID NO.2、SEQ ID NO.3或SEQ ID NO.4，这些醇脱氢酶与野生型相比T5015值分别提高了5.5℃、6.0℃和18℃。本发明避免了现有技术中面临的筛选工作量大和过程繁琐等问题，同时通过界面间二硫键引入的策略使定点突变更有针对性。
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