新疆伊犁株马驽巴贝斯虫Bc48蛋白单克隆抗体制备方法

    公开(公告)号:CN109627333A

    公开(公告)日:2019-04-16

    申请号:CN201811348225.0

    申请日:2018-11-13

    CPC classification number: C07K16/20 C12N15/70

    Abstract: 本发明涉及细胞工程领域,特别是新疆伊犁株马驽巴贝斯虫Bc48蛋白单克隆抗体制备方法,(1)从含有新疆伊犁马驽巴贝斯虫Bc48重组质粒的大肠杆菌中纯化HIS‑Bc48重组蛋白;(2)取健康6~8周龄BALB/c小鼠若干只,选37℃且5%的CO2效价在105以上的小鼠在融合前3天腹腔注射100μg重组蛋白加强免疫;(3)无菌对小鼠脾脏局部进行提取、融合及培养;(4)用包被HIS‑Bc48蛋白的间接ELISA及Bc48转染293T细胞的间接免疫荧光方法进行筛选,选择其中的阳性株进行亚克隆,4~5次亚克隆后,即可获得稳定分泌马驽巴贝斯虫Bc48蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本发明为今后建立快速的诊断方法,和该蛋白功能的深入研究提供工具。

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