载体、使用了该载体的直链状共价闭合DNA的制备方法、细小病毒载体的制备方法、以及细小病毒载体产生细胞

    公开(公告)号:CN117043344A

    公开(公告)日:2023-11-10

    申请号:CN202280022277.7

    申请日:2022-03-17

    Abstract: 本发明提供具有编码前端粒酶的核酸序列、上述前端粒酶所识别的一对核酸序列、位于上述一对核酸序列之间且编码目标蛋白的核酸序列的载体、使用了该载体的直链状共价闭合DNA的制备方法、细小病毒载体的制备方法、以及细小病毒载体产生细胞,所述细小病毒载体的制备方法包括:将具有编码前端粒酶的核酸序列、上述前端粒酶所识别的一对核酸序列、位于上述一对核酸序列之间且编码蛋白质的核酸序列的载体导入第1宿主的基因导入工序、以及将通过上述基因导入工序得到的直链状共价闭合DNA转染至第2宿主的转染工序,所述细小病毒载体产生细胞是通过直链状共价闭合DNA得到的表达编码蛋白质的核酸序列的细小病毒载体,通过定量PCR法定量时的上述编码蛋白质的核酸序列以外的序列的载体基因组数相对于上述编码蛋白质的核酸序列的载体基因组数在上述细小病毒载体产生细胞的培养上清中为10%以下,或者在上述细小病毒载体产生细胞的细胞溶解液中为1%以下。

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