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公开(公告)号：CN119014327A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202310594409.X
申请日：2023-05-24
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了罗汉果茎尖玻璃化超低温冷冻保存及再生培养方法，步骤包括预处理、低温锻炼、高渗培养、加载、脱水、冷冻、解冻、洗涤、过渡恢复培养、茎尖培养，所述预处理中，采用含有多效唑和2,4‑表油菜素内酯的培养基对罗汉果无菌组培苗进行预培养；所述茎尖培养中，将过渡恢复培养后的茎尖转至含有2,4‑表油菜素内酯的培养基中培养获得再生苗。本发明中，植株经过多效唑和2,4‑表油菜素内酯预处理，提高了种苗的抗性，在冷冻后茎尖得以存活。茎尖培养采用的培养基中添加不同种类生长素结合2,4‑表油菜素内酯减少愈伤组织的形成，促进丛生芽再生，显著提高茎尖冷冻后再生率。二者结合，再生率高、稳定性好、重复性强，普遍适用于不同株系。
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公开(公告)号：CN115669389A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202110871798.7
申请日：2021-07-30
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
IPC: A01G2/30
Abstract: 本发明公开了罗汉果种苗茎尖微嫁接培养方法，以无毒罗汉果组培苗茎段作为砧木，以带毒组培苗等于小于0.5mm的茎尖为接穗，嫁接于所述砧木，培养至成幼苗。本发明通过把罗汉果等于小于0.5毫米离体茎尖在组培阶段嫁接到无毒组培苗砧木上培养生长，建立了茎尖微嫁接培养技术，在确保茎尖培养脱毒效率的同时，大大缩短了获得再生脱毒种苗的时间。
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公开(公告)号：CN115669537A
公开(公告)日：2023-02-03
申请号：CN202110871797.2
申请日：2021-07-30
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了罗汉果组培外植体入瓶方法，取罗汉果的茎段，表面清洁后浸泡于70％以上的酒精中进行表面消毒，剥取0.5‑2毫米茎尖，接种至培养基中，即完成罗汉果组培外植体入瓶。在消毒处理中，避免使用剧毒化学品升汞，对操作人员和环境都非常安全，操作简单，而且消毒效果好，成株率高，解决了野外采集罗汉果枝条材料的组培入瓶的微生物污染问题。
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公开(公告)号：CN118374629A
公开(公告)日：2024-07-23
申请号：CN202410620894.8
申请日：2024-05-20
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了高甜甙罗汉果新品种特异性RAPD分子标记鉴定引物及其方法、应用。其中，所述RAPD分子标记鉴定引物包括一个或任意两个以上以下所述RAPD随机引物：RP1：ACGGTACCAG；RP2：CAGCGACAAG；RP3：TGCCCAGCCT；RP4：TCGCATCCCT；RP5：GGCTGCGACA；RP6：GACACGGACC；RP7：CCGAACACGG；RP8：AAGCCCGAGG；RP9：TGGTCGCAGA；RP10：CCCGATCAGA。高甜甙罗汉果新品种为自主选育获得，其成熟果实甜甙V较主栽品种提高20％以上，本发明筛选得到的10个RAPD随机引物对其有高度特异性，能明显将其与其他常规罗汉果品种区分开来。
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公开(公告)号：CN118360267A
公开(公告)日：2024-07-19
申请号：CN202410611221.6
申请日：2024-05-16
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种蔗糖合成酶及其在食品中的应用，蔗糖合成酶的制备方法包括以下步骤：(1)菌株活化：将甲基杆菌接种到牛肉膏蛋白胨培养基中，培养，得到种子液；甲基杆菌保藏编号为SHBCC D10457，上海保藏微生物中心；(2)发酵：将种子液接种到发酵培养基，在发酵罐中进行发酵培养，得到发酵液；(3)纯化；(4)将洗脱液中的蔗糖合成酶进行超滤置换，置换于20mM pH为4.6的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液中，得到蔗糖合成酶液，蔗糖合成酶液中酶活为500U/μL，将蔗糖合成酶液和保护液等体积混合。本发明的蔗糖合成酶的酶活高、稳定性强，便于储存、长途运输和推广使用。
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Patent Agency Ranking
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公开(公告)号：CN110447415A
公开(公告)日：2019-11-15
申请号：CN201910776409.5
申请日：2019-08-22
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
IPC: A01G7/06
Abstract: 一种增强罗汉果脱毒种苗抗性的方法，所述的方法在罗汉果脱毒种苗培育阶段采用氨基丁酸处理，所述的处理方式为用含有氨基丁酸的培养基培养幼苗或用氨基丁酸对幼苗进行灌根处理。本发明通过采用氨基丁酸抗性增强剂处理幼苗阶段的罗汉果种苗，激发罗汉果自身免疫功能，增强罗汉果植株的抗病抗虫能力，避免或减少罗汉果大田栽培期间的病虫害防治措施，降低农资和劳动力成本，降低罗汉果产品农残风险。
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公开(公告)号：CN118599799B
公开(公告)日：2025-03-07
申请号：CN202410720861.0
申请日：2024-06-05
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种糖基转移酶及其在生产糖苷的中应用。本发明利用分子克隆技术从一株耐低温的枯草芽孢杆菌中克隆得到一种糖基转移酶，将克隆得到的糖基转移酶分子构建表达载体在体外进行了成功表达。酶活试验表明，体外表达的糖基转移酶能够将莱鲍迪苷A催化为莱鲍迪苷D，且该糖基转移酶具有耐低温的特性，在25℃条件下依然可以催化反应的发生，具有广泛的pH值反应范围，在pH6‑8范围内均可以实现催化反应的进行。本发明公开的新的糖基转移酶具有的耐低温宽pH值反应的优点，适合各种糖苷糖基化产物的生产。
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公开(公告)号：CN118360267B
公开(公告)日：2025-01-17
申请号：CN202410611221.6
申请日：2024-05-16
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
Abstract: 本发明提供了一种蔗糖合成酶及其在食品中的应用，蔗糖合成酶的制备方法包括以下步骤：(1)菌株活化：将甲基杆菌接种到牛肉膏蛋白胨培养基中，培养，得到种子液；甲基杆菌保藏编号为SHBCC D10457，上海保藏微生物中心；(2)发酵：将种子液接种到发酵培养基，在发酵罐中进行发酵培养，得到发酵液；(3)纯化；(4)将洗脱液中的蔗糖合成酶进行超滤置换，置换于20mM pH为4.6的磷酸氢二钠‑磷酸二氢钠缓冲液中，得到蔗糖合成酶液，蔗糖合成酶液中酶活为500U/μL，将蔗糖合成酶液和保护液等体积混合。本发明的蔗糖合成酶的酶活高、稳定性强，便于储存、长途运输和推广使用。
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公开(公告)号：CN119014326A
公开(公告)日：2024-11-26
申请号：CN202310593965.5
申请日：2023-05-24
Applicant: 桂林莱茵生物科技股份有限公司
IPC: A01H4/00
Abstract: 本发明公开了罗汉果茎尖玻璃化超低温冷冻保存及再生培养方法，步骤包括预处理、低温锻炼、高渗培养、加载、脱水、冷冻、解冻、洗涤、过渡恢复培养、茎尖培养，所述预处理中，采用含有多效唑和2,4‑表油菜素内酯的培养基对罗汉果无菌组培苗进行预培养；所述茎尖培养中，将过渡恢复培养后的茎尖转至含有AgNO3的培养基中培养获得再生苗。本发明中，植株经过多效唑和EBR预处理，提高了种苗的抗性，使茎尖在冷冻后得以存活。茎尖培养采用的培养基中添加不同浓度的AgNO3减少了愈伤组织的形成，促进丛生芽再生，显著提高茎尖冷冻后再生率。二者结合，再生率高、稳定性好、重复性强，普遍适用于不同株系。
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