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公开(公告)号:CN109627333A
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201811348225.0
申请日:2018-11-13
Applicant: 新疆农业大学
Abstract: 本发明涉及细胞工程领域,特别是新疆伊犁株马驽巴贝斯虫Bc48蛋白单克隆抗体制备方法,(1)从含有新疆伊犁马驽巴贝斯虫Bc48重组质粒的大肠杆菌中纯化HIS‑Bc48重组蛋白;(2)取健康6~8周龄BALB/c小鼠若干只,选37℃且5%的CO2效价在105以上的小鼠在融合前3天腹腔注射100μg重组蛋白加强免疫;(3)无菌对小鼠脾脏局部进行提取、融合及培养;(4)用包被HIS‑Bc48蛋白的间接ELISA及Bc48转染293T细胞的间接免疫荧光方法进行筛选,选择其中的阳性株进行亚克隆,4~5次亚克隆后,即可获得稳定分泌马驽巴贝斯虫Bc48蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本发明为今后建立快速的诊断方法,和该蛋白功能的深入研究提供工具。
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公开(公告)号:CN109633160A
公开(公告)日:2019-04-16
申请号:CN201811348223.1
申请日:2018-11-13
Applicant: 新疆农业大学
IPC: G01N33/68 , G01N33/577 , G01N33/569
CPC classification number: G01N33/6893 , G01N33/56905 , G01N33/577
Abstract: 本发明利用胶体金免疫层析技术检测马血清中的抗体,属于血清学检测技术领域,尤其是马驽巴贝斯虫病胶体金检测试纸条及其制备与应用方法,体金检测试纸条主要包括PVC底板,样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜、吸水垫;胶体金检测试纸条的制备方法包括(1)制备胶体金;(2)胶体金标记物制备;(3)金标垫的制备;(4)喷印T线、C线;(5)检测试纸条制备。胶体金检测试纸条的应用方法为:在检测马驽巴贝斯虫病阳性阴性血清时,若发现阳性样品在NC膜上出现清晰的两条带,阴性样品在NC膜上出现清晰的一条带,说明胶体金试纸条有效。本发明具有操作简单、使用方便,可用于临床现场检测马的驽巴贝斯虫病免疫。
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